前沿研究在药剂学教学中的作用

根据药剂学课程的特点,结合本校药学专业的实际情况,作者对该课程的教学内容以及教学方法进行优化与尝试。在教学实践中,作者紧跟学科前沿内容,将自身相关科研前沿成果、相关文献前沿研究报道渗透课堂教学,优化教学内容,结合启发式教学、案例教学、双语教学等多种教学方法,激发学生的学习兴趣和学习动力,培养学生创新思维,促进其自主学习,取得了良好的教学效果。

案例教学巩固《生物药剂学与药物动力学》在线教学效果探讨

为应对突如其来的新型冠状病毒肺炎疫情,教师通过在线教学、交互讨论等形式,积极探索有效的线上教学方式,为居家自主学习的学生提供高效的学习体验。该文以抗新型冠状病毒药物为案例,面对疫情期间的特殊性,基于以往的“线上线下融合”的互动式讨论课堂,提供给大家“完全线上”的混合式教学案例,巩固《生物药剂学与药物动力学》在线教学,以获得实时高效的教学效果。

c(RGDyk)环肽修饰的脂质体包载量子点荧光成像脑胶质瘤引导手术精准切除效果评价

目的:构建c(RGDyk)环肽修饰的脂质体包载量子点,用于脑胶质瘤的精准成像,实现术中荧光成像引导的肿瘤精准切除。方法:以氢化大豆磷脂,二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-氨基和胆固醇为材料,经逆向蒸发法,制备包载ZnCdSe/ZnS量子点(QDs)的脂质体(QDs-Lip);经EDC/NHS介导的缩合反应,将c(RGDyk)环肽与QDs-Lip表面氨基键合,制备c(RGDyk)环肽修饰的量子点脂质体[QDs-c(RGDyk)-Lip]。动态光散射(DLS)以及透射电镜(TEM)技术对QDs-c(RGDyk)-Lip进行了粒径与形态表征。同时,荧光光谱和DLS考察QDs-c(RGDyk)-Lip在生理相关介质中的荧光稳定性与粒径稳定性。体外MTT和细胞摄取实验评价QDs-c(RGDyk)-Lip对PC12和C6的细胞毒性及其对脑胶质瘤细胞的靶向性。原位脑胶质大鼠经尾静脉注射QDs-c(RGDyk)-Lip后,对脑胶质瘤激光照射,进行荧光成像并实施手术切除,HE染色确证手术切除精准度。结果:DLS和TEM表明QDs有效包裹在脂质体内。DLS显示游离QDs粒径大小约为35 nm,而QDs-c(RGDyk)-Lip粒径增大至175 nm,显示为较窄分布特征(PDI=0.12);TEM可见QDs-c(RGDyk)-Lip呈囊泡状,其中心可见数个微小QDs聚集。QDs-c(RGDyk)-Lip在激光照射下发射紫色荧光,最大发射波长610 nm。而且,QDsc(RGDyk)-Lip在生理介质中展现出较好的荧光稳定性和粒径稳定性。体外细胞毒性实验表明QDs-c(RGDyk)-Lip仅在高浓度对PC12或C6细胞具有微弱毒性。C6细胞能特异性摄取QDs-c(RGDyk)-Lip,进而发射强荧光。而且预先用游离RGDyk孵育封闭靶位,C6细胞对QDs-c(RGDyk)-Lip摄取被明显抑制,表明QDs-c(RGDyk)-Lip对脑胶质瘤特异靶向性。动物实验表明QDs-c(RGDyk)-Lip静脉注射后能高效靶向原位荷瘤大鼠脑胶质瘤,使其发射强荧光引导手术精准切除。结论:RGDyk环肽修饰的脂质体结合量子点构建QDs-c(RGDyk)-Lip,可以作为一种安全、稳定的荧光探针,能够特异靶向脑胶质瘤组织,引导手术精准切除。

包载姜黄素纳米胶束的制备与体外抗肿瘤评价

目的:构建载姜黄素纳米胶束,体外评价其对C6脑胶质瘤细胞的生长抑制作用。方法:合成新型十一烯酸-接枝-ε-多聚赖氨酸(ε-PLL-UNA)聚合物,并对其结构进行表征,采用芘荧光探针法对其临界胶束浓度进行测定;以ε-PLL-UNA为材料,采用透析法制备载姜黄素纳米胶束,以动态光散射和透射电镜对其粒径、形态进行表征,以动态透析法测定药物释放行为,以激光共聚焦显微镜观察体外细胞摄取性,以肿瘤球模型考察其体外抗肿瘤作用。结果:~1H-NMR和FT-IR结果表明ε-PLL-UNA聚合物成功合成,其临界胶束浓度为0.19g/L,能自发组装成胶束;载姜黄素纳米胶束载药量能达到12.22%±2.13%、包封率则高达85.12%±3.64%,平均粒径为(60.6±2.1)nm、Zeta电位为(28.2±5.6)m V,具有球形微观结构;该纳米胶束48h释放84%的姜黄素,体外快速被C6细胞摄取;与姜黄素溶液相比,该纳米胶束能明显抑制胶质瘤细胞球的生长。结论:ε-PLL-UNA聚合物胶束对姜黄素具有较高的载药量,粒径小于100nm、分布均匀,体外缓慢释放药物,提高了C6细胞对姜黄素的摄取,而且对C6细胞球具有有效的杀伤作用。

c(RGDyk)环肽修饰纳米胶束逆转脑胶质瘤对多西他赛的耐药性

目的:构建c(RGDyk)环肽修饰的纳米胶束包载多西他赛(DTX),体外评价其逆转人脑胶质瘤U87细胞对DTX耐药性。方法:以泊洛沙姆-188(PL-188)为原材料,经琥珀酸酐羧基化后,键合c(RGDyk)环肽,合成c(RGDyk)-PL-188靶向材料并进行结构确证;c(RGDyk)-PL-188为包裹材料,利用纳米共沉淀法制备载DTX的纳米胶束[c(RGDyk)DTX-NPs]并进行处方优化筛选;透射电镜(TEM)、差示扫描量热法(DSC)以及动态透析法对c(RGDyk)DTX-NPs形态、药物晶型和体外药物释放行为进行详细表征;体外CCK8细胞存活率检测、细胞摄取以及肿瘤球生长抑制,评价c(RGDyk)DTX-NPs对DTX耐药的人脑胶质瘤U87细胞逆转效果。结果:1H-NMR和FT-IR表明成功合成c(RGDyk)-PL-188材料,该材料能自发组装成粒径为115.6 nm的胶束;c(RGDyk)-PL-188/DTX质量比10:1时,该胶束对DTX载药量可达7.88%±0.02%,包封率高达85.50%±2.78%,粒径稍增大,为(159.2±0.2)nm,Zeta电位为(-19.2±0.4)mV,TEM显示具有球形微观结构;体外释放表明c(RGDyk)DTX-NPs展现缓释释放行为,48 h内DTX累积释放仅为78%;细胞摄取表明c(RGDyk)-NPs能特异靶向耐药的人脑胶质瘤U87细胞,显著提高荧光探针ICG在细胞内荧光分布,其靶向性被游离c(RGDyk)竞争抑制;与DTX溶液和DTX-NPs相比,c(RGDyk)DTX-NPs对DTX耐药的人脑胶质瘤U87细胞具有更强的细胞毒性;体外U87人脑胶质瘤细胞球模型研究表明c(RGDyk)DTX-NPs能更有效渗透至肿瘤球深部,抑制肿瘤球生长。结论:c(RGDyk)环肽修饰纳米胶束能有效装载DTX,具有较高的载药量和包封率,能特异性靶向人脑胶质瘤U87细胞,逆转其对DTX的耐药性。

共载双硫仑与阿霉素纳米胶束的制备和体外评价

目的:制备共载双硫仑(DSF)与阿霉素(DOX)纳米胶束,评价其体外理化性质以及逆转乳腺癌细胞对DOX耐药的效果。方法:以聚乙二醇单甲醚-聚乳酸共聚羟基乙酸-聚谷氨酸(mPEG-PLGA-PGA)为材料,以透析法制备双载药纳米胶束(DSFDOX-NPs),以动态光散射激光粒度测定仪(DLS)、透射电镜(TEM)对其理化性质进行表征,HPLC测量载药量和包封率,动态透析法测定药物体外释放行为,MTT以及激光共聚焦显微镜评价其逆转人乳腺癌MCF-7/ADR细胞对DOX耐药的效果。结果:DLS测定DSFDOX-NPs平均粒径为(107.5±0.2)nm,Zeta电位为(-13.7±0.1)mV;TEM显示为球形颗粒,粒径大小为95 nm;HPLC测定DSF载药量为1.91%,包封率为80.30%,DOX载药量为2.28%,包封率为96.2%;体外释放表明DSFDOX-NPs对2种药物均有明显的缓释作用,呈现DSF先快释放、DOX后慢释放的"级联式"释放模式;体外细胞实验表明DSFDOX-NPs能显著地增加DOX在耐药细胞中的浓度,相比DOX溶液剂具有更高的细胞毒性。结论:DSFDOX-NPs有效地装载了2种药物,其粒径小于100 nm,分布均匀,体外缓慢释放药物,并且逆转了DOX耐药肿瘤细胞的耐药效果。

康复新液治疗溃疡性结肠炎小鼠的效果

目的:建立溃疡性结肠炎(UC)动物模型并评价康复新液(KFX)对UC的修复效果。方法:建立硫酸葡聚糖(DSS)诱导的UC小鼠模型,分为0.9%氯化钠溶液组(Saline组)、地塞米松灌肠液组(DXM组)和KFX组;评价UC小鼠治疗后症状缓解、脾肿胀、结肠长度、结肠组织髓过氧化物酶(MPO)水平,对比评价康复新液的治疗效果。对治疗后结肠组织进行HE染色、免疫组织化学染色、免疫荧光染色,比较3组小鼠结肠形态的修复效果。结果:与Saline组比,DXM组和KFX组UC小鼠腹泻和便血症状、脾肿胀明显缓解,结肠肿胀明显减轻,结肠长度增长,结肠组织MPO水平明显降低(P<0.05)。HE染色表明,与DXM组比,KFX组治疗后小鼠结肠黏膜上皮、隐窝、肌层黏膜和黏膜下层更为完整、各层分界分明,未见明显的肿胀与炎症细胞浸润,表明受损结肠形态有效修复。免疫组织化学染色表明,与DXM组比,KFX组炎症因子分泌明显减少(P<0.05),表明结肠组织有效修复。免疫荧光染色表明,与DXM组比,KFX组的紧密连接蛋白分泌明显有所增加(P<0.05),表明受损结肠组织黏膜屏障得到有效修复。结论:KFX能有效缓解UC症状并修复受损的结肠形态。