桂枝浸出物对小鼠巨噬细胞内α-TNF基因表达的影响

目的：检测小鼠应用桂枝浸出物后腹腔巨噬细胞内ＴＮＦα－ｍＲＮＡ含量的变化。方法：雌雄小鼠随机分组，口服给药后制备巨噬细胞涂片。克隆人ＴＮＦ－ＤＮＡ的ＰＧＥＭ－１质料转化Ｅｃｏｌｉ ＪＭ１０３，选择培养扩增。随机引物法制备地高辛标记的探针，利用原位杂交技术检测巨噬细胞内ＴＮＦα－ｍＲＮＡ的表达。结果：抗肿瘤中草药桂枝等浸出物可增强小鼠腹腔巨噬细胞内ＴＮＦα－ｍＲＮＡ表达。

心力衰竭患者血浆细胞间黏附分子-1的测定及临床意义

目的 探讨充血性心力衰竭患者血浆可溶性细胞间黏附分子 1 (sICAM 1 )的水平与心功能状态的关系。方法 采用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定 74例充血性心力衰竭患者sICAM 1水平 ,并与 30例健康人作对照。结果 心力衰竭患者血浆sICAM 1水平较对照组明显升高 ,有显著性差异 (P <0 .0 1 )。sICAM 1水平随着心功能不全的加重而升高 ,心功能Ⅳ级高于Ⅲ级 ,Ⅲ级高于Ⅱ级 (P <0 .0 1 )。经治疗后心力衰竭患者血浆sICAM 1浓度明显降低。结论 sICAM 1在充血性心力衰竭的发病机制中起重要作用 ,sICAM 1水平可作为评价心力衰竭患者心功能状态和疗效的指标之一。

联合检测尿HAase和NMP-22活性水平在膀胱癌诊断和手术后复发的研究

目的探讨尿透明质酸酶(HAase)和细胞核基质蛋白22(NMP-22)活性水平联合检测对膀胱癌诊断和术后监测的意义。方法取自60位膀胱癌患者术前及术后尿液标本,取自对照组40人尿液用酶联免疫标记技术检测HAase和NMP-22。结果患者术前组中HAase和NMP-22水平是术后组的1.5倍(P<0.05),是对照组的2-4倍(P<0.05);HAase、NMP-22联合检测对膀胱癌诊断有较高的灵敏度(95.1%)、特异度(80.9%)和精确度(90.3%)。结论 HAase和NMP-22联合检测是诊断膀胱癌和手术评估的一种非侵入性、高灵敏度、高特异度的检测方法。

sPLA2cDNA表达载体的选择和亚克隆

目的：选择适当的载体，启动Ｃａ＾２＋依赖分泌型磷脂酶Ａ２（ｓＰＬＡ２）ｃＤＮＡ的表达，为进一步研究各种因素对该酶活性的影响奠定基础。方法：首先从ｓＰＬＡ２－ｐＧＥＭ７重组体（这一重组体不能在转染的真核细胞中表达）获得人ｓＰＬＡ２ｃＤＮＡ，克隆该片断进入中间载体ＢＳＳＫ（使ｓＰＬＡ２ｃＤＮＡ两端出现ＸｂａＩ、Ｈｉｎｄ３酶切位点），选择ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｓＰＬＡ２－ＢＳＳＫ重组体进行扩增。

Northern杂交法分析转染的胞苷酶

目的：研究人胞苷转移酶（ＣＴ）ｃＤＮＡ在鼠巨噬细胞中的表达。方法：按照Ｔ．Ｍａｎｉａｔｉｓ等人的方法人转染的巨噬细胞中提取总ＲＮＡ，电泳分离ＲＮＡ，转移ＲＮＡ至尼龙膜并固定，制备３２ｐ标记的胞苷转移酶ＤＮＡ探针，杂交及放射性自显影。结果：对照组无表达，同类转染的细胞均有不同程度的表达。结论：制备探针前应用电泳法确定ＣＴｃＤＮＡ片段的浓度比紫外光吸收法更准确适用。