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腺病毒介导的肿瘤血管靶向的体外自杀基因治疗研究
被引量:
5
1
作者
徐舲飞
许德华
+3 位作者
戈凯
郑仲承
孙兰英
刘新垣
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
1998年第3期171-174,共4页
本工作在血管内皮细胞中分别建立了HSV-tk/GCV和EC-cd/5-FC自杀基因系统,用于抑制实体肿瘤中血管生成的研究.构建含自杀基因的重组腺病毒AdCMVtk和AdCMVcd,滴度均1×10^(12)pfu/ml.病毒感染小鼠血管内皮细胞lGll(MOI=100),并鉴定自...
本工作在血管内皮细胞中分别建立了HSV-tk/GCV和EC-cd/5-FC自杀基因系统,用于抑制实体肿瘤中血管生成的研究.构建含自杀基因的重组腺病毒AdCMVtk和AdCMVcd,滴度均1×10^(12)pfu/ml.病毒感染小鼠血管内皮细胞lGll(MOI=100),并鉴定自杀基因的表达,测定原药对它们的杀伤.生长抑制试验表明,GCV对lGll/Ad-tk细胞杀伤的IG_(50)为0.2μmol/ L,5-FC对lGll/Ad-cd细胞杀伤的IC_(50)为20μmol/L.电镜下显示被原药杀伤的血管内皮细胞有明显的细胞凋亡现象.同时混合细胞实验证明两系统均存在明显的旁杀伤效应.从而在体外水平证明了HSV-tk/GCV和EC-cd/5-FC自杀基因系统杀伤增生血管内皮细胞的有效性.
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关键词
血管内皮细胞
腺病毒
载体
自杀基因
肿瘤
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职称材料
白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素融合基因的克隆及高效表达
被引量:
3
2
作者
高基民
黄洪莲
+3 位作者
王小宁
徐舲飞
郑仲承
刘新垣
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
1996年第2期129-133,共5页
利用聚合酶链式反应和寡核苷酸介导的定向诱变技术构建了白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素IL2-PE40、IL2-PE40KDEL、IL2-PE66^(4Glu)和IL2-PE66^(4Glu)KDEL融合基因的原核表达重组质粒,并实现了高效表达,表达产物占菌体总可溶蛋白的20%~30...
利用聚合酶链式反应和寡核苷酸介导的定向诱变技术构建了白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素IL2-PE40、IL2-PE40KDEL、IL2-PE66^(4Glu)和IL2-PE66^(4Glu)KDEL融合基因的原核表达重组质粒,并实现了高效表达,表达产物占菌体总可溶蛋白的20%~30%。此外,由于这一表达质粒在IL-2cDNA与PE基因连接处引入了唯一的SmaⅠ位点,其5'、3'端分别含有唯一的EcoRⅠ、PstⅠ位点,因此可方便地用其它基因替换IL-2或PE基因而获得相应融合蛋白的表达质粒。
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关键词
白细胞介素-2
绿脓杆菌外毒素
融合蛋白
制备
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职称材料
CD自杀基因系统对胶质瘤细胞作用的实验研究
被引量:
3
3
作者
徐舲飞
戈凯
+2 位作者
郑仲承
孙兰英
刘新垣
《实验生物学报》
CSCD
1996年第4期385-393,共9页
将含大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(EC-CD)基因的重组逆转录病毒感染大鼠神经胶质瘤细胞C6,获得稳定表达CD的克隆细胞C6/CD。CD可以将无毒性的原药5-氟胞嘧啶(5-FC)转化成高度细胞毒性物质5-氟尿嘧啶(5-FU)。生长抑制试验表明C6/CD细胞对5-FC高...
将含大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(EC-CD)基因的重组逆转录病毒感染大鼠神经胶质瘤细胞C6,获得稳定表达CD的克隆细胞C6/CD。CD可以将无毒性的原药5-氟胞嘧啶(5-FC)转化成高度细胞毒性物质5-氟尿嘧啶(5-FU)。生长抑制试验表明C6/CD细胞对5-FC高度敏感,IC_(50)为3μmol/L;5-FC对C6细胞基本无毒性,IC_(50)近6000μmol/L;而C6/CD和C 6细胞均对低浓度5-FU敏感,IC_(50)小于1μmol/L。混合细胞试验表明C6/CD细胞在5-FC存在下对C6细胞有旁杀伤效应。本工作在细胞水平建立了一个治疗神经胶质瘤的自杀基因系统,过去无人报道过。
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关键词
神经胶质瘤
胞嘧啶脱氨酶
自杀基因
基因治疗
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职称材料
IL-2-绿脓杆菌外毒素融合蛋白增强杀伤细胞活性
被引量:
1
4
作者
高基民
徐舲飞
+3 位作者
郑仲承
林来兴妹
王小宁
刘新垣
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1996年第1期37-40,共4页
实验证实了白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素融合蛋白IL2-PE40REDLK、IL2-PE40KDEL、IL2-PE664GluREDLK、IL2-PE664GluKDEL对含高亲和力IL-2受体靶细胞的杀伤效应是借助于IL-2...
实验证实了白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素融合蛋白IL2-PE40REDLK、IL2-PE40KDEL、IL2-PE664GluREDLK、IL2-PE664GluKDEL对含高亲和力IL-2受体靶细胞的杀伤效应是借助于IL-2与其受体的特异性结合和PE的杀伤活性介导的,而且同一靶细胞对这些融合蛋白的敏感性有较大的差异,对人外周血PHA体外活化的淋巴母细胞的杀伤活性,IL2-pE664GluKDEL要比IL2-PE40REDLK强约40倍,还发现若将IL2-PE融合蛋白羧基末端的REDLK氨基酸突变为KDEL可增强其杀伤细胞的活性,对ConA活化的小鼠脾母细胞的杀伤活性,IL2-PE40KDEL要比IL2-pE40REDLK强8倍。
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关键词
IL-2
绿脓杆菌外毒素
融合蛋白
细胞毒活性
原文传递
题名
腺病毒介导的肿瘤血管靶向的体外自杀基因治疗研究
被引量:
5
1
作者
徐舲飞
许德华
戈凯
郑仲承
孙兰英
刘新垣
机构
中国科学院上海生物化学研究所
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
1998年第3期171-174,共4页
文摘
本工作在血管内皮细胞中分别建立了HSV-tk/GCV和EC-cd/5-FC自杀基因系统,用于抑制实体肿瘤中血管生成的研究.构建含自杀基因的重组腺病毒AdCMVtk和AdCMVcd,滴度均1×10^(12)pfu/ml.病毒感染小鼠血管内皮细胞lGll(MOI=100),并鉴定自杀基因的表达,测定原药对它们的杀伤.生长抑制试验表明,GCV对lGll/Ad-tk细胞杀伤的IG_(50)为0.2μmol/ L,5-FC对lGll/Ad-cd细胞杀伤的IC_(50)为20μmol/L.电镜下显示被原药杀伤的血管内皮细胞有明显的细胞凋亡现象.同时混合细胞实验证明两系统均存在明显的旁杀伤效应.从而在体外水平证明了HSV-tk/GCV和EC-cd/5-FC自杀基因系统杀伤增生血管内皮细胞的有效性.
关键词
血管内皮细胞
腺病毒
载体
自杀基因
肿瘤
Keywords
vascular endothelial cell
adenoviral vector
HSV-tk/GCV system
EC-cd/5-FC system
suicide gene
分类号
R730.51 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素融合基因的克隆及高效表达
被引量:
3
2
作者
高基民
黄洪莲
王小宁
徐舲飞
郑仲承
刘新垣
机构
第一军医大学免疫教研室
中国科学院上海生物化学研究所
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
1996年第2期129-133,共5页
基金
"863"
国家自然科学基金
+1 种基金
全国青年科学基金
广东省青年科学基金
文摘
利用聚合酶链式反应和寡核苷酸介导的定向诱变技术构建了白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素IL2-PE40、IL2-PE40KDEL、IL2-PE66^(4Glu)和IL2-PE66^(4Glu)KDEL融合基因的原核表达重组质粒,并实现了高效表达,表达产物占菌体总可溶蛋白的20%~30%。此外,由于这一表达质粒在IL-2cDNA与PE基因连接处引入了唯一的SmaⅠ位点,其5'、3'端分别含有唯一的EcoRⅠ、PstⅠ位点,因此可方便地用其它基因替换IL-2或PE基因而获得相应融合蛋白的表达质粒。
关键词
白细胞介素-2
绿脓杆菌外毒素
融合蛋白
制备
Keywords
Interleukin 2, pseudomonas exotoxin, fusion protein, gene expression, cyto-toxicity
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
下载PDF
职称材料
题名
CD自杀基因系统对胶质瘤细胞作用的实验研究
被引量:
3
3
作者
徐舲飞
戈凯
郑仲承
孙兰英
刘新垣
机构
中国科学院上海生物化学研究所
出处
《实验生物学报》
CSCD
1996年第4期385-393,共9页
基金
国家"863"资助项目
文摘
将含大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(EC-CD)基因的重组逆转录病毒感染大鼠神经胶质瘤细胞C6,获得稳定表达CD的克隆细胞C6/CD。CD可以将无毒性的原药5-氟胞嘧啶(5-FC)转化成高度细胞毒性物质5-氟尿嘧啶(5-FU)。生长抑制试验表明C6/CD细胞对5-FC高度敏感,IC_(50)为3μmol/L;5-FC对C6细胞基本无毒性,IC_(50)近6000μmol/L;而C6/CD和C 6细胞均对低浓度5-FU敏感,IC_(50)小于1μmol/L。混合细胞试验表明C6/CD细胞在5-FC存在下对C6细胞有旁杀伤效应。本工作在细胞水平建立了一个治疗神经胶质瘤的自杀基因系统,过去无人报道过。
关键词
神经胶质瘤
胞嘧啶脱氨酶
自杀基因
基因治疗
Keywords
EC-CD gene. 5-FC. Glioma. Bystander effect. Gene therapy.
分类号
R730.264 [医药卫生—肿瘤]
R730.59 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
IL-2-绿脓杆菌外毒素融合蛋白增强杀伤细胞活性
被引量:
1
4
作者
高基民
徐舲飞
郑仲承
林来兴妹
王小宁
刘新垣
机构
第一军医大学免疫学教研室
中国科学院上海生物化学研究所
出处
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1996年第1期37-40,共4页
基金
本课题受"863"
国家自然科学基金
+1 种基金
全军青年科学基金
广东省青年科学基金资助
文摘
实验证实了白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素融合蛋白IL2-PE40REDLK、IL2-PE40KDEL、IL2-PE664GluREDLK、IL2-PE664GluKDEL对含高亲和力IL-2受体靶细胞的杀伤效应是借助于IL-2与其受体的特异性结合和PE的杀伤活性介导的,而且同一靶细胞对这些融合蛋白的敏感性有较大的差异,对人外周血PHA体外活化的淋巴母细胞的杀伤活性,IL2-pE664GluKDEL要比IL2-PE40REDLK强约40倍,还发现若将IL2-PE融合蛋白羧基末端的REDLK氨基酸突变为KDEL可增强其杀伤细胞的活性,对ConA活化的小鼠脾母细胞的杀伤活性,IL2-PE40KDEL要比IL2-pE40REDLK强8倍。
关键词
IL-2
绿脓杆菌外毒素
融合蛋白
细胞毒活性
Keywords
Interleukin-2
Pseudomonas exotoxin
Fusion protein
Cytotoxicity Sitedirected mutagenesis
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
腺病毒介导的肿瘤血管靶向的体外自杀基因治疗研究
徐舲飞
许德华
戈凯
郑仲承
孙兰英
刘新垣
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
1998
5
下载PDF
职称材料
2
白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素融合基因的克隆及高效表达
高基民
黄洪莲
王小宁
徐舲飞
郑仲承
刘新垣
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
1996
3
下载PDF
职称材料
3
CD自杀基因系统对胶质瘤细胞作用的实验研究
徐舲飞
戈凯
郑仲承
孙兰英
刘新垣
《实验生物学报》
CSCD
1996
3
下载PDF
职称材料
4
IL-2-绿脓杆菌外毒素融合蛋白增强杀伤细胞活性
高基民
徐舲飞
郑仲承
林来兴妹
王小宁
刘新垣
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1996
1
原文传递
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