基于指纹图谱、多指标定量和网络药理学的蓍草质量标志物预测分析

目的:采用指纹图谱和网络药理学的方法,分析预测蓍草的潜在中药质量标志物(Q-Marker)。方法:采用高效液相色谱法建立蓍草的指纹图谱,对21批蓍草进行相似度评价并对共有峰进行指认和归属,再运用网络药理学方法,构建“成分-靶点-通路”网络图,分析预测蓍草的Q-Marker,并测定其含量。结果:建立了21批蓍草的指纹图谱,相似度均大于0.910,确认了13个共有峰,通过对照品比对指认出6个色谱峰并测定其含量,6个峰分别为绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、百蕊草素Ⅱ和3,4,5-三咖啡酰奎宁酸。经网络药理学分析筛选出发挥抗炎、抗菌作用的绿原酸、百蕊草素Ⅱ和3,4,5-三咖啡酰奎宁酸3个活性成分,38个核心靶点和20条关键通路。初步预测绿原酸、百蕊草素Ⅱ和3,4,5-三咖啡酰奎宁酸可作为蓍草潜在的Q-Marker。结论:预测分析得到的蓍草QMarker,为蓍草药材质量控制提供一定参考,为后续其药效物质基础及作用机制研究奠定基础。

天麻中天麻素提取检测方法研究

目的:改进天麻中天麻素提取及测定方法。方法:利用热回流提取法,并采用HPLC进行检测,在单因素实验的基础上,利用响应面分析法确定天麻素最佳提取条件。结果:以纯净水为溶剂,在沸水浴条件下,料液比1∶37,提取2次,每次126 min,天麻素的含量达0.377%。此结果比2010年版中国药典天麻素提取方法所得天麻素含量提高了2.12倍。结论:热水回流提取法天麻素的溶出率高,可更准确的反映天麻中天麻素的真实含量。

鲜天麻干制过程中最佳加工条件的探索

目的:探索鲜天麻干制的最佳加工条件。方法:以天麻素含量为指标,在单因素实验的基础上,采用正交设计法,筛选鲜天麻干制的最佳加工条件。结果:鲜天麻采收后当天洗净泥沙,常压蒸煮25 min,切片,105℃烘干,HPLC法测得天麻素的含量达0.532%,比传统加工法(0.371%)提高了43.40%。结论:不同的加工条件对天麻素含量影响较大。

黑羽乌骨鸡毛中黑色素提取工艺

以黑羽乌骨鸡毛为原料,采用盐酸水解法从乌骨鸡毛中提取黑色素并对黑色素的含量进行测定。通过单因素实验考察了提取时间、盐酸浓度、料液比对乌骨鸡毛中黑色素得率的影响,在单因素实验基础上通过响应面实验分析法得到二次多项式回归方程的预测模型。结果表明:乌骨鸡毛中黑色素提取的最佳工艺条件为,HCl浓度27%,提取时间6h,料液比(g∶mL)1∶2,在此条件下黑色素得率达4.72%。黑色素样品经过氧化氢法氧化处理,采用高效液相色谱法测出黑色素含量为76.20%。

从虎杖中同时提取分离白藜芦醇和蒽醌类工艺研究

以自然发酵后的虎杖为原料,采用甲醇热回流同时提取虎杖中的白藜芦醇和蒽醌类化合物,选择甲醇浓度、料液比、提取次数和提取时间作为考察因素,以白藜芦醇和蒽醌类化合物的含量为指标,通过正交试验,得到白藜芦醇和蒽醌类化合物同时提取的适宜条件为:体积分数98%甲醇,料液比1∶6,提取3次,每次1 h,白藜芦醇的含量1.912%,提取率达90%,蒽醌类化合物的含量为1.504%,提取率达91.15%;粗提物经V(丙酮)∶V(乙醚)=1∶3的混合溶剂纯化,体积分数50%乙醇溶解分离后,分别得到了白藜芦醇和蒽醌粗品,粗品中白藜芦醇的含量达63.72%,蒽醌含量达50.82%。

基于网络药理学和UPLC-Q-TOF/MS结合动物实验探究蓍草预防急性肝损伤的作用机制

目的 通过UPLC-Q-TOF/MS定性分析和网络药理学预测并结合动物实验验证初步探究蓍草保护急性肝损伤(ALI)大鼠肝脏的作用机制。方法 采用UPLC-Q-TOF/MS法鉴定蓍草中的化学成分,利用TCMSP、CTD和Similarity Ensemble Approach等数据库筛选这些成分的作用靶点,同时在GeneCards、OMIM和NCBI数据库筛选ALI相关靶点,将成分作用靶点与疾病靶点的交集靶点导入STRING构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并使用Cytoscape3.8.2软件进行网络拓扑分析筛选核心靶点,通过DAVID数据库对关键靶点进行GO和KEGG富集分析。通过肝组织HE染色,大鼠血清中肝功能指标、炎症因子水平以及肝组织中氧化应激水平的测定对蓍草防治ALI的药效进行评价,并利用免疫组化的方法对预测的核心靶点及KEGG富集通路结果进行验证。结果 经UPLC-Q-TOF/MS法鉴定出20个成分,网络药理学方法筛选得到上述成分预防治疗ALI的核心靶点104个,GO功能主要与炎症反应、氧化还原酶活性和蛋白酶结合等生物过程相关,KEGG结果主要涉及IL-17、TNF及Toll样受体等信号通路;动物实验结果显示,蓍草预防性给药后能够缓解大鼠肝脏的损伤,显著降低模型组大鼠血清中ALT、AST、TNF-α、IL-6、IL-1β水平和肝组织中MDA的含量,且SOD和CAT在肝组织中的活性显著增强;此外还发现蓍草给药后可上调大鼠肝脏组织中Nfr2蛋白的表达,下调TLR-4、NF-κBp65、keap1和HO-1蛋白的表达。结论 蓍草对四氯化碳诱导的ALI大鼠肝脏具有保护作用,该作用可能与其调节keap1/Nrf2/HO-1和Toll样受体信号通路有关。

基于网络药理学和实验验证研究蓍草解毒利湿功效的作用机制

目的:基于网络药理学与分子对接及体外活性实验探究蓍草解毒利湿功效的作用机制。方法:通过文献查找蓍草的活性成分,使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选蓍草的活性成分,通过TCMSP、GeneCards和比较毒物基因组学数据库(CTD)等数据库检索活性成分作用靶点与疾病作用靶点。将成分作用靶点与疾病作用靶点的共有靶点构建“成分-靶点”网络及蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,同时进行基因本体(GO)富集分析及京都基因和基因组百科全书(KEGG)信号通路分析,最后构建“中药-成分-靶点-通路-疾病-功效”网络图,并进行网络拓扑分析筛选出蓍草干预疾病的活性成分和核心靶点,并通过分子对接和体外实验探究活性成分。结果:蓍草发挥传统功效的活性成分26个和相关靶点247个。网络拓扑分析发现,蓍草主要通过作用前列腺素内过氧化物合成酶(PTGS2)、肿瘤坏死因子(TNF)、胱天蛋白酶3(CASP3)、促分裂原活化的蛋白激酶3(MAPK3)等靶点及相关通路发挥功效作用。分子对接结果显示活性成分与PTGS2、TNF、CASP3等核心靶点均能稳定结合。体外活性实验结果显示绿原酸、芒柄花素等成分均具有良好的抗炎活性。结论:本研究基于蓍草“解毒利湿”的传统功效,针对其治疗扁桃体炎、细菌性痢疾、尿道炎展开研究,结果显示蓍草可能通过绿原酸、芒柄花素等成分作用多个靶点和通路干预疾病发生发展过程,为阐释蓍草发挥功效的作用机制提供参考。

不同精制方法对天麻多糖抗氧化活性的影响

目的探索不同精制方法对天麻多糖抗氧化活性的影响。方法以天麻粗多糖为材料,对比研究了盐析-透析法和Sevag法精制天麻粗多糖的方法,并对比了天麻粗多糖与两种方法精制天麻多糖清除羟自由基(-OH)的能力。结果 Sevag法精制天麻多糖抗氧化活性最低(IC50为11.78 mg/mL),盐析-透析法精制天麻多糖抗氧化活性最高(IC50为3.20 mg/mL),未精制天麻粗多糖抗氧化活性居中(IC50为4.69 mg/mL)。结论盐析-透析法可显著提高天麻粗多糖的抗氧化活性(约提高活性50%)。

响应面分析法优化艾叶中绿原酸提取工艺

目的:探索艾叶中绿原酸的醇提工艺。方法:以乙醇为溶剂,在单因素实验的基础上,选取提取次数、提取温度、提取时间、料液比为自变量,绿原酸的得率为响应值,采用中心组合设计的方法,利用响应面分析方法,模拟得到二次多项式回归方程的预测模型。结果:艾叶中绿原酸醇提工艺的最佳条件为60%乙醇为提取溶剂、料液比1∶13、提取温度63℃、提取次数3次、提取时间60min,在此条件下,绿原酸的得率为0.820%。结论:通过对绿原酸提取工艺的研究,艾叶中绿原酸的提取率达94.04%。

天麻素提取纯化及检测技术研究进展

天麻是一种名贵的中药材,具有镇静、催眠、镇痛作用,用于治疗头痛眩晕、肢体麻木、小儿惊风、癫痫、抽搐、破伤风等病症。天麻中主要的化学成分有天麻素、香草醇、对羟基苯甲醛、香草醛、对羟基苯甲醇等。总结了近年来天麻素提取、纯化技术及检测方法。提取技术包括溶剂回流提取法、酶解提取法、超声提取法、微波提取法及复合提取法。纯化技术包括大孔树脂纯化法、醇沉法以及大孔树脂-醇沉联用法。检测方法有高效液相色谱法、分光光度法、高效毛细管电泳、薄层色谱法、化学法等。

大黄中药制剂治疗慢性肾衰竭的有效性与安全性的网状Meta分析

目的:运用网状Meta分析,比较大黄中药制剂治疗慢性肾衰竭的临床疗效和安全性。方法:计算机检索万方数据库、维普数据库、中国知网、中国生物医学文献服务系统、Embase、PubMed和the Cochrane Library等数据库,纳入大黄中药制剂治疗慢性肾衰竭的临床随机对照试验(对照组采用常规治疗,观察组在对照组基础上采用大黄中药制剂辅助治疗)。检索时限为2015年1月至2022年2月。2名研究者独立进行文献筛选、数据提取并进行偏倚风险评价,采用RevMan 5.4.1、Stata/MP 16、R 3.6.1软件进行数据分析。结果:最终纳入31篇文献,包括2 452例患者,涉及常规治疗、尿毒清颗粒、肾衰宁胶囊/片/冲剂、肾康注射液、大黄附子汤以及肾衰方。网状Meta分析结果显示,肾衰宁胶囊/片/冲剂、尿毒清颗粒、大黄附子汤分别联合常规治疗在提高临床有效率方面的效果较优;肾康注射液、肾衰方、尿毒清颗粒分别联合常规治疗在降低血肌酐水平方面的疗效较优;尿毒清颗粒、肾衰方、肾康注射液分别联合常规治疗在降低尿素氮水平方面的疗效较优。尿毒清颗粒、大黄附子汤、肾衰宁胶囊/片/冲剂、肾康注射液分别联合常规治疗均能减少不良反应的发生。结论:联合应用大黄中药制剂辅助治疗可降低慢性肾衰竭患者的血肌酐、尿素氮水平,提高临床有效率,减少不良反应的发生。慢性肾衰竭患者的临床用药,可根据治疗需要选择大黄中药制剂,以最佳治疗效果及最少不良反应为基准。

芪归多糖的分离纯化及体外抑制肿瘤细胞增殖研究

黄芪-当归配伍为经典补气养血药对,多糖是其重要药效物质。本研究从芪归药对中分离纯化获得6种芪归多糖,CCK-8实验筛选发现其中两种AAPS-1a和AAPS-3a对人结肠癌细胞HCT116和肺癌细胞A549抑制作用显著,对HCT116增殖抑制作用最强,IC_(50)值分别为(47.59±1.3)μg/mL和(18.33±2.5)μg/mL;对A549增值抑制作用次之,IC_(50)值分别为(52.12±1.1)μg/mL和(170.21±2.3)μg/mL。同时,AAPS-1a和AAPS-3a显著诱导HCT116和A549细胞发生凋亡,HCT116细胞凋亡率分别为31.4%和46.5%;A549细胞凋亡率分别为19.3%和33.0%。结构特征分析表明,AAPS-1a和AAPS-3a为分子量分别为7.3×10^(5)、8.5×10^(4)Da的均一多糖。本研究从芪归药对中筛选获得具有肿瘤细胞增殖抑制活性的芪归均一多糖,为阐明芪归多糖抗肿瘤结构基础研究提供重要实验依据。

杠板归的化学成分、药理作用及质量标准研究进展

杠板归是我国的传统中药之一,具有清热解毒、利尿消肿、止咳之功效,其化学成分主要有黄酮类、醌类、萜类、甾体类、苯丙素类、挥发油等。现代药理研究表明杠板归具有保护肝损伤、止咳、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗菌等药理作用,具有良好的临床使用价值和发展前景。现整合国内外近年来的研究文献,从化学成分、药理作用、质量标准研究三个方面综述了杠板归的研究进展,并提出了杠板归研究过程中存在的问题,以期促进杠板归的质量标准提升和为临床应用提供理论依据。

盐杜仲标准汤剂制备及指纹图谱研究

目的制备盐杜仲标准汤剂并建立质量标准。方法制备15批盐杜仲标准汤剂,以松脂醇二葡萄糖苷为指标成分,计算出膏率、指标成分含量和转移率,并建立超高效液相色谱指纹图谱分析方法,使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》进行相似度评价,采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间-串联质谱技术对共有峰进行结构鉴定。结果15批盐杜仲标准汤剂中松脂醇二葡萄糖苷转移率为42.74%~71.43%,平均为57.26%。15批盐杜仲标准汤剂指纹图谱与对照指纹图谱相似度均大于0.95。指纹图谱共有峰9个,确认分别为梓醇、杜仲醇苷、京尼平苷酸、车叶草苷酸、绿原酸、olivil-4’-O-β-D-glucopyranoside、京尼平、松脂醇二葡萄糖苷和紫云英苷。结论本研究建立的盐杜仲标准汤剂制备工艺稳定,指纹图谱方法精密度、稳定性及重复性良好,可为盐杜仲配方颗粒的质量控制提供参考。

盐沙苑子标准汤剂制备和质量标准研究

目的:制备盐沙苑子标准汤剂并建立质量标准。方法:制备15批盐沙苑子饮片标准汤剂,以沙苑子苷为检测指标,计算指标成分含量和转移率,建立超高效液相指纹图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》软件进行相似度评价,采用UPLC-Q-TOF-MS/MS对共有峰进行结构鉴定。结果:盐沙苑子饮片标准汤剂中沙苑子苷转移率范围为42.93%~81.22%,平均转移率为60.10%,15批盐沙苑子饮片标准汤剂指纹图谱与对照指纹图谱相似度均>0.9。指纹图谱共有峰13个,确认13个,分别为芒柄花黄素、杨梅素、萹蓄苷、杨梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、山柰酚3-O-β-D-葡萄糖苷、橘皮素、西伯利亚落叶松黄酮、沙苑子苷、愈创木基甘油-β-阿魏酸醚、毛蕊异黄酮、大麻苷、4 H-1-苯并吡喃-4-酮、3-((6-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)氧基)-5-羟基-2-(4-羟基苯基)-7-甲氧基。结论:该研究建立的盐沙苑子标准汤剂制备工艺稳定,样品来源具有代表性,建立的指纹图谱方法精密度、稳定性及重复性良好,可为盐沙苑子配方颗粒的质量控制提供参考。

基于层次分析法及多指标正交试验优选黄连-吴茱萸药对提取工艺

目的:优选黄连-吴茱萸药对的最佳提取工艺参数。方法:以7种成分(盐酸小檗碱、表小檗碱、黄连碱、药根碱、盐酸巴马汀、吴茱萸碱、吴茱萸次碱)含量为考察指标,采用层次分析法(AHP)、多指标综合评分法结合正交试验,优选黄连-吴茱萸药对的最佳提取工艺参数。结果:优选得到的黄连-吴茱萸药对最佳提取工艺参数为:料液比1∶8(g/mL),提取3次,提取时间为1.5 h。结论:优选的黄连-吴茱萸药对提取工艺合理可靠,重复性良好,可为其后续研究与开发提供参考。

雷公藤多苷及其主要活性成分抑制类风湿性关节炎的作用机制研究进展

雷公藤多苷是从雷公藤Tripterygium wilfordii根部提取出的总苷,其现代制剂雷公藤多苷片在临床上对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)有确切疗效,雷公藤甲素和雷公藤红素是雷公藤多苷的主要活性成分。现代研究发现雷公藤多苷治疗RA的机制包括抑制血管生成、维持调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)和辅助性T细胞17(T helper type 17,Th17)之间的平衡、抑制基质金属蛋白酶表达和促进成纤维样滑膜细胞凋亡等。而其主要活性成分雷公藤甲素和雷公藤红素除了调节Treg和Th17细胞之间的平衡外,还可以通过调节细胞自噬、抑制多条炎症相关信号通路活化等多种途径发挥抑制RA的作用。首先回顾RA的发病机制,并重点对雷公藤多苷及其主要活性成分抑制RA的作用机制进行总结和阐述,以期为有关雷公藤多苷抗RA的研究提供参考。

基于层次分析-熵权法和网络药理学的蓝布正质量标志物研究

该研究采用层次分析(analytic hierarchy process,AHP)-熵权法(entropy weight method,EWM)和网络药理学结合的方式筛选蓝布正的潜在质量标志物。基于中药质量标志物的新理念,采用AHP-EWM对蓝布正的质量标志物进行量化辨识。AHP法用于一级指标(要素层)的权重分析,EWM法用于分析二级指标下(控制层)基于文献和实验的数据。此外通过网络药理学构建蓝布正的“成分-靶点-疾病-功效”关联网络,筛选与蓝布正益气健脾、补血养阴、润肺化痰功效关联性较强的成分。将AHP-EWM和网络药理学结果相结合,综合确定鞣花酸、没食子酸、二聚鞣花鞣质G、二聚鞣花鞣质C共4个成分作为蓝布正的潜在质量标志物。该研究采用AHP-EWM和网络药理学相结合的方式,对蓝布正的潜在质量标志物进行筛选,为中药质量标志物的量化评价与辨识提供思路。

甘草缓大黄峻烈之性的研究进展

药性理论是中医药理论体系的核心组成部分,也是指导临床使用中药和阐释中药作用机制的重要依据。有着"国老"美誉的甘草,因其药性和缓,是中医方剂中发挥调和作用的首选药物;而素有"将军"之称的大黄,其药性峻烈,虽为泻下良药,使用不当却会对机体造成损伤。大黄-甘草临床配伍应用已有数千年历史,甘草以其"调和"之性缓大黄峻烈之力,不仅可缓和大黄的泻下作用,还能减轻其不良反应。基于药性理论阐释了甘草缓大黄峻烈之性的传统认识,综述了大黄-甘草配伍后的物质基础、药物代谢、肠道动力、水液代谢、肠道菌群及免疫调控的现代研究进展,以期为甘草缓大黄峻烈之性的深入研究提供依据,同时为阐明甘草"调和"之性的科学内涵提供研究思路。

基于层次分析-熵权法和指纹图谱的杠板归质量标志物研究

基于层次分析(analytic hierarchy process, AHP)-熵权法(entropy weight method, EWM)、网络药理学、谱效关系法研究杠板归潜在的质量标志物(Q-marker)。应用AHP-EWM对杠板归的质量标志物进行量化辨识,AHP应用于一级指标有效性、可测性和特有性的权重分析,EWM分析各项下有文献及实验数据支撑的二级指标。有效性分析基于文献和网络药理学方法,对杠板归的“成分-靶点-疾病-功效”网络关系进行研究,筛选出与清热解毒、利水消肿、止咳功效关联性最强的成分;可测性分析基于文献研究和HPLC同时测定杠板归中的10个成分,建立杠板归的指纹图谱;特有性分析通过统计杠板归的成分存在于多少种植物中。整合分析确定槲皮素、齐墩果酸、鞣花酸、没食子酸、山柰酚、芦丁、七叶内酯、槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷、熊果酸、原儿茶酸、阿魏酸共11个化合物作为杠板归的潜在质量标志物。通过抗炎活性验证,杠板归中11个化合物具有良好的抗炎活性,说明杠板归11个质量标志物可能是杠板归的功效物质基础。该研究以杠板归为研究对象,基于多层次法研究杠板归的质量标志物,为杠板归的质量控制提供参考依据。