血清sCD40L检测在评价急性冠脉综合征发病风险中的应用

目的探讨分析sCD40L检测在评价急性冠脉综合征(ACS)发病风险中的意义。方法选取经临床确诊的ACS患者200例,随访全部病例为时6个月,以发生死亡及非致命性心肌梗死为试验观察终点。在发病72h内空腹状态下采取病例前臂静脉血并分离血清,用ELISA方法测定血清sCD40L及C-反应蛋白(CRP)水平;用微粒子化学发光方法测定cTnI水平。结果200例观察对象中108例血清sCD40L水平高于5.0μg/L。随访观察6个月后,发现高水平的sCD40L、CRP及cTnI与ACS患者发生死亡及非致命性心肌梗死的风险显著相关(P=0.001,P=0.02及P=0.001)。结论血清sCD40L、CRP及cTnI水平升高可用于独立预测ACS患者高风险心血管病事件。三者联合检测可明显提高诊断和预测ACS的灵敏度,并有望取代现有的心肌酶检测而成为新一代心血管病诊断和风险预测的临床实验室项目。

急性冠状动脉综合征早期盐酸替罗非班治疗对血清可溶性CD40配体水平的影响

目的观察急性冠状动脉综合征(ACS)早期盐酸替罗非班治疗对血清可溶性CD40配体(sCD40L)水平的影响,了解盐酸替罗非班对ACS斑块稳定性和免疫炎症抑制的作用。方法143例初次确诊为ACS患者分为常规治疗组76例和盐酸替罗非班治疗组67例,用ELISA法测定143例ACS患者治疗前后血清sCD40L水平。结果盐酸替罗非班治疗组67例ACS患者治疗后血清sCD40L水平明显下降,与常规治疗组比较有显著统计学差异(P<0.01)。结论ACS患者早期予以盐酸替罗非班治疗,可明显降低血清炎症因子水平,从而改善该病进程。

2型糖尿病患者APOA5—1131T／C基因多态性与血脂水平的相关性研究

目的探讨载脂蛋白A5基因（APOAS）-1131T／C多态性与广州市2型糖尿病患者血脂水平的相关性。方法用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性分析（PCR—RFLP）技术检测75例健康人及86例2型糖尿病患者APOA5-1131T／C基因型，并统计等位基因频率分布情况；用Olympus AU2700分析仪测定所有研究对象的血脂水平。结果2型糖尿病组APOA5—1131T／C基N频率、等位基因频率与健康对照组差异无统计学显著性意义（P〉0．05）；2型糖尿病组C等位基因携带者TG水平显著高于非C等位基因携带者（P〈0．05）。结论APOA5—1131T／C多态性影响2型糖尿病患者血浆TG水平，APOA5-1131C等位基因与2型糖尿病血浆TG水平增高有密切关系。

不稳定型心绞痛患者冠状动脉支架置入术后血清sCD40L及hs-CRP水平的动态观察

目的动态观察52例不稳定型心绞痛患者冠状动脉支架置入术后血清可溶性CD40配体(sCD40L)及超敏C-反应蛋白(hs-CRP)的水平变化。方法用ELISA法检测血清sCD40L水平;在Olympus AU2700全自动生化分析仪上采用免疫透射比浊法检测血清hs-CRP水平。结果与冠状动脉支架置入前相比,sCD40L及hs-CRP水平在支架置入后7,14,21,30,90和180 d均明显降低(P<0.0001);支架置入后7,14,21,30,90和180 d五个组之间相互比较,sCD40L及hs-CRP水平差异无显著性(P>0.05)。结论在支架置入前,不稳定型心绞痛患者血清sCD40 L及hs-CRP的水平均明显偏高,在支架置入后随之降低。sCD40L及hs-CRP水平变化对评价临床药物干预效果具有一定作用。

双探针实时荧光定量法检测HCV RNA抗原的临床意义

目的建立双探针荧光定量HCV RNA检测方法,分析其定量检测HCV RNA的灵敏度和特异性以及HCV RNA含量与患者病情的相关性。方法选取100例抗HCV抗体阳性样本,包括慢性肝炎患者45例、肝硬化患者30例、肝癌患者25例,并选取献血员50例为对照,用双探针荧光定量法和两种商品荧光定量试剂方法进行HCV RNA检测。结果双探针荧光定量法阳性率为93%(93例);两种商品荧光定量试剂方法阳性率分别为84%(84例)和79%(79例)。结论双探针荧光定量提高HCV RNA检测的灵敏度和特异性,HCV RNA含量与丙型肝炎患者病情变化及严重程度相关。

1型糖尿病患者血清sCD40L测定的临床意义

目的探讨1型糖尿病无血管并发症患者血清可溶性CD40配体(sCD40L)测定的临床意义。方法用sCD40LELISA试剂盒检测1型糖尿病患者和对照组血清血清sCD40L水平。结果1型糖尿病患者和对照组血清sCD40L水平分别为2.39±0.9ng/ml及2.35±1.1ng/ml,二者比较无显著性意义(P>0.05);在所观察的变量中,1型糖尿病患者sCD40L水平与年龄正相关(r=0.53,P<0.01),而与其它变量不相关;对照组sCD40L水平与所有变量均不相关。结论随年龄增加,1型糖尿病患者血清sCD40L水平有增高趋势,其并发血管病变的风险增加,因此,血清sCD40L水平的检测可作为1型糖尿病患者病情控制情况的衡量指标。

肺炎链球菌触发肺Ⅱ型上皮细胞F-actin细胞骨架重排

目的 :通过体外实验 ,研究肺炎链球菌 (Streptococcus pneumoniae,S.pn)是否可触发肺 型上皮细胞 (A5 4 9)信号转导途径触发微丝肌动蛋白 (filam entous actin,F- actin)细胞骨架重排 ,进而侵袭 A5 4 9细胞 ,并初步分析触发 A5 4 9细胞 F- actin细胞骨架重排的细菌亚组分。方法 :采用 F- actin特异性 FITC-phalloidin荧光染料 ,观察 S.pn作用 A5 4 9细胞前后的 F- actin细胞骨架重排情况 ,依照重排百分率得分标准以 (% )表示 ;用 F- actin细胞骨架重排抑制剂细胞松弛素 D预处理 A5 4 9细胞 ,观察 S.pn对 A5 4 9细胞侵袭的改变情况 ;用变溶菌素提取 S.pn细胞壁以观察其对 F- actin细胞骨架重排的影响。结果 :S.pn作用A5 4 9细胞后 ,经 FITC- phalloidin荧光染色 ,F- actin细胞骨架呈黄绿色块状聚集 ,对照细胞呈现均匀黄绿色荧光外观 ;F- actin细胞骨架重排抑制剂细胞松弛素 D可明显降低 S.pn对 A5 4 9细胞的侵袭 ,在其浓度为 0 .2 5 μg/ m l时 ,未得到可测的细菌数 ;S.pn细胞壁作用 A5 4 9细胞后 ,经 FITC- phalloidn荧光染色 ,F-actin细胞骨架呈黄绿色块状聚集 ,二者存在剂量依赖性。结论 :S.pn及其细胞壁亚组分可触发 A5 4 9细胞F- actin细胞骨架重排 ,进而侵袭 A5 4

苦参碱对肝癌细胞增殖抑制作用研究

目的在体外观察苦参碱对BEL-7402肝癌细胞增殖的影响。方法用含不同浓度(0～3.2mmol/L)苦参碱的培养液在体外培养BEL-7402细胞24h,通过MTT试验测定其对BEL-7402细胞增殖的影响作用。结果在上述使用浓度范围内,苦参碱对BEL-7402细胞增殖的抑制率为0～36.7%。结论苦参碱在体外可抑制BEL-7402细胞的增殖,且呈剂量依赖性。

肺炎链球菌触发肺Ⅱ型上皮细胞微丝肌动蛋白重排的钙信号转导机制

目的通过体外实验研究肺炎链球菌(S.pn)是否可通过肺型上皮细胞(A549)钙信号转导途径触发微丝肌动蛋白(F-actin)细胞骨架重排,进而导致S.pn对A549细胞的侵袭。方法采用F-actin特异性FITC-phalloidin荧光染料,观察S.pn作用A549细胞前后F-actin细胞骨架重排情况,以重排百分率表示;用F-actin细胞骨架重排抑制剂细胞松弛素D预处理A549细胞,观察S.pn对A549细胞的侵袭;使用Ca2+信号转导抑制剂dantrolene预处理A549细胞,观察其与F-actin细胞骨架重排百分率间是否存在剂量依赖关系;用Fura-2/AM荧光探针负载A549细胞后测定S.pn粘附A549细胞30、60、90 min的胞内[Ca2+]i。结果S.pn作用A549细胞后,经FITC-phalloidin荧光染色,F-actin细胞骨架呈黄绿色块状聚集;F-actin细胞骨架重排抑制剂细胞松弛素D可明显降低S.pn对A549细胞的侵袭,在其浓度为0.25 μg/ml时,未得到可测的细菌数;Ca2+信号转导抑制剂可部分抑制A549细胞F-actin细胞骨架重排,且与F-actin细胞骨架重排百分率间存在量效关系;S.pn粘附A549细胞30、60、90 min后的胞内[Ca2+]i高于对照[(187.4±17.3 nmol/L)],并达到饱和,分别为(487.5±38.1)、(548.2±35.6)和(557.2±47.5)nmol/L。结论S.pn可通过Ca2+细胞信号转导途径触发A549细胞F-actin细胞骨架重排,进?

冠心病患者血清MMP-7测定的临床意义

目的测定冠心病患者血清基质金属蛋白酶-7(MMP-7)水平。方法选取100例经血管造影确诊的冠心病患者,其中70例为稳定性心绞痛患者,30例为不稳定性心绞痛患者,并选取30例健康人为对照。用ELISA法测定血清MMP-7水平。结果稳定性、不稳定性心绞痛患者及对照组血清MMP-7分别为(5.0±1.9)μg/L、(5.2±2.1)μg/L及(3.1±1.4)μg/L。与对照组相比,冠心病患者血清MMP-7水平升高(P<0.05)。结论冠心病患者血清MMP-7水平升高,该指标可望成为新一代诊断冠心病的血清标志物。

肺炎链球菌触发人肺Ⅱ型上皮细胞F-actin细胞骨架重排与TPK信号转导的相关性研究

目的 :通过体外实验 ,研究Streptococcuspneumoniae(S pn)是否通过肺Ⅱ型上皮细胞 (A5 4 9)酪氨酸蛋白激酶 (TPK)信号转导途径触发微丝肌动蛋白 (Filamentousactin ,F actin)细胞骨架重排 ,进而导致S pn对A5 4 9细胞的侵袭。 方法 :采用F actin特异性FITC phalloidin荧光染料 ,观察S pn作用A5 4 9细胞前后的F actin细胞骨架重排情况 ,依照重排百分率得分标准以 (% )表示 ;用F actin细胞骨架重排抑制剂细胞松驰素D预处理A5 4 9细胞 ,观察S pn对A5 4 9细胞的侵袭率 ;使用TPK信号转导抑制剂Genistein预处理A5 4 9细胞 ,观察其与F actin细胞骨架重排百分率间是否存在剂量依赖关系。结果 :S pn作用A5 4 9细胞后 ,经FITC phalloidin荧光染色 ,F actin细胞骨架呈块状、丝状聚集 ;F actin细胞骨架重排抑制剂细胞松驰素D可明显降低S pn对A5 4 9细胞的侵袭率 ,在其浓度为 0 2 5 μg/ml时 ,未得到可测的细菌数 ;TPK信号转导途径抑制剂可部分抑制A5 4 9细胞F actin细胞骨架重排 ,并与F actin细胞骨架重排百分率间存在量效关系 ,其相关系数分别为rTPK= 0 91(P <0 0 5 )。结论 :上述结果提示S pn可通过TPK细胞信号转导途径触发A5 4 9细胞F actin细胞骨架重排 ,进而导致S pn侵袭A5 4 9细胞。

用Fura-2/AM测定肺炎链球菌粘附A549细胞后胞浆游离钙离子浓度

目的 :通过体外实验 ,研究肺炎链球菌 (Streotococcus pneumoniae,S.pn)是否可触发肺 型上皮细胞 (A5 49)胞浆 [Ca2 +] i 浓度的改变。方法 :用 F ura-2 /AM荧光探针负载 A5 49细胞后测定 S.pn粘附A5 49细胞 3 0、60、90 min的胞内 [Ca2 +] i 浓度。结果 :S.pn粘附 A5 49细胞 3 0、60、90 min后的胞内 [Ca2 +] i均高于对照 [(187.4± 17.3 ) nmol/L ] ,并达到饱和 ,分别为 (4 87.5± 3 8.1)、(5 48.2± 3 5 .6)、(5 5 7.2± 47.5 )nmol/L。结论 :上述结果提示 S.pn粘附 A5 49细胞可增加胞浆内 [Ca2 +] i

不同时间血清sCD40L水平与急性冠脉综合征患者发病风险的相关性研究

目的研究血清sCD40L水平与急性冠脉综合征患者发病风险的相关性.方法以发生死亡或非致命性心肌梗死为试验观察终点,依据血清sCD40L水平将220例入院时胸痛时间不超过12 h的急性冠脉综合征(ACS)患者分为五组:第1组(＜1.93μg/L)39例:第2组(1.93～3.50μg/L)41例;第3组(3.51～5.00μg/L)51例;第4组(5.01～6.30 μg/L)46例;第5组(＞6.30μg/L)43例,观察各组患者在不同随访观察时间段内发生死亡或非致命性心肌梗死的百分率;用ELISA方法测定血清sCD40L水平.结果在最初24 h内,5个组发生死亡或非致命性心肌梗死的百分率间差别无显著意义(P＞0.05).在随后的72 h、1 mo和6 mo随访观察时间内,第4组和第5组患者发生死亡或非致命性心肌梗死的百分率均明显高于前3个组,差异有显著意义(P＜0.05).结论血清sCD40L水平增高(＞5.00 μg/L)的ACS患者,随观察时间的推移,发生死亡或非致命性心肌梗死的风险增加.

年轻吸烟者血清可溶性CD40配体水平测定的临床意义

目的探讨年轻吸烟者血清可溶性CD40配体(sCD40L)水平的变化。方法用ELISA法检测受试者血清sCD40L水平;用OlympusAU2700全自动生化分析仪检测受试者血清超敏C-反应蛋白(HSCRP)浓度。结果年轻吸烟者与对照组血清sCD40L和HSCRP水平分别为1.21±0.29ng/mL与0.37±0.21ng/mL和2.47±0.68mg/L与0.82±0.72mg/L,二者分别比较,差异有显著意义(P<0.05)。结论年轻吸烟者血清sCD40L升高,表明吸烟是心血管事件发生重要的风险因子。

细菌侵袭与宿主细胞骨架重排

细菌侵袭宿主细胞是许多感染性疾病发生的关键环节 ,侵袭过程常与宿主细胞信号转导的发生及其引发的细胞骨架重排有关。近期研究还发现了一些能促进细菌侵袭的特异性细胞蛋白质 ,它们也参与调节肌动蛋白 (actin)细胞骨架重排的信号转导过程。

异源双链PCR法快速检测ST239型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的用异源双链PCR法快速检测ST239型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。方法根据ST239型MRSA的分子结构特点设计两对引物序列，用PCR方法进行扩增反应。结果在102株MRSA中检测出99株ST239型MRSA，其余3株为非ST239型。结论用异源双链PCR法快速检测ST239型MRSA具有准确、快速、高通量、省时和省力特点，可作为研究MRSA分子流行病学特征的一个重要工具。

微流控芯片快速鉴定多重细菌

建立了一种用于多重细菌鉴定的微流控芯片分析方法。在芯片上实现细菌进样、培养和鉴定,结合培养池阵列的空间分辨力以及菌种特异性显色培养基的颜色分辨力,可以实现多重细菌检测。实验选用4种泌尿系统感染常见病原菌作为模拟测试对象,结果显示,这种芯片方法在15 h内可完成细菌鉴定,检测限可达101cfu/mL。临床样本测试结果显示,芯片方法可以实现4种细菌同步鉴定,检测结果与传统方法的一致性达到96.3%。这种微流控细菌鉴定方法简便快速,有望发展成为细菌检测的有力工具。

壁虎粉对哮喘豚鼠模型干预作用的实验研究

目的探讨壁虎粉平喘的部分作用机理。方法采用卵蛋白致敏激发豚鼠哮喘为模型,观察壁虎粉干预组、氨茶碱对照组和哮喘模型组动物哮喘发病情况,肺泡灌洗液(BALF)中EOS含量及豚鼠肺组织病理学的改变。结果壁虎粉和氨茶碱组BALF中EOS含量明显低于哮喘模型组,病理学提示壁虎粉能抑制局部炎症细胞浸润、保护气管粘膜的完整性。结论壁虎粉可通过抑制气道炎症,促进EOS凋亡等途径发挥平喘作用。

虎杖提取液对非酒精性脂肪肝大鼠肿瘤坏死因子α基因表达的影响

应用RT qPCR方法检测分析非酒精性脂肪肝动物模型药物干预效果。经过4周的干预试验,干预组大鼠脂肪组织的TNF-αmRNA相对水平比对照组显著下降(t=2.452,P=0.022)。干预组的肝组织甘油三酯、总胆固醇和葡萄糖含量均低于对照组,其中总胆固醇含量的差异显著(t=2.555,P=0.019)。研究表明,虎杖水提液可以显著地降低NAFLD大鼠脂肪组织的TNF-αmRNA水平,也可以降低大鼠肝组织甘油三酯、总胆固醇和葡萄糖的含量,在调节肝脂、肝糖代谢和改善肝细胞脂肪变性具有一定效果。