构建兔软骨脱落细胞三维支架及与干细胞相容性评价的实验研究

目的制备不同浓度的兔软骨脱落细胞支架,并评估其理化性能和干细胞的相容性,为软骨修复提供实验依据。方法Percoll密度分离法培养骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),并进行流式细胞学鉴定和成骨、成软骨分化能力检测。从兔膝、股关节中切取软骨片,进行物理粉碎、反复冻融以及各种酶混合消化脱细胞。为比较并观察不同浓度脱细胞支架的理化性能差异,设计3组支架,浓度分别为100%(A组)、50%(B组)、30%(C组),每组3只。将第3代PKH26示踪的BMSCs接种于最适浓度支架上培养1周,观察细胞生长情况。结果流式技术检测BMSCs表面抗原,CD44、CD90呈阳性表达,CD45阴性表达;成骨诱导茜素红染色可见红色钙结节;软骨诱导阿利新蓝染色见软骨结节呈蓝色;3组支架经苏木素-伊红(HE)、甲苯胺蓝染色后未观察到明显细胞形态。样本脱细胞后的DNA浓度与未脱支架的指标均值差异具有显著性(P<0.05)。糖胺聚糖含量较正常值稍偏低。3组支架两两比较孔径、吸水膨胀率、孔隙率、支架断裂强度、杨氏模量差异具有显著性(P<0.05);干细胞与支架共培养后细胞附着良好。结论Percoll密度分离法可获取高纯度的兔BMSCs;应用混合脱细胞方法脱细胞较彻底。B组支架可作为构建组织工程软骨修复的最适方案。体外培养的BMSCs在B组支架生长良好。

Orem自理护理模式在进行经颅磁刺激治疗的双相情感障碍患者中的应用效果研究

目的:分析Orem自理护理模式在进行经颅磁刺激治疗的双相情感障碍患者中的应用效果。方法:选取贵航集团三〇二医院2023年1月至12月收治的114例双相情感障碍患者作为观察对象,通过随机数字表法分组,使每组各含有57例患者。其中对照组采用常规护理模式进行干预,研究组采用Orem自理护理模式进行干预。对比两组情绪状态、社会功能的变化情况。结果:干预前,两组的各项情绪状态评分对比,差异无统计学意义(P>0.05)。干预后,研究组的汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分[(7.16±1.25)分]、杨氏躁狂量表(YMRS)评分[(2.41±0.70)分]、社会功能缺陷筛选量表(SDSS)评分[(5.40±0.43)分]均低于对照组的HAMD评分[(10.37±1.49)分]、YMRS评分[(4.62±1.15)分]及SDSS评分[(8.62±1.20)分](P<0.05)。结论:对进行经颅磁刺激治疗的双相情感障碍患者使用Orem自理护理模式进行护理干预,能使患者的情绪状态更加稳定,社会功能得到显著改善,对其身体的恢复有促进效果。

骨髓骨片法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞和PKH26标记

目的 旨在建立一种高效的方法分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)的方法,并应用PKH26进行体外标记,探讨PKH26标记对BMSCs生物学特性的影响,以及体外示踪情况。方法 将大鼠5 d乳鼠双后肢骨进行分离,去除周围的肌肉和筋膜,并将其剪成小块进行培养,利用换液、传代提纯BMSCs,应用流式细胞仪测定第3代细胞表面抗原。在培养条件相同的情况下,取第3代BMSCs应用PKH26进行标记,标记组与未标记组在荧光显微镜下对细胞形态学、增殖状态进行观察,比较标记组与未标记组成骨成脂诱导特点及鉴定。结果 骨髓骨片法分离乳鼠双后肢骨,培养BMSCs呈细长梭形,形态均一,短时间内可迅速获得大量BMSCs;经流式细胞仪鉴定结果表明,表达CD29为(91.18±1.29)%,表达CD90为(95.04±0.11)%,表达CD45为(1.74±0.36)%;PHK26标记对BMSCs细胞形态,增殖无明显影响(P>0.05),对成骨成脂诱导无影响。结论 采用大鼠5 d乳鼠骨髓骨片法能够快速培养出大量高纯度的BMSCs,该细胞可作为种子细胞用于骨组织工程;PKH26可对体外大鼠BMSCs进行标记。