洋葱伯克霍尔德菌群(Bcc)及干扰菌在不同增菌培养基中的生长研究

目的:考察Bcc以及Bcc与干扰菌的混合物在不同的增菌培养基中能否生长和增殖;探讨不同的Bcc菌种对增菌培养基的营养需求和抗生素的耐受是否存在差异。方法:将Bcc的代表菌株、干扰菌以及Bcc与干扰菌的混合物分别接种至TSB、10倍稀释的TSB、添加10 mg·L^(-1)庆大霉素的TSB和添加250000 U·L^(-1)多粘菌素B的TSB中培养,划线分离至选择性培养基上观察结果,并对可疑菌落进行分离和鉴定。结果:只接种Bcc的4种增菌培养基均能使之良好地增殖。低量的Bcc(约102 cfu)与高量的干扰菌(104 cfu)的混合接种,除了神秘伯克霍尔德菌CMCC(B)23010外,4种增菌培养基能使Bcc增殖并被检出。结论:添加抗生素的TSB与未添加抗生素的相比没有表现出明显的优势。TSB可以作为Bcc检验时的增菌培养基使用。生长缓慢且活力弱的Bcc菌株在特定条件下有可能会被漏检。

幽门螺杆菌的免疫学检测技术及其主要抗原表位

目的了解幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的免疫学检测技术和主要抗原表位及其应用,为临床诊断及生物技术药物开发提供参考。方法查阅相关文献并结合本课题组的研究,分析H.pylori的免疫学检测技术和主要抗原表位及其应用。结果基于抗原-抗体反应的免疫层析技术是H.pylori的主要体外检测技术。H.pylori特异性抗原是基于免疫反应H.pylori检测的关键,也是相关疫苗开发的关键。尿素酶(Ure)、细胞毒素相关蛋白A/L(CagA/L)、空泡毒素相关蛋白A(VacA)、中性粒细胞激活蛋白(NAP)是H.pylori致病性关键表面抗原和病理学基础。结论基于多种抗原(或抗体)的组合表位同时具备了高灵敏度和高特异性的优点,其在H.pylori诊断和疫苗及抗体等生物技术药物开发方面具有广阔的前景。

两批次抗真菌乳膏中洋葱伯克霍尔德菌群的检测结果及其耐药性考察

目的:考察抗真菌乳膏中洋葱伯克霍尔德菌群(Brukholderia cepacia complex,BCC)检测、鉴定结果及其耐药性。方法:(1)采用薄膜过滤法测定两批抗真菌乳膏中需氧菌总数;(2)挑选滤膜上生长的菌落进行纯化并观察其特性,再采用Vitek MS型全自动快速微生物质谱检测系统鉴定纯化后的菌落,以及用Vitek 2 Compact型梅里埃全自动细菌鉴定及药敏分析系统对检出的BCC菌进行鉴定和药敏试验。结果:两批抗真菌乳膏中检出的需氧菌总数接近限值;滤膜上生长的菌落被鉴定为污染伯克霍尔德菌和稳定伯克霍尔德菌;这2株菌落对大部分抗菌药物均耐药。结论:两批抗真菌乳膏中的BCC,对尼泊金类防腐剂和大部分抗菌药物均耐药,其在药品中进一步繁殖的可能性较大,临床使用具有一定的风险,应引起高度重视。

伪品乌梢蛇PCR鉴别和蛇种溯源调查

目的利用基因序列同源性分析的方法对伪品乌梢蛇蛇种溯源调查。方法(1)用PCR的方法对供试品进行鉴别;(2)利用通用引物扩增乌梢蛇对照药材和供试品COⅠ基因,将PCR产物进行测序,测序结果在NCBI进行BLAST序列同源性比对分析。结果(1)在与对照药材凝胶电泳图谱300~400 bp处,无DNA条带,200~300 bp处有DNA条带;(2)基因序列同源性比对结果显示,对照药材为乌梢蛇,两个供试品均为灰鼠蛇。结论用PCR方法鉴别乌梢蛇是一种准确、客观的方法。利用COⅠ基因通用引物扩增的PCR产物进行测序和序列同源性比对,可以对蛇种进行溯源调查。

722件进口精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液质量研究

目的:对进口精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液进行质量分析。方法:对2018~2020年经苏州口岸进口的129批(722件)精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液的有关物质、苯酚和间甲酚、可溶性赖脯胰岛素、含量、锌、高分子蛋白质、pH等质量参数进行统计分析,并对结果进行趋势分析。结果:精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液(25R)36批352件,占48.8%,精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液(50R)93批370件,占51.2%。722件精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液关键参数检测结果主要位于平均值±2SD区间。苯酚和间甲酚、可溶性赖脯胰岛素、含量、锌、pH等均未超过平均值±3SD,但部分批次产品的有关物质和高分子蛋白质超过平均值±3SD。结论:精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液总体情况稳定,质量较好。