重组人肝细胞生长因子激活因子质粒的构建、表达和功能研究

背景：肝细胞生长因子激活因子（HGFA）是活化单链前体HGF（pro—HGF）成为有生物学功能的HGF的关键酶．在受损组织器官的修复和再生中发挥重要作用。目的：制备rhHGFA—Fc融合蛋白并证实其具有肝细胞保护功能。方法：采用基因重组技术构建表达人源化HGFA成熟肽段与人IgGFc段融合蛋白的载体，以脂质体介导法转染人胚肾293细胞。纯化293细胞表达产物，以蛋白质印迹法鉴定纯化蛋白（rhHGFA—Fc融合蛋白）及其对pr0．HGF的酶切活性，以流式细胞术检测融合蛋白介导的肝细胞凋亡抑制作用。结果：SDS—PAGE显示转染重组质粒的293细胞总蛋白纯化产物在62kDa处显示单一蛋白条带。蛋白质印迹法结果显示纯化的rhHGFA-Fc融合蛋白能与抗hHGFA单克隆抗体发生特异性反应，并将pro-HGF酶切为仅链和p链，酶切活性呈剂量依赖性，半效酶切活性（IC50）为8．22nmol／L；流式细胞术结果显示融合蛋白通过激活pro．HGF发挥其抑制肝细胞凋亡的作用。结论：293细胞表达的rhHGFA—Fc融合蛋白纯度高、酶切活性强，可高效激活pro—HGF，对于肝组织严重损伤，特别是肝硬化基础上肝损伤的治疗具有潜在价值。

雌性侏儒症大鼠繁殖性能初探

目的初步探讨自发侏儒症Wistar大鼠(spontaneous dwarfism Wistar rat,SDWR)的繁殖性能及其低下的原因。方法SDWR大鼠组和Wistar大鼠对照组分别选12周龄雌鼠及雄鼠各50只,按1♀∶1♂进行交配,测定SDWR、Wistar大鼠第1~4胎妊娠率、窝产仔数、初生窝重、离乳率、离乳重;选取8周龄雌性SDWR大鼠和5周龄雌性Wistar大鼠各20只,阴道脱落细胞涂片法评估两组大鼠性成熟期及动情周期;6~8周龄雌性SDWR及Wistar大鼠各20只,分别采用200 U/kg、300 U/kg、400 U/kg剂量的孕马血清促性腺激素+人绒毛膜促性腺激素腹腔注射进行超排卵实验,比较促排卵效果;6~8周龄Wistar、SDWR及SDWR超排组各20只,通过HE染色分析比较卵巢组织形态改变。结果SDWR组1~4胎妊娠率、窝产仔数、初生窝重、离乳重及离乳率显著低于Wistar组(P<0.05);SDWR组性成熟[(12.15±0.81)周]比Wistar[(8.05±0.76)周]明显推迟;Wistar组保持4~5 d规律的动情周期,而SDWR出现动情周期延长及紊乱,7~8d一个周期,动情期缩短,动情间期延长;超排结果显示:SDWR组卵细胞数量均显著少于Wistar组(P<0.01)。卵巢组织HE染色结果显示,Wistar组卵巢各级卵泡生长活跃,颗粒细胞及黄体结构正常,而SDWR组卵巢总卵泡及各级卵泡数量均明显减少,卵巢皮质纤维化,颗粒细胞排列紊乱。结论侏儒症SDWR大鼠繁殖率低下可能与性成熟晚、动情周期延长及紊乱、卵巢功能减退有关。

83例肾功能衰竭患者血、尿D二聚体检测分析

慢性肾功能衰竭(CRF),是指原发性或继发性慢性肾脏疾病所引起的、慢性肾功能减退及各种代谢紊乱和临床症状组成的综合症。其病情发展过程中,均有高凝——粘滞状态参与。本文选择了与微血栓纤溶指标-血、尿D二聚体测定,作为探讨CRF的病理与临床疗效、预后的评估指标。 1

氢醌致DNA甲基化改变及可能机制

苯是一种广泛使用的工业原料,同时是一种确定的遗传毒性致癌物,主要由其活性代谢产物——氢醌发挥毒性作用。氢醌本身普遍应用于黑白显影剂、橡胶防老剂、稳定剂和抗氧剂。氢醌可引起机体多系统毒性损伤,长期试验表明氢醌还是一种致癌剂。近年来有文献报道氢醌暴露可导致DNA甲基化水平发生改变,本文综述了氢醌可能通过调节DNA甲基化转移酶的活力、氧化应激损伤干扰、DNA损伤修复蛋白调控以及其他表观遗传学修饰的参与等影响DNA甲基化状态,旨在为预防氢醌乃至苯中毒提供参考依据。

MicroRNA-7在DNA损伤修复中研究进展

微小RNA（microRNA,miRNA）是一类存在于真核生物中的非编码小RNA,由大小约19~24个核苷酸组成,通过结合在靶基因mRNA的3＇非编码区,降低mRNA稳定性或抑制翻译影响蛋白的表达,在转录后水平参与众多生理病理过程。日常生活和职业环境中有毒有害因素可通过多种途径进入人体产生遗传毒性,直接或间接引起DNA损伤。