ADH1B对肝细胞癌合并脉管侵犯患者的预后价值及肝癌生物学行为的影响

目的探讨乙醇脱氢酶1B(alcohol dehydrogenase 1B,ADH1B)分子在合并脉管侵犯的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma with vascular invasion,VI-HCC)患者中的临床价值及对肝癌细胞生物学功能的影响。方法对VI-HCC组织进行RNA测序及GO、KEGG、GSEA、WGCNA等分析。采用免疫组织化学法检测组织中的ADH1B蛋白表达水平。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线并运用log-rank检验分析不同ADH1B蛋白表达组患者的生存差异,单因素及多因素Cox回归模型分析影响VI-HCC患者术后预后的独立危险因素,Spearman检验分析ADH1B与AFP、Ki67的相关性。用过表达ADH1B及其阴性对照的慢病毒感染肝癌Huh7细胞以构建ADH1B过表达的稳转株,采用qRT-PCR法检测细胞中ADH1B mRNA的表达水平。采用EDU、平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力,Transwell侵袭、迁移实验及划痕实验检测细胞的侵袭、迁移能力,流式细胞术检测细胞的凋亡能力。结果RNA测序结果发现VI-HCC根治术后预后不良的患者原发瘤呈代谢重编程特征。免疫组织化学结果显示VI-HCC的癌组织中ADH1B蛋白表达水平显著低于癌旁正常组织(P<0.001);预后良好组患者的ADH1B蛋白表达水平显著高于预后不良组(P<0.05);ADH1B低表达可缩短患者的无复发生存期(relapse-free survival,RFS)和总生存期(overall survival,OS)(均P<0.01);ADH1B表达水平与AFP、Ki67水平呈负相关趋势(均P<0.01)。Cox回归模型结果显示,ADH1B低表达是影响VI-HCC患者术后RFS和OS的独立危险因素。细胞学实验结果发现过表达ADH1B可抑制细胞的增殖、侵袭、迁移能力,促进其凋亡能力(均P<0.05)。结论肝脏代谢-解毒相关基因ADH1B在HCC中表达下调且其低表达缩短VI-HCC患者的RFS和OS,可能的机制是ADH1B抑制HCC细胞的增殖、侵袭和迁移的能力,促进HCC细胞的凋亡能力。

miR-145-5p靶向调控LOX基因对肝癌细胞侵袭和迁移的影响

目的探讨miR-145-5p靶向调控LOX对肝癌细胞侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法收集2017年9月至2019年9月广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科手术切除的73例肝癌患者肿瘤组织及其配对癌旁正常组织,以及肝癌细胞系SMMC-7721、SK-Hep1,采用RT-PCR法检测组织中miR-145-5p和LOX的表达。分别将miR-145-5p慢病毒载体、LOX过表达质粒及LOX慢病毒沉默载体转染至肝癌细胞SMMC-7721或SK-Hep1,同时用LOX过表达质粒和过表达miR-145-5p慢病毒载体共转染SMMC-7721细胞,各转染组均设置相应阴性对照组及空白对照组;然后采用Transwell实验检测肝癌细胞迁移和侵袭能力;Western blot法检测LOX蛋白的表达水平;通过TargetScan数据库预测miR-145-5p的靶点,并利用Cluster Profiler包进行GO和KEGG富集分析。结果qRT-PCR检测结果显示,miR-145-5p在癌旁正常组织中的表达高于肝癌组织(4.196±2.288 vs 2.835±1.817,P<0.0001);LOX在肝癌组织中的表达高于癌旁正常组织(12.17±1.369 vs 11.26±1.556,P<0.001)。Transwell检测结果显示,过表达LOX能促进肝癌细胞侵袭、迁移,敲低LOX则抑制肝癌细胞侵袭、迁移(均P<0.05);过表达miR-145-5p能抑制肝癌细胞的侵袭、迁移能力,LOX过表达能逆转miR-145-5p对SMMC-7721细胞迁移和侵袭的抑制能力。TargetScan数据库预测显示,LOX是miR-145-5p的靶基因。Western blot检测结果显示,miR-145-5p能抑制LOX蛋白表达水平(P<0.001)。结论miR-145-5p在肝癌组织中低表达,LOX则高表达,miR-145-5p可能通过负向调控LOX抑制肝癌细胞侵袭和迁移。

基于循环肿瘤细胞的肝细胞癌术后超进展复发列线图模型的构建

目的构建基于循环肿瘤细胞(CTC)的预测肝细胞癌(HCC)患者肝切除术后超进展复发的列线图模型。方法回顾性分析2013年1月至2022年12月在广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科行肝切除术治疗的231例HCC患者的临床资料,其中男性200例,女性31例,年龄46(39,52)岁。231例患者分为两组:建模组(n=154)和验证组(n=77)。依据术后超进展复发情况,154例建模组患者分为超复发组(n=39)和未超复发组(n=115)。77例验证组患者中超进展复发16例,未超进展复发61例。收集患者的CTC计数、甲胎蛋白、术后病理等临床资料。logistic回归分析术后超进展复发的影响因素,基于多因素logistic回归分析结果构建列线图模型。通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线、校准曲线、决策曲线分析(DCA)、临床影响曲线(CIC)验证模型。结果多因素logistic回归分析结果表明,年龄≤45岁(OR=6.704,95%CI:1.619~27.760,P=0.009)、肿瘤包膜不完整(OR=13.292,95%CI:3.084~57.295,P=0.001)、高CTC计数(OR=1.101,95%CI:1.023~1.186,P=0.011)、高Ki67指数(OR=52.659,95%CI:3.215~862.604,P=0.005)的HCC患者,肝切除术后超进展复发的风险高。基于3个术前变量构建了列线图模型,校准曲线显示,列线图预测结果和实际结果具有良好的符合度。分别在建模组和验证组中绘制列线图模型预测HCC患者肝切除术后超进展复发的ROC曲线,曲线下面积分别为0.907(95%CI:0.856~0.959)和0.833(95%CI:0.721~0.945)。DCA表明,该列线图模型可作为有价值的预测工具预测肝切除术后超进展复发的风险。CIC结果显示,该列线图模型判断发生超进展复发的群体与实际发生超进展复发的群体高度匹配。结论本研究建立的基于年龄、肿瘤包膜、CTC计数的列线图模型可在术前较为准确地预测HCC患者术后超进展复发,经验证该模型具有良好的临床应用价值。

托幼机构小中班儿童视力综合干预效果分析

目的探讨托幼机构小中班儿童视力综合干预效果。方法2021年开展在园儿童免费视力筛查,通过分层整群随机抽样法,抽取镇江市6家托幼机构小班及中班全部幼儿作为干预对象,共1890名,其中小班836名,中班1054名,均干预1年。比较干预前与干预后视力筛查情况。结果小班儿童836名,其中屈光近视24名,筛查率为2.87%;中班儿童1054名,屈光近视36名,筛查率为3.42%。中班远视力筛查异常率(26.57%)显著高于小班(20.69%),差异有统计学意义(χ^(2)=8.82,P<0.05)。干预前,屈光近视60名,屈光近视率为3.17%;干预后,屈光近视43名,屈光近视率为2.29%。干预后远视力异常筛查率(29.59%)高于干预前(23.97%),差异有统计学意义(χ^(2)=15.19,P<0.05)。结论综合干预可以有效提高儿童视力水平,改善视力不良,尤其是低年龄段托幼机构儿童。