HPLC-ICP-MS联用分析中成药中的可溶性砷形态

建立了HPLC-ICP-MS联用技术分析三价砷、五价砷、一甲基砷和二甲基砷的方法,并应用于中成药可溶性砷形态的研究中.分别考察了牛黄解毒片、赛金化毒散、牛黄清火丸、医痫丸、乳核散结片等5种中成药,并比较了水、盐酸、磷酸、人工胃肠液和甲醇水等多种提取介质以及超声辅助和振荡等提取方式.结果表明,各种介质的提取效果差别不大,其中以1%磷酸为提取介质、超声辅助提取1h的提取率稍高,且形态不发生转化.所考察含矿物中成药的牛黄解毒片、赛金化毒散、牛黄清火丸、医痫丸中可溶性砷的比例占总砷的1%以下,主要为三价砷和五价砷,而含有海产品的中成药乳核散结片中主要为三价砷、二甲基砷和五价砷.此方法4种砷的加标回收率在90%—107%之间,平行6次提取结果4种砷相对标准偏差均小于3%。

中成药可溶性汞形态分析方法及样品结果测定

建立了微波辅助提取、HPLC-ICP-MS联用分析中成药中二价汞和甲基汞的方法。分别比较了提取液中盐酸和L-半胱氨酸含量、提取温度和提取时间对提取结果的影响,得到了微波辅助提取的最优条件:体积分数为1%的盐酸10mL和质量分数为5%的L-半胱氨酸1mL作为提取液,控温70℃,微波辅助提取1h。该方法测得的二价汞和甲基汞的精密度分别为1.7%和4.4%,加标回收率分别为80.7%～99.5%和93.7%～95.8%。并应用该方法分析测定了20种、共49批次的含朱砂的中成药中可溶性汞的形态。

毛细管电泳-电感耦合等离子体质谱法联用(CE-ICP/MS)测定八种砷的化合物

本文建立了毛细管电泳-电感耦合等离子体质谱联用(CE-ICP/MS)测定砷甜菜碱(AsB)、砷胆碱(AsC)、三价砷[As(Ⅲ)]、五价砷[As(V)]、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、阿散酸(p-ASA)、洛克沙胂(3-NHPAA)等8种砷化合物的分析方法.各种的砷化合物于20 min内完全分离,标准曲线线性良好,各种砷的迁移时间与峰面积之相对标准偏差RSD(n=6)分别在1.2%—1.7%及1.6%—4.1%的范围内,检出限(S/N=3)在0.3—0.8 ng.g-1之间,结果令人满意.

乳腺癌转移瘤生物发光动物模型复制的实验研究

目的复制尾静脉注射和腹腔注射接种的裸鼠乳腺癌转移瘤模型,应用生物发光技术监测肿瘤细胞在活体内的生长和转移。方法培养转染有荧光素酶基因的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231-luc-D3-h2LN,分别通过尾静脉和腹腔接种到裸鼠体内,每周进行生物发光成像,最后解剖裸鼠体外观察转移灶。结果尾静脉接种模型肿瘤细胞在体内1周时有明显减少,之后在肺部定植并迅速增长,于接种后5周体外成像,确认肺部转移,其他部位未见肿瘤转移灶;腹腔接种模型的肿瘤细胞在腹腔形成多个转移灶,肿瘤细胞持续增殖,于接种后6周体外成像,发现壁层腹膜和脏层腹膜内多个转移灶,各脏器和腹腔以外部位未见肿瘤转移。结论建立了两种裸鼠转移瘤模型,并应用生物发光成像技术实现了深层部位肿瘤的追踪监测。

光、磁成像法探测脑胶质瘤微环境脑组织间隙结构及脑组织间液引流的变化

目的探讨脑胶质瘤微环境内组织间隙(extracellular space,ECS)的结构特征以及瘤内脑组织间液(interstitial fluid,ISF)引流的变化。方法48只SD大鼠随机分为丘脑对照组、丘脑肿瘤组、尾状核对照组、尾状核肿瘤组,每组12只,每组又分为光学示踪亚组和磁示踪亚组各6只。应用光、磁示踪法,分别以Alexa Flour 594和钆喷酸葡铵(Gd-DTPA)作为示踪剂,对SD大鼠的丘脑、尾状核区C6胶质瘤内ECS结构及ISF的扩散过程进行示踪分析,并与相应对照组进行比较。应用MRI检测示踪剂在脑ECS中的扩散和分布,计算获取Gd-DTPA在脑ECS内的有效扩散系数(D ECS)、清除速率(k’)、迂曲度(λ)和半衰期(t 1/2)等扩散参数。应用共聚焦显微镜对注射示踪剂2 h后的离体脑切片成像,并分析得到扩散分布的最大面积。对同一脑区对照组与肿瘤组的光、磁示踪结果进行对比分析。结果与丘脑对照组比较,丘脑肿瘤组的k’显著增加[(7.27±1.08)×10-4 mm 2/s vs.(3.69±0.46)×10-4 mm 2/s,t=7.474,P=0.000],t 1/2显著缩短[(21.36±2.67)min vs.(53.86±3.18)min,t=-19.165,P=0.000],D ECS显著减小[(2.27±0.22)×10-4 mm 2/s vs.(3.14±0.41)×10-4 mm 2/s,t=-4.536,P=0.001],λ显著增加[(2.11±0.10)%vs.(1.06±0.01)%,t=25.201,P=0.000]。与尾状核对照组比较,尾状核肿瘤组的k’显著增加[(6.87±1.09)×10-4 mm 2/s vs.(3.25±0.31)×10-4 mm 2/s,t=7.867,P=0.000],t 1/2显著缩短[(23.77±7.31)min vs.(87.20±4.31)min,t=-18.309,P=0.000],D ECS显著减小[(2.38±0.79)×10-4 mm 2/s vs.(3.35±0.12)×10-4 mm 2/s,t=-2.986,P=0.014],λ显著增加[(2.12±0.31)%vs.(1.73±0.03)%,t=3.067,P=0.012]。结论丘脑和尾状核区胶质瘤内ISF的k’、λ显著增加,t 1/2、D ECS显著减少。