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重组日本血吸虫26kDaGST抗原免疫家兔后抗体动态观察 被引量:6
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作者 徐裕信 宋光承 刘述先 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期162-164,共3页
目的: 探讨重组日本血吸虫26 k Da G S T 抗原免疫家兔后抗体水平动态变化。方法: 家兔随机分为免疫组与佐剂对照组,免疫组用纯化重组日本血吸虫 26 k Da G S T 抗原加福氏佐剂免疫;佐剂对照组用0.85% 盐水... 目的: 探讨重组日本血吸虫26 k Da G S T 抗原免疫家兔后抗体水平动态变化。方法: 家兔随机分为免疫组与佐剂对照组,免疫组用纯化重组日本血吸虫 26 k Da G S T 抗原加福氏佐剂免疫;佐剂对照组用0.85% 盐水加福氏佐剂免疫。免疫后,每兔逐周取耳静脉血,采用酶联免疫吸附试验( E L I S A) 检测血清中特异性抗体水平。结果: 免疫组家兔从免疫后第4 w k 起血清中特异性抗 G S T 抗体升高,且维持在较高的水平达65 w k。结论: 重组日本血吸虫 26 k Da G S T 抗原免疫家兔后,特异性抗 G S T 抗体水平较对照组明显升高,且至少能维持 1 年。 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组抗原 GST EIISA 抗体 免疫接种
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东方田鼠天然抗体相关的日本血吸虫抗原基因筛选和克隆 被引量:39
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作者 阎玉涛 刘述先 +2 位作者 宋光承 徐裕信 何永康 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期153-156,共4页
目的 研究东方田鼠对日本血吸虫感染天然抵抗力的蛋白分子基因。 方法 用未感染日本血吸虫的东方田鼠血清免疫筛选日本血吸虫成虫 c DNA文库 ,将阳性重组子克隆及测序。利用软件和互联网对核酸序列进行分析 ,确定目的基因。 结果 ... 目的 研究东方田鼠对日本血吸虫感染天然抵抗力的蛋白分子基因。 方法 用未感染日本血吸虫的东方田鼠血清免疫筛选日本血吸虫成虫 c DNA文库 ,将阳性重组子克隆及测序。利用软件和互联网对核酸序列进行分析 ,确定目的基因。 结果 筛选出编码东方田鼠天然抵抗力相关的 7种蛋白分子基因 :三磷酸甘油醛脱氢酶、丝氨酸蛋白酶抑制剂、热休克蛋白、 2 2 .6 k Da膜相关抗原、副肌球蛋白、细胞色素 C及组织蛋白酶 B。 结论 东方田鼠对日本血吸虫的天然抵抗力可能有许多蛋白分子参与。 展开更多
关键词 日本血吸虫 东方田鼠 CDNA文库 筛选 克隆 血吸虫病 治疗 疫苗
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日本血吸虫97kDa DNA疫苗与致弱尾蚴疫苗诱导免疫应答特征的比较研究 被引量:21
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作者 陈家旭 刘述先 +2 位作者 曹建平 宋光承 徐裕信 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期257-261,共5页
目的 对比观察日本血吸虫大陆株副肌球蛋白基因疫苗 (Sjc97DNA)与紫外线致弱尾蚴 (UVC)疫苗免疫C5 7BL 6小鼠诱导的抗感染保护力及免疫应答特征。 方法 以Sjc97DNA核酸疫苗经后腿胫前肌免疫C5 7BL 6小鼠共 2次 ,每次间隔 3wk ,末次... 目的 对比观察日本血吸虫大陆株副肌球蛋白基因疫苗 (Sjc97DNA)与紫外线致弱尾蚴 (UVC)疫苗免疫C5 7BL 6小鼠诱导的抗感染保护力及免疫应答特征。 方法 以Sjc97DNA核酸疫苗经后腿胫前肌免疫C5 7BL 6小鼠共 2次 ,每次间隔 3wk ,末次免疫后 3wk攻击感染日本血吸虫尾蚴 ;UVC疫苗接种同种小鼠后 5wk攻击感染上述等量尾蚴。均于攻击感染后 7wk计数虫负荷及肝卵负荷。并设空质粒对照及感染对照组。用ELISA分析免疫鼠攻击感染前后血清特异性IgG、IgA及亚型抗体水平 ,以及脾淋巴细胞体外诱生的细胞因子水平。  结果 Sjc97DNA疫苗及UVC疫苗免疫小鼠均诱生出以Th1型免疫应答为主的IL 2、IFN γ及特异性抗AWA、SEAIgG2a、IgG2b亚型及IgA抗体 ,UVC疫苗组小鼠各细胞因子及抗体水平均显著高于Sjc97DNA疫苗组 ,但两疫苗组均未测及IL 4。攻击感染后 ,Sjc97DNA疫苗组的减虫率 3 6.3 %、减卵率 42 .4% ,明显低于UVC疫苗组的 66.9%和 75 .6%。攻击感染后 7wk ,两疫苗组小鼠Th2型免疫应答虽有所增强 ,但仍以Th1型免疫应答占优势 ;而空质粒对照组和感染对照组小鼠则以Th2型免疫应答为主。 结论 核酸疫苗与紫外线致弱尾蚴疫苗均能诱导产生抗感染免疫保护力 ,致弱尾蚴疫苗的免疫保护力高于Sjc97DNA。两疫苗诱导的抗感染? 展开更多
关键词 日本血吸虫 副肌球蛋白 核酸疫苗 紫外线致弱尾蚴 免疫效应 血吸虫病
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重组日本血吸虫26kDa GST抗原诱导水牛产生抗体及减少排卵的初步观察 被引量:12
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作者 何永康 刘述先 +6 位作者 喻鑫玲 宋光承 徐裕信 曹建平 杨瑞青 侯循亚 张新跃 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期133-135,共3页
目的 观察rSjc2 6GST抗原诱导水牛产生特异性抗体水平以及排卵数量的减少。  方法  2 0头水牛随机分为两组 ,每组 1 0头。试验组免疫rSjc2 6GST抗原 ,对照组注射佐剂 ,攻击感染日本血吸虫尾蚴后 ,定期检测抗rSjc2 6GST抗体、粪检虫... 目的 观察rSjc2 6GST抗原诱导水牛产生特异性抗体水平以及排卵数量的减少。  方法  2 0头水牛随机分为两组 ,每组 1 0头。试验组免疫rSjc2 6GST抗原 ,对照组注射佐剂 ,攻击感染日本血吸虫尾蚴后 ,定期检测抗rSjc2 6GST抗体、粪检虫卵和毛蚴。  结果 水牛免疫rSjc2 6GST抗原后 1个月 ,产生抗rSjc2 6GST抗体 ,至 1 2个月一直维持较高水平。试验组水牛感染后 50~ 90d,粪便EPG和MPG几何均值明显低于对照组 ,但在 1 0 0d以后两组的EPG和MPG均逐渐降低 ,至 330d均为 0。结论 水牛免疫rSjc2 6GST抗原后能产生特异性抗体 ,维持较高水平至 1 2个月 ,在感染后 3个月内有显著的减卵效果 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 rSjc26 GST抗原 特异性抗体 免疫保护力 排卵量 日本血吸虫重组抗原
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紫外线致弱童虫免疫家兔血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 被引量:8
5
作者 李小红 刘述先 +3 位作者 宋光承 徐裕信 曹建平 陈家旭 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期80-82,共3页
目的 用致弱疫苗免疫血清、感染血清筛选文库获取新的日本血吸虫特异性未知抗原基因。 方法 用紫外线致弱童虫免疫兔血清、感染血清免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 ,对阳性重组子进行克隆、测序 ,利用软件对核酸序列进行分析 ,确定... 目的 用致弱疫苗免疫血清、感染血清筛选文库获取新的日本血吸虫特异性未知抗原基因。 方法 用紫外线致弱童虫免疫兔血清、感染血清免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 ,对阳性重组子进行克隆、测序 ,利用软件对核酸序列进行分析 ,确定目的基因。 结果 筛选出 6种蛋白分子基因 :3 磷酸甘油醛脱氢酶 (GAPDH) ,丝氨酸蛋白酶抑制剂 (serpin) ,线粒体编码蛋白 ,肌球蛋白 (myosin)部分重链基因以及两个未知新基因。 展开更多
关键词 紫外线 日本血吸虫 CDNA文库 致弱疫苗 核酸序列
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日本血吸虫24-26kDa抗原和重组Sj26抗原的抗原性和免疫原性比较研究 被引量:20
6
作者 刘述先 宋光承 +2 位作者 丁丽韻 徐裕信 吴公责 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期190-193,共4页
本文报告从日本血吸虫大陆株成虫抽提的24—26kDa抗原与源于日本血吸虫菲律宾株的重组Sj26抗原之间在抗原性和免疫原性上所进行的一系列比较研究。ELISA、IFA和Westernblotting等方法观察结果均表明,24—26kDa和rSj26抗原免疫后所诱导... 本文报告从日本血吸虫大陆株成虫抽提的24—26kDa抗原与源于日本血吸虫菲律宾株的重组Sj26抗原之间在抗原性和免疫原性上所进行的一系列比较研究。ELISA、IFA和Westernblotting等方法观察结果均表明,24—26kDa和rSj26抗原免疫后所诱导的特异性抗体与其对应的抗原之间具有明显的抗原交叉反应,而与其它血吸虫抗原如可溶性虫卵抗原也有交叉反应。若以两种抗原加福氏佐剂分别免疫小鼠,以日本血吸虫大陆株尾蚴攻击感染,减虫率相似(26~32%),表明两种抗原存在一定程度的交叉免疫保护性。这些研究结果为开发rSj26抗原,或是根据已知Sj26 cDNA核苷酸序列制备DNA探针,从已构建的日本血吸虫(大陆株)cDNA库筛选相关目的基因,加速血吸虫疫苗的研制起着重要作用。 展开更多
关键词 抗原 血吸虫 抗原性 免疫原性
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日本血吸虫副肌球蛋白全基因核酸疫苗在小鼠诱生的保护性免疫力 被引量:9
7
作者 周生华 刘述先 +2 位作者 宋光承 徐裕信 孙文宇 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期321-324,共4页
目的: 研究日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗免疫C57 BL/6 及BALB/c 小鼠诱生的保护性免疫力。方法: 将构建的日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗 (pCMV-SjC97) 经后腿胫前肌免疫C57B... 目的: 研究日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗免疫C57 BL/6 及BALB/c 小鼠诱生的保护性免疫力。方法: 将构建的日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗 (pCMV-SjC97) 经后腿胫前肌免疫C57BL/6及BALB/c小鼠, 共免疫3 次, 每次间隔3 w k。末次免疫后3 w k 以血吸虫尾蚴攻击感染, 6 wk 后计数成虫负荷及肝、脾、肠组织虫卵数。设不含SjC97 编码基因的空载体质粒免疫组为对照组。结果: pCMV-SjC97 免疫C57 BL/6 小鼠主要诱生IgG2a 和IgG2b 亚类, 而免疫BALB/c小鼠除诱生IgG2a 和IgG2b 亚类外, 还诱生IgG1。pCMV-SjC97 免疫C57BL/6 小鼠诱生较明显的减虫率 (35.5% ~41.1% ) 和减卵率 (肝、脾及肠组织减卵率分别为44.5% ~59.6% 、56.7% ~82.4% 及57.9% ), 而对BALB/c小鼠未诱生保护性。结论: pCMV-SjC97 核酸疫苗能对C57BL/6 小鼠诱生较明显保护性免疫力, 而对BALB/c 展开更多
关键词 日本血吸虫 副肌球蛋白 核酸疫苗 保护性免疫力
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谷胱甘肽-S-转移酶多克隆抗体免疫金测定法检测日本血吸虫循环抗原的研究 被引量:8
8
作者 汤益 张素娥 +5 位作者 刘述先 施晓华 宋光承 徐裕信 蒋健敏 屠乐鸣 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2000年第2期97-99,共3页
目的探讨谷胱甘肽-S-转移酶(rSj26GST)多克隆抗体诊断日本血吸虫病的应用价值。方法以抗rSj26GST多克隆抗体力捕获并检测抗体,建立双抗体夹心斑点免疫金测定技术,用于检测日本血吸虫循环抗原,并以斑点免疫金测... 目的探讨谷胱甘肽-S-转移酶(rSj26GST)多克隆抗体诊断日本血吸虫病的应用价值。方法以抗rSj26GST多克隆抗体力捕获并检测抗体,建立双抗体夹心斑点免疫金测定技术,用于检测日本血吸虫循环抗原,并以斑点免疫金测定法和ELISA检测抗体作对照。结果3种方法检测急性血吸虫病的敏感性均为100%;对慢性血吸虫病的敏感性分别为76.4%、98.1%和96.2%;特异性分别为95.0%、98.0%和96.0%。结论rSj26GST抗原对日本血吸虫病具有诊断价值,可望有较好的应用前景。 展开更多
关键词 日本血吸虫病 诊断 多克隆抗体 循环抗原
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日本血吸虫副肌球蛋白全基因克隆、测序及体内表达 被引量:9
9
作者 周生华 刘述先 +1 位作者 宋光承 徐裕信 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期196-199,共4页
目的: 将日本血吸虫大陆株副肌球蛋白( Sjc97) 编码区全基因克隆及测序, 并研究 Sjc97 全基因核酸疫苗在小鼠体内的表达。方法: 抽提日本血吸虫成虫总 R N A, 逆转录聚合酶链反应 ( R T P C R) 扩增编码... 目的: 将日本血吸虫大陆株副肌球蛋白( Sjc97) 编码区全基因克隆及测序, 并研究 Sjc97 全基因核酸疫苗在小鼠体内的表达。方法: 抽提日本血吸虫成虫总 R N A, 逆转录聚合酶链反应 ( R T P C R) 扩增编码 Sjc97的全基因c D N A, 双脱氧链末端终止法测 D N A 序列。构建含 Sjc97 全基因的质粒表达载体 (p C M V Sjc97) , 并用免疫荧光染色法研究p C M V Sjc97 在小鼠体内的表达特性。结果与结论: 用 R T P C R 扩增获得了 Sjc97 的编码区全基因c D N A, 并测定了该基因编码区的全序列。与日本血吸虫菲律宾株、日本株及曼氏血吸虫副肌球蛋白编码区全基因比较, 核苷酸序列同源性分别为: 994 % 、992 % 和910 % ; 推导的氨基酸序列同源性分别为:997 % 、998 % 和960 % 。p C M V Sjc97 核酸疫苗能在注射的小鼠局部肌肉组织表达 Sjc97 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 副肌球蛋白 基因克隆 核酸疫苗
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重组日本血吸虫26 kDa GST抗原免疫水牛后抗体动态及免疫保护性效果 被引量:5
10
作者 何永康 宋光承 +5 位作者 刘述先 罗新松 张新跃 徐裕信 喻鑫玲 杨瑞青 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期265-267,共3页
目的 观察重组日本血吸虫 2 6kDaGST抗原 (reSjc2 6GST)免疫役用放养水牛 (简称水牛 )后抗体动态及免疫保护性的效果。 方法 试验组 96头水牛 ,用reSjc2 6GST免疫 3次 ,每次间隔 2wk ,3次剂量分别为 0 2、 0 2和 0 1mg。对照组 9... 目的 观察重组日本血吸虫 2 6kDaGST抗原 (reSjc2 6GST)免疫役用放养水牛 (简称水牛 )后抗体动态及免疫保护性的效果。 方法 试验组 96头水牛 ,用reSjc2 6GST免疫 3次 ,每次间隔 2wk ,3次剂量分别为 0 2、 0 2和 0 1mg。对照组 90头水牛不作免疫 ;观察 2组水牛免疫前及免疫后 2、 5、 9、 12、 15和 2 0个月的抗体水平及血吸虫感染率的变化。 结果 试验组机体产生特异性抗reSjc2 6GST抗体 ,其抗体水平呈明显的梯形升高趋势。试验组免疫后 2 0个月血吸虫感染率比免疫前下降了 62 2 % ,比同期对照组低 67 7%。 结论 用reSjc2 6GST免疫水牛能产生特异性抗体 ,在免疫后 2 0个月内维持较高水平 ,有一定的抗血吸虫自然感染的保护力。 展开更多
关键词 血吸虫 重组GST抗原 保护性 抗体水平 日本血吸虫
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日本血吸虫三磷酸甘油醛脱氢酶核酸疫苗小鼠体内的免疫应答特征 被引量:10
11
作者 闫玉涛 李小红 +2 位作者 刘述先 宋光承 徐裕信 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期266-269,273,共5页
目的研究日本血吸虫大陆株三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因核酸疫苗免疫C57BL/6小鼠诱生的免疫应答特征和保护性。方法将用免疫筛库得到的日本血吸虫大陆株GAPDH编码基因以PCR扩增,扩增产物T-A克隆至载体pT-Adv而后与真核表达载体pcDNA3... 目的研究日本血吸虫大陆株三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因核酸疫苗免疫C57BL/6小鼠诱生的免疫应答特征和保护性。方法将用免疫筛库得到的日本血吸虫大陆株GAPDH编码基因以PCR扩增,扩增产物T-A克隆至载体pT-Adv而后与真核表达载体pcDNA3连接,构建成核酸疫苗(pcDNA3-SjGAPDH)。将纯化的pcDNA3-SjGAPDH经后腿胫前肌免疫C57BL/6小鼠。免疫荧光染色法研究pcDNA3-SjGAPDH在注射的局部肌肉表达特性;用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)、蛋白质印迹法(Westernblotting)、ELISA等方法分析pcDNA3-SjGAPDH所诱导的特异性免疫应答特征。结果pcDNA3-SjGAPDH免疫后24和48h即可在荧光显微镜下看到C57BL/6小鼠小腿胫前肌的局部肌肉的冰冻切片发出淡绿色荧光,表明有GAPDH蛋白的表达。pcDNA3-SjGAPDH免疫小鼠主要诱生IgG2a、IgG2b和IgG3亚类;免疫小鼠脾淋巴细胞体外经特异性抗原刺激主要诱生γ-干扰素(IFN-γ)和白介素-2(IL-2)细胞因子,未检出IL-4。另外,免疫鼠血清能够识别日本血吸虫SWAP中的天然GAPDH成分。结论pcDNA3-SjGAPDH核酸疫苗免疫C57BL/6小鼠主要诱导Th1类型细胞免疫应答。 展开更多
关键词 日本血吸虫 三磷酸甘油醛脱氢酶 核酸疫苗
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日本血吸虫重组谷胱甘肽-S-转移酶诱生的保护性免疫应答特征的研究 被引量:8
12
作者 周生华 刘述先 +1 位作者 宋光承 徐裕信 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期74-77,共4页
目的:研究日本血吸虫重组谷胱甘肽-S-转移酶(reSjc26GST)在不同品系小鼠(BALB/c小鼠及C57BL/6小鼠)诱生免疫应答的差异。方法:将reSjc26GST(弗氏佐剂)经皮下免疫BALB/c小鼠及C57... 目的:研究日本血吸虫重组谷胱甘肽-S-转移酶(reSjc26GST)在不同品系小鼠(BALB/c小鼠及C57BL/6小鼠)诱生免疫应答的差异。方法:将reSjc26GST(弗氏佐剂)经皮下免疫BALB/c小鼠及C57BL/6小鼠,收集免疫前和免疫后血清及取小鼠脾脏,分析reSjc26GST免疫小鼠诱生的特异性抗体、脾脏淋巴细胞特异性增殖能力及细胞因子种类等。结果:reSjc26GST免疫C57BL/6小鼠所诱生的抗体总IgG及IgG亚类均较明显高于免疫BALB/c小鼠。抗体IgG亚类分析显示,reSjc26GST在C57BL/6小鼠诱生较高滴度的IgG1和IgG2a及IgG2b(血清按1∶400稀释,A492nm值分别为>3.0、1.127、>3.0),而在BALB/c小鼠主要诱生较低滴度的IgG1和IgG2a及IgG2b(血清按1∶400稀释,A492nm值分别为1.189、0.39、0.625);reSjc26GST免疫能够诱导小鼠Th细胞激活。细胞因子分析显示reSjc26GST免疫C57BL/6小鼠既能诱生较高水平的IL-2及IFN-γ,又能诱生IL-5。而reSjc26GST免疫BALB/c小鼠仅? 展开更多
关键词 日本血吸虫 免疫应答 reSjc26CrST
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日本血吸虫大陆株GST抗原 被引量:4
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作者 刘述先 宋光承 +4 位作者 丁丽韵 徐裕信 蔡志红 杨文 D.McManus 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期311-312,共2页
谷胱苷肽转移酶(GST)是以谷胱苷肽为共同底物的一组具有解毒功能的同工酶。国外研究证明血吸虫的GSTs含量丰富,是研究日本血吸虫疫苗的主要侯选抗原之一。有关日本血吸虫大陆株GST抗原的研究,作者曾在日本血吸虫24—26kDa和90kDa蛋白质... 谷胱苷肽转移酶(GST)是以谷胱苷肽为共同底物的一组具有解毒功能的同工酶。国外研究证明血吸虫的GSTs含量丰富,是研究日本血吸虫疫苗的主要侯选抗原之一。有关日本血吸虫大陆株GST抗原的研究,作者曾在日本血吸虫24—26kDa和90kDa蛋白质“靶抗原”的抗原性研究,应用24—26kDa和90kDa蛋白质“靶抗原”免疫小鼠研制抗血吸虫“靶抗原”单克隆抗体,24—26kDa和90kDa蛋白质抗原用于血吸虫病诊断的可能性探讨。 展开更多
关键词 日本血吸虫 抗原 大陆株 GST
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日本血吸虫肌球蛋白部分重链基因核酸疫苗的构建与小鼠保护性研究 被引量:5
14
作者 李小红 刘述先 +3 位作者 宋光承 徐裕信 曹建平 陈家旭 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2005年第1期9-12,共4页
目的研究日本血吸虫肌球蛋白部分重链基因核酸疫苗对小鼠的保护效果。方法用致弱童虫免疫血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,获得的阳性克隆之一与曼氏血吸虫肌球蛋白重链基因同源。PCR法扩增该片断基因,产物克隆入真核表达载体pcDNA3中,... 目的研究日本血吸虫肌球蛋白部分重链基因核酸疫苗对小鼠的保护效果。方法用致弱童虫免疫血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,获得的阳性克隆之一与曼氏血吸虫肌球蛋白重链基因同源。PCR法扩增该片断基因,产物克隆入真核表达载体pcDNA3中,构建成肌球蛋白部分重链基因核酸疫苗。将50μg肌球蛋白(myosin)核酸疫苗注射C57BL/6小鼠的两侧股四头肌,免疫3次,间隔2周,末次免疫后2周经腹部皮肤攻击感染尾蚴30条/鼠,感染6周后用门静脉灌注法收集成虫,计算核酸疫苗免疫组减虫率与空质粒对照组减虫率。结果核酸疫苗免疫组获得了33.02%的减虫率,空质粒对照组获得了24.50%的减虫率,经t检验,两组差异无显著性。结论肌球蛋白部分重链基因核酸疫苗在小鼠中未能诱导出保护力。 展开更多
关键词 日本血吸虫 肌球蛋白 核酸疫苗
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日本血吸虫重组硫氧还蛋白小鼠保护性免疫研究 被引量:3
15
作者 韩海勃 曹建平 +6 位作者 刘述先 徐裕信 沈玉娟 李小红 卢潍媛 刘海鹏 汤林华 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期175-178,共4页
目的观察日本血吸虫(大陆株)硫氧还蛋白重组抗原在小鼠诱导抗血吸虫感染的免疫保护作用。方法30只雌性C57BL/6小鼠随机分为3组,reSjcTrx免疫组:reSjcTrx(15mg/鼠)和ISA720佐剂乳化后采用小鼠相背部多点皮下注射,共免疫3次,间隔2周;ISA72... 目的观察日本血吸虫(大陆株)硫氧还蛋白重组抗原在小鼠诱导抗血吸虫感染的免疫保护作用。方法30只雌性C57BL/6小鼠随机分为3组,reSjcTrx免疫组:reSjcTrx(15mg/鼠)和ISA720佐剂乳化后采用小鼠相背部多点皮下注射,共免疫3次,间隔2周;ISA720佐剂对照组:小鼠仅注射ISA720佐剂和生理盐水;感染对照组不作任何处理。于末次免疫后3周,各组小鼠经腹部皮肤感染(30±1)条日本血吸虫尾蚴,感染后6周剖杀,门静脉灌注法收集成虫,计成虫数和每克肝组织虫卵数。在免疫前、攻击感染前和小鼠剖杀前分别采血并分离血清,用ELISA检测重组抗原特异性IgG抗体。并对reSjcTrx进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Westernblotting)分析。结果ELISA检测表明,reSjcTrx免疫组小鼠产生特异性IgG抗体应答,并诱导小鼠产生对攻击感染的减虫率和肝组织减卵率分别为22.8%和29.5%,与ISA720佐剂对照组和感染对照组相比,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。SDS-PAGE和Westernblotting的结果表明,该重组抗原相对分子质量(Mr)约14000(含载体的6个氨基酸),可被日本血吸虫感染兔血清和reSjcTrx免疫小鼠血清所识别。结论reSjcTrx免疫小鼠可产生一定的抗血吸虫感染的保护作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 硫氧还蛋白 重组蛋白 免疫保护力
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日本血吸虫3-磷酸甘油醛脱氢酶的克隆 表达及结构预测 被引量:3
16
作者 王文琴 李小红 +3 位作者 刘述先 宋光承 徐裕信 曹建平 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2007年第3期170-174,共5页
目的 克隆、表达日本血吸虫(大陆株)3-磷酸甘油醛脱氢酶(SjcGAPDH)编码基因并作结构预测。方法 将编码SjeGAPDH的pBlueseript质粒用限制性内切酶XhoⅠ和SacⅠ消化后,收集目的片段,与经同样酶切的原核表达载体pET28b连接,筛选重... 目的 克隆、表达日本血吸虫(大陆株)3-磷酸甘油醛脱氢酶(SjcGAPDH)编码基因并作结构预测。方法 将编码SjeGAPDH的pBlueseript质粒用限制性内切酶XhoⅠ和SacⅠ消化后,收集目的片段,与经同样酶切的原核表达载体pET28b连接,筛选重组克隆并测序,将正确的重组质粒转化入BL21(DE3)感受态细菌,异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白。用GeneRunner软件对该蛋白的结构及抗原表位进行预测。结果 十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)观察到大小约42.7kDa的特异性蛋白条带,与预计一致。免疫印迹试验(Western blot)结果表明致弱尾蚴免疫兔血清可识别该重组蛋白。结构预测表明SjcGAPDH的第50~70、102~122、135~148、165~175、187-205、254-272、278-285位氨基酸区域可能为蛋白质的抗原优势区域。结论 SjcGAPDH编码基因克隆、表达获得成功,为开展该分子功能和免疫原性研究奠定了基础,对GAPDH的结构和性质预测为探索该蛋白的抗原优势表位提供了理论依据。 展开更多
关键词 日本血吸虫 3-磷酸甘油醛脱氢酶 克隆 表达
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日本血吸虫重组Sj26抗原抽提、纯化及初步应用 被引量:10
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作者 刘述先 丁丽韵 +2 位作者 宋光承 林之晨 徐裕信 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 1991年第3期201-204,共4页
从 Mitchell 实验室引进与我们报告的24—26kD 抗原类似的重组 Sj26抗原基因的 E coil,从中抽提并纯化出 rSj26抗原。重组 Sj26抗原初步应用的结果表明:(1)rSj26抗原 ELISA 可以检测日本血吸虫大陆株感染鼠血清中特异性抗体,最高滴度1:3... 从 Mitchell 实验室引进与我们报告的24—26kD 抗原类似的重组 Sj26抗原基因的 E coil,从中抽提并纯化出 rSj26抗原。重组 Sj26抗原初步应用的结果表明:(1)rSj26抗原 ELISA 可以检测日本血吸虫大陆株感染鼠血清中特异性抗体,最高滴度1:320,不比同种24—26kD 抗原检测的效果差;(2)用24—26kD 抗原检测 rsj26免疫鼠血清中的抗体水平,和以 rSj26抗原检测的水平相似,而用 SEA 测抗 rSj26抗体水平较差}(3)用 rSj26免疫鼠后以大陆株尾蚴攻击感染,减虫率可达44.4%,表明 rSj26可诱导一定程度保护性免疫力预防日本血吸虫大陆株尾蚴感染。对 rSj26抗原引进的重要意义进行了讨论。 展开更多
关键词 血吸虫 重组抗原 提纯 制备
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自愈水牛血清免疫筛选日本血吸虫cDNA文库 被引量:2
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作者 王文琴 刘述先 +3 位作者 宋光承 徐裕信 曹建平 陈家旭 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期286-288,共3页
目的 采用自愈水牛血清免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库并寻找日本血吸虫疫苗新候选抗原。 方法 用感染日本血吸虫后的自愈水牛血清免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 ,将阳性重组子克隆、测序 ,对核酸序列进行分析 ,确定目的基因。 ... 目的 采用自愈水牛血清免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库并寻找日本血吸虫疫苗新候选抗原。 方法 用感染日本血吸虫后的自愈水牛血清免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 ,将阳性重组子克隆、测序 ,对核酸序列进行分析 ,确定目的基因。 结果 从大陆株日本血吸虫成虫λZAPIIcDNA文库筛到 2 6个阳性克隆 ,经初步鉴定获 3种编码蛋白分子的基因 :副肌球蛋白 ,谷胱甘肽 S 转移酶 ,羟基类固醇脱氢酶。 结论 感染日本血吸虫后的自愈水牛血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库 ,可用于寻找日本血吸虫疫苗新候选抗原。 展开更多
关键词 自愈 水牛 血清 免疫筛选 日本血吸虫 CDNA文库
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日本血吸虫(大陆株)基因工程重组抗原混合疫苗的研究 被引量:1
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作者 刘述先 宋光承 +4 位作者 徐裕信 曹建平 孙文宇 缪应新 张威 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1998年第A07期78-78,共1页
3年来的主要进展为:完成了重组谷胱甘肽-S-转移酶(GST)免疫兔、牛的免疫持效观察.在国内外首先进行GST基因和K99基因共表达成功.表达产物分子量50kDa,以纤毛形成存在于细菌表面,并分别具有GST和K99抗原活性,为重组GST抗原与... 3年来的主要进展为:完成了重组谷胱甘肽-S-转移酶(GST)免疫兔、牛的免疫持效观察.在国内外首先进行GST基因和K99基因共表达成功.表达产物分子量50kDa,以纤毛形成存在于细菌表面,并分别具有GST和K99抗原活性,为重组GST抗原与幼畜腹泻疫苗在血吸虫病疫区联合应用打下基础.此外,还首次证明日本血吸虫GST与肝片吸虫(Fh)、猪蛔虫(As)有明星交叉保护性免疫力,并完成FhGST和AsGST基因的克隆测序及其与日本血吸虫GST基因同源性分析,对拓宽GST抗原的应用范围及价值有重要意义.天然TPI,Tropomyosin,Paramyosin免疫小鼠试验证明有明显免疫原性后,编码上述3个候选抗原基因均已克隆测序,部分表达或正在进行全基因表达的研究.血吸虫Tropomyosin的研究进展,首次证明该抗原有较强的免疫原性,可选择作为日本血吸虫基因工程混合疫苗的候选抗原之一. 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组抗原 疫苗 基因工程
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水牛感染血吸虫后病原消亡时间与防制对策的关系 被引量:2
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作者 何永康 刘述先 +8 位作者 喻鑫玲 李岳生 宋光承 徐裕信 候循亚 曹建平 刘宗传 赵雅琴 Donald P.McManus 《实用预防医学》 CAS 2003年第6期831-834,共4页
目的 观察水牛感染血吸虫后排卵量和毛蚴出孵规律及其消失时间。 方法 选择购自血吸虫病非流行区8~ 10月龄水牛 9头 ,每头水牛感染血吸虫尾蚴 2 0 0 0条。从感染后第 5 0d开始定期收集粪便作定量检查血吸虫卵和毛蚴 ,连续观察 3 2... 目的 观察水牛感染血吸虫后排卵量和毛蚴出孵规律及其消失时间。 方法 选择购自血吸虫病非流行区8~ 10月龄水牛 9头 ,每头水牛感染血吸虫尾蚴 2 0 0 0条。从感染后第 5 0d开始定期收集粪便作定量检查血吸虫卵和毛蚴 ,连续观察 3 2个月。 结果 在感染血吸虫后第 5 0d 9头水牛均在粪便中发现血吸虫卵和毛蚴 ,平均EPG和MPG分别为 4.65± 2 .0 8和 4.3 6± 2 .19;感染后第 60d分别达 41.0 5± 2 .0 9和 2 5 .97± 2 .45 ,显著高于第 5 0d。感染后第 80d ,MPG为最高 41.73± 3 .2 9,感染后第 90d ,EPG达最高 5 5 .0 4± 1.44。以后随着观察时间的延长 ,EPG和MPG逐渐降低 ,至 3 3 0d全部为阴性。感染后第 5 0d毛蚴孵出率最高 94.45± 6.412 % ,第 60d降为 65 .89± 19.0 1% ,第 80d有所回升85 .76± 10 .5 0 % ,以后逐渐降低 ,至 3 3 0d全部为 0。感染后 1年 ,粪便中未再检出血吸虫卵。肝、脾和肠组织中的虫卵不能孵出毛蚴 ,但沉积在组织中的血吸虫卵仍可造成该组织损害。 结论  1岁以内的水牛感染血吸虫后 1年无需治疗虫体均可消亡 ,粪卵排出消失 ,但在肝脾组织中的血吸虫卵沉着所致病变仍存在。 展开更多
关键词 水牛 血吸虫病 病原消亡
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