同种异体骨制备保存研究进展

同种异体骨已成为临床上治疗创伤、肿瘤、感染、骨吸收等原因所致骨缺损移植的重要材料。同种异体骨的制备保存一直是骨移植研究的重点。目前主要有低温、深冻或冻干等保存方法,再经灭菌和消除免疫原性等处理.制备出清洁、无菌、无病毒、保留一定生物活性和生物力学特性的同种异体骨。该文就同种异体骨制备保存的研究进展作一综述。

TBL教学法对医学生交流恐惧影响的研究

目的:探讨TBL教学法对医学生交流恐惧的影响。方法:选取杭州医学院59名预防医学专业学生为研究对象,将其分为实验组和对照组。实验组采用TBL教学法,对照组采用传统教学法。采用PRCA-24量表分别在病理学课程开始初和结束后2次测评两组学生的交流恐惧水平,并进行分析比较。结果:教学实施前59名学生的PRCA-24总分为(72.41±10.90),会议分和公众分2项因子评分相对较高,小组分和二人分2项因子评分相对较低;两组学生各项因子评分及总分的差异均无统计学意义(P>0.05)。教学实施后实验组学生小组分和二人分2项因子评分及总分均小于对照组学生,差异均有统计学意义(P<0.05);而两组学生在会议分和公众分2项因子评分上的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:TBL教学法能够明显改善医学生交流恐惧。

二氯化钴诱导A549细胞凋亡及机制的研究

目的探讨二氯化钴(CoCl2)诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的作用机制。方法应用不同浓度CoCl2作用A549细胞不同时间,建立化学性缺氧诱导细胞凋亡的实验模型;应用MTT法检测细胞生长抑制率;应用AO/EB荧光染色法检测细胞凋亡情况;应用Western blotting法检测总Akt(total-Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)和survivin蛋白表达情况。结果 300、400μmol/L CoCl2作用24、36、48h后A549细胞的生长受到不同程度的抑制,并呈现比较明显的剂量和时间依赖关系;通过荧光显微镜下能观察到细胞呈新月形、核质体绿色、染色质浓缩,呈现凋亡显著特征,200、300、400μmol/L CoCl2处理24、48h后的细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01);Western blotting检测结果显示300、400μmol/L CoCl2作用48h后细胞内p-Akt、survivin蛋白表达量较对照组显著减少(P<0.01),300μmol/L CoCl2作用36、48h较对照组能显著下调p-Akt、survivin蛋白表达量(P<0.01),而总Akt蛋白表达量均无显著变化。结论 CoCl2可能是通过抑制p-Akt和survivin的蛋白表达,从而诱导A549细胞凋亡。

牛磺熊去氧胆酸钠抑制小鼠间歇性低氧模型肺组织中内质网应激的激活

目的:探究牛磺熊去氧胆酸钠(tauroursodeoxycholic acid sodium,TUDCA)在间歇性低氧(intermittent hypoxia,IH)模型小鼠肺组织中抑制细胞凋亡的机制。方法:32只C57小鼠随机分为对照组、TUDCA组、IH组和IH+TUDCA组,每组8只。将C57小鼠放入低氧舱中进行IH处理4周(氧气浓度从21%下降到10%,再从10%恢复到21%为一个循环,每个循环的时间为90 s),每天持续8 h。4周IH处理后,Western印迹检测caspase-12和cleaved caspase-3在肺组织中的表达。同时,Western印迹、免疫组织化学和实时定量PCR检测葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP78)和CCAAT/增强结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)的表达。结果:与对照组和TUDCA组相比,IH组小鼠肺组织中caspase-12,cleaved caspase-3,GRP78和CHOP表达明显升高(均P<0.01);而在IH+TUDCA组中,TUDCA能够显著地减少上述蛋白的表达(均P<0.05)。结论:慢性的IH能够导致肺组织中内质网应激介导的细胞凋亡,而TUDCA可以通过抑制内质网应激的激活来降低细胞的凋亡水平。

数字化虚拟人在人体解剖学理实一体教学中的应用

目的:探讨数字化虚拟人在人体解剖学理实一体教学中的应用。方法:将2015级临床医学专业123名学生分成4个教改班,进行"数字化虚拟人"人体解剖学教学。教改实施后,对教改班进行问卷调查。结果:学生普遍认为教改有利于提高综合学习能力,对教改的总体满意度较高。结论:数字化虚拟人在人体解剖学理实一体教学中的应用有一定意义。

选择性环氧合酶-2抑制剂NS398对人肺癌裸鼠移植瘤生长抑制作用研究

目的探讨选择性环氧合酶-2抑制剂NS398对人肺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其机制。方法建立人肺癌A549细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤后20只裸鼠随机分为4组:对照组、NS398低剂量(1.5mg/kg)组、NS398中剂量(3.0mg/kg)组和NS398高剂量(4.5mg/kg)组。各组均采用腹腔注射给药,每周3次,共4周。给药期间每隔7日测量肿瘤体积。最后一次给药次日,处死裸鼠完整剥取肿瘤,测量肿瘤重量并计算抑瘤率。TUNEL法检测各组移植瘤标本细胞凋亡情况,免疫印迹法检测survivin、XIAP和cleaved caspase-3蛋白表达情况。结果 NS398各剂量组肺癌移植瘤生长速度均慢于对照组,各剂量组肿瘤重量显著低于对照组(P<0.01,P=0.000),呈剂量依赖性。各剂量组的抑瘤率分别为30.18%、46.50%和53.87%。TUNEL法结果显示,与对照组比较,NS398各剂量组凋亡指数均显著增加(P<0.01,P=0.000),并呈剂量依赖性。免疫印迹法结果显示,与对照组比较,NS398各剂量组survivin和XIAP蛋白表达量均显著减少,cleaved caspase-3蛋白表达量均显著增加(P=0.000),也呈明显剂量依赖性。结论 NS398能明显抑制人肺癌裸鼠移植瘤的生长,并诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与下调survivin和XIAP蛋白表达,上调cleaved caspase-3蛋白表达有关。

血小板反应蛋白和纤维连接蛋白在糖尿病大鼠肾的表达

目的：研究血小板反应蛋白（TSP-1）、纤维连接蛋白（FN）在链尿佐菌素诱导的糖尿病模型大鼠肾组织的表达改变.方法：选取成年SD雄性大鼠随机分为2组,实验组用链脲佐菌素诱导产生糖尿病模型,正常对照组注射等量枸橼酸钠缓冲液.成模后6周,H-E染色观察肾组织形态学变化,免疫组织化学和实时荧光定量PCR观察各组大鼠肾TSP-1和FN的蛋白和mRNA的表达情况.结果：大鼠成功建立糖尿病模型后6周,免疫组织化学显示糖尿病大鼠肾组织中表达TSP-1和FN蛋白数量较正常对照组上升,差异有统计学意义.同时,实时荧光定量PCR观察到糖尿病大鼠肾组织中TSP-1的mRNA较正常对照组上升,差异有统计学意义,而糖尿病大鼠肾组织中FN的mRNA较正常对照组也有上升,但差异无统计学意义.结论：高血糖状态下,糖尿病大鼠肾组织TSP-1和FN的表达增加,可能是糖尿病肾病发生、发展的一个重要因素.

高职高专医学形态实验学教学中数字化虚拟人的应用

目的:探讨高职高专医学形态实验学教学中数字化虚拟人的应用及成效。方法:将2014级临床医学专业229名学生随机分成4个教改班和4个对照班,教改实施后,比较学生的卷面成绩和总评成绩,并对教改班进行问卷调查。结果:教改班学生的卷面成绩和总评成绩均明显高于对照班,差异有统计学意义;问卷调查结果显示,学生普遍认为教改有利于提高综合学习能力,对教改的总体满意度很高。结论:高职高专医学形态实验学教学中数字化虚拟人的应用取得明显成效。

阻塞性睡眠呼吸暂停患者认知功能障碍的相关研究进展

阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)是一种常见的睡眠障碍疾病,其主要特征是睡眠过程中上呼吸道阻塞导致的间歇性低氧及睡眠片断化[1],不同年龄段均有较高的发病率,通常还会导致认知功能障碍[2]。动物实验发现,OSA小鼠模型中海马神经元突触可塑性降低可能是导致神经认知功能障碍的原因之一,但分子机制仍不明确[3]。

丹参注射液对糖尿病大鼠海马组织中Grp-78和CHOP表达的影响

目的研究丹参注射液对糖尿病大鼠海马组织中葡萄糖调节蛋白-78(Grp-78)以及生长停滞和DNA损伤损伤基因153(CHOP/GAD153)表达的影响。方法将30只SD大鼠按照随机数字表分为对照组、糖尿病组和丹参注射液组,每组各10只。糖尿病组、丹参注射液治疗组的大鼠采用单次腹腔注射链脲佐菌素65mg/kg诱导糖尿病模型。48h后,丹参注射液治疗组每天腹腔注射丹参注射液1ml/kg,对照组和糖尿病组腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。各组均连续注射6周,随后测定各组大鼠体重和血糖。采用水迷宫检测依赖海马的学习记忆能力,超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒检测海马组织匀浆中SOD活性以及MDA含量,免疫印迹检测海马组织中cleaved caspase-3蛋白表达,免疫组化检测海马组织中Grp-78和CHOP蛋白表达。结果与对照组相比,糖尿病组大鼠体重减轻,血糖升高(P<0.01),水迷宫检测中的逃避潜伏期明显变长(P<0.01),穿越平台次数显著增多(P<0.01),同时,海马组织中SOD活性降低(P<0.01),MDA含量、Grp-78、CHOP和cleaved caspase-3表达均升高(均P<0.01)。而与糖尿病组相比,丹参注射液治组大鼠体重增加,逃避潜伏期明显减短,穿越平台次数显著减少,SOD活性明显提高(P<0.01),MDA含量、Grp-78、CHOP以及cleaved caspase-3表达均减少(均P<0.01)。结论丹参注射液能够抑制糖尿病大鼠海马组织中内质网应激的激活,从而减少神经元的凋亡,提高大鼠的学习记忆能力。

雷帕霉素抑制糖尿病大鼠肾Akt/NF-κB信号通路介导的炎症反应的机制研究

该文探讨了雷帕霉素在抑制糖尿病大鼠肾脏中炎症反应的分子机制。30只SD大鼠随机分为三组:对照组、糖尿病组、雷帕霉素治疗组(1 mg/kg/d)。采用一次腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,65 mg/kg)制备糖尿病模型。注射STZ 2 d后,雷帕霉素治疗组于皮下注射雷帕霉素,对照组和糖尿病组注射等量的生理盐水。实验结果表明,造模6周后,糖尿病组大鼠血清中肌酐和尿素氮含量增高,而雷帕霉素能够明显降低肌酐和尿素氮的表达水平(P<0.05)。苏木精–伊红染色显示,糖尿病大鼠中肾小囊变狭,基底膜完整性受损,肾小管上皮细胞肥大。同时,在糖尿病大鼠中,肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)及核转录因子-κB p65(nuclear transcription factor-κB p65,NF-κB p65)的表达均上升。而雷帕霉素能够改善肾病理结构,并降低TNF-α、IL-1β、IL-6、p-Akt和NF-κB p65的表达。雷帕霉素能够缓解糖尿病大鼠肾功能的损伤,而这与抑制Akt/NF-κB信号通路介导的炎症反应有关。

二氮嗪对低温保存后大鼠肾脏的GRP78和CREB2表达的影响

为研究二氮嗪(diazoxide,DE)在大鼠肾脏低温保存的作用及其可能的机制,48只大鼠随机分为对照组(单纯Celsior液冷保存)、实验组(Celsior液中含20μmol/L DE),两组均分别冷保存0、24、48 h。观察肾脏在低温条件下分别保存0、24、48 h后,肾组织丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性以及葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulated protein-78,GRP78)和环磷腺苷反应元件结合蛋白2(cyclic AMP response element bindingprotein-2,CREB2)表达的变化。结果表明,与Celsior组相比,DE组的MDA含量在24 h、48 h这两个时间段明显降低(P<0.01,P<0.05),SOD的酶活性在48 h时间段里明显升高(P<0.05)。免疫组化和Western印迹结果显示,实验组中GRP78和CREB2在24 h、48 h这两个时间段表达都高于对照组(P<0.05)。结果表明含DE的Celsior液较单纯Celsior液对低温保存的离体大鼠肾脏有更好的保护作用,其机制可能是启动内质网应激来保护肾脏功能。

白藜芦醇调控细胞自噬通路改善糖尿病合并心肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的研究白藜芦醇对糖尿病合并心肌缺血再灌注损伤大鼠自噬通路表达及心肌梗死面积的影响,进一步明确其药理机制。方法选取100只6~8周龄清洁级(SPF级)雄性SD大鼠为研究对象,随机分为4组,每组25只,分别为对照组、模型组、白藜芦醇组、三甲基腺嘌呤(3-MA)组,4组均采用高脂喂养结合腹腔注射链脲佐菌素法制备糖尿病模型,模型制备成功者给予药物干预。白藜芦醇组以10 mg/(kg·d)的白藜芦醇灌胃,3-MA组在白藜芦醇组的基础上尾静脉注射0.015 g/(kg·d)自噬抑制剂3-MA,对照组和模型组给予等量生理盐水刺激;7 d后,除对照组外,均采用冠状动脉结扎法制备心肌缺血再灌注模型。采用Med Lab生物信号采集处理系统测定药物干预前(基线值)、心肌缺血前、心肌缺血30 min和再灌注2 h的血流动力学数据,采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色实验测定心肌梗死面积,采用免疫蛋白印迹实验测定心肌组织自噬标志物蛋白表达。用SPSS 19.0统计软件进行t检验、方差分析和χ~2检验。结果各组大鼠的左心室收缩压(LVSP)、左心室等容收缩期(+)心室压力上升的最大速率(+dp/dt)及左心室等容舒张期(-)心室压力上升的最大速率(-dp/dt)基线值差异均无统计学意义(P>0.05);组别因素与时间因素对大鼠的LVSP、+dp/dt及-dp/dt水平均有影响(P<0.05),且组别与时间之间无交互作用(P>0.05)。组间比较结果显示,心肌缺血前,白藜芦醇组LVSP、+dp/dt及-dp/dt水平较其他各组有所升高;心肌缺血30 min和再灌注2 h,模型组和3-MA组LVSP、+dp/dt及-dp/dt水平低于对照组,白藜芦醇组LVSP、+dp/dt及-dp/dt水平高于模型组和3-MA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。组内比较结果显示,心肌缺血前,白藜芦醇组LVSP、+dp/dt及-dp/dt水平高于基线值,差异均有统计学意义(P<0.05),其他各组与基线值比较,差异均无统计学意义(P>0.05);心肌缺血30 min和再灌注2 h时,模型组、白藜芦醇组和3-MA组LVSP、+dp/dt及-dp/dt水平低于心肌缺血前,差异均有统计学意义(P<0.05),对照组的LVSP、+dp/dt及-dp/dt水平与心肌缺血前比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。再灌注2 h后,模型组磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)和Beclin 1蛋白表达水平高于对照组,梗死面积增大;白藜芦醇组PI3K、LC3-Ⅱ和Beclin 1蛋白表达水平高于模型组,但梗死面积减小;3-MA组PI3K、LC3-Ⅱ和Beclin 1蛋白表达水平低于白藜芦醇组,梗死面积增大,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论白藜芦醇能够通过促进自噬来改善糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤,减小梗死面积。

白藜芦醇对2型糖尿病合并缺血再灌注大鼠模型氧化应激和心肌病理的影响

目的观察白藜芦醇对糖尿病合并缺血再灌注大鼠模型血清氧化应激标志物和心肌病理的影响。方法将100只大鼠随机分4组,各组25只,分别为对照1组、对照2组、模型组和白藜芦醇组。对照1组正常饲养,其他各组均采用高脂饮食合并腹腔注射30 mg·kg^(-1)链脲佐菌素制备糖尿病模型。模型制备成功者纳入下一步实验。白藜芦醇组以每天10 mg·kg^(-1)的白藜芦醇灌胃;1周后,模型组和白藜芦醇组采用冠状动脉结扎法制备缺血再灌注病理模型。实时监测血流动力学,再灌注2 h后取腹腔静脉血,采用ELISA试剂盒测定SOD、MDA和GSH-Px水平;同时取心肌组织,采用TTC染色观察心肌梗死面积,采用TUNEL染色法观察心肌细胞凋亡率,采用枸橼酸铅染色法观察自噬小体。结果对照2组、模型组和白藜芦醇组的模型制备成功率分别为68%、72%和68%,与对照1组相比,这3组在高脂饮食的第4周,体质量、血糖水平及胰岛素抵抗指数均明显升高(P<0.05)。与对照2组相比,模型组GSH-Px、SOD和MDA水平升高。与模型组相比,白藜芦醇组GSH-Px、SOD和MDA水平降低,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照2组相比,模型组心肌梗死面积增大,心肌细胞凋亡率升高;与模型组相比,白藜芦醇组心肌梗死面积减小,心肌细胞凋亡率降低,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。枸橼酸铅染色后,对照2组大鼠的心肌组织可见少数自噬小体,模型组数量增多,白藜芦醇干预后进一步增多。结论白藜芦醇对糖尿病合并缺血再灌注大鼠模型氧化应激反应、心肌细胞凋亡及细胞自噬均可能存在调节作用,可为其药理机制的深入研究提供一定的依据。

四氢生物喋呤改善大鼠心脏冷保存12小时的效果

四氢生物喋呤（BH4）是一氧化氮合酶（NOS）的重要辅助因子，细胞内BH4的水平与一氧化氮（NO）的合成密切相关，而NO参与机体多种生理功能的调节，内源性NO可减轻心脏缺血再灌注损伤。

孕期吸入异氟醚对子代大鼠海马神经元突触可塑性的影响

目的 探讨孕期吸入异氟醚对子代大鼠海马神经元突触可塑性的影响.方法 孕14 d的SD大鼠10只,体重220～250 g,采用随机数字表法,将孕鼠随机分为对照组和异氟醚组,每组5只.对照组大鼠每天单纯机械通气2 h,异氟醚组大鼠每天吸入1.3%异氟醚2 h,至大鼠分娩.子代大鼠出生后4周,采用Morris水迷宫实验测定认知功能,测定结束后处死子代大鼠取脑,分离海马,采用透射电镜观察海马CA1区神经元突触的超微结构,计数海马神经元突触数量,测定突触后致密物质厚度.结果 与对照组相比,异氟醚组子代大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,海马神经元突触数量减少,突触后致密物质厚度降低（P〈0.05）.结论 孕期吸入异氟醚可通过抑制子代大鼠海马神经元突触的可塑性而降低其认知功能.