武陵山区巴东县中药材种植地土壤肥力的初步分析

检测了巴东县野三关镇大河坝、穿心岩、招凤台、白岩子村的29个中药材种植地土样的肥力特征,结果表明:调查区中药材种植地以酸性土壤为主;有机质、速效钾和全氮含量丰富,达到Ⅰ级水平的土样分别占总样的100%、96.6%、51.7%;钙含量均达到I级水平;总磷含量较高,而总钾含量较低;硼含量均处于Ⅴ级水平;硒含量丰富;不同村的土壤肥力差异较小,但不同中药材种植地的土壤肥力差异较大.该结果可为该地区中药材种植的科学培肥工作提供参考.

枝状枝孢霉MD2的Unigene A03231的克隆及原核表达分析

为研究真菌紫杉醇合成相关基因的功能,从产紫杉醇真菌枝状枝孢霉MD2中克隆了Unigene A03231的DNA和c DNA全长序列(918 bp).结果表明:该基因不含内含子,其编码产物含305个氨基酸,与短链脱氢酶/还原酶一致性为64%,预测蛋白分子量为33071.5 Da,不存在信号肽,含有2个跨膜结构.Unigene A03231以单拷贝形式存在于基因组,在0~30 h内其表达水平随茉莉酸甲酯诱导表现为先升高后降低.构建了该基因的原核表达菌株,初步优化了其在大肠杆菌BL21中的诱导表达条件为:诱导温度28℃,IPTG浓度0.6 mmol/L,诱导时间8 h.为深入分析该基因的催化功能奠定了基础.

武陵山区巴东县野三关镇高山蔬菜种植地的土壤肥力分析

研究分析了武陵山区恩施州巴东县野三关镇5个村的代表性高山蔬菜种植地的肥力特征,结果表明:调查区为酸性土壤,土壤肥力充足;有机质、有效钾、全氮和钙含量处于Ⅰ级的土样分别占总土样数的43.30%、78.33%、93.33%和98.33%;磷和镁含量均在Ⅰ级以上;硼含量均高于Ⅴ级;硒含量均大于0.4 mg/kg,属富硒土壤.根据研究结果,建议长期跟踪检测土壤肥力,科学合理培肥,并且建议当地农民发展富硒特色高山精品蔬菜产业.

紫杉醇合成相关候选基因A02725的克隆及转基因菌株的构建

真菌紫杉醇合成相关基因的功能研究是揭示真菌紫杉醇合成机制的关键。为了揭示产紫杉醇内生真菌枝状枝孢霉MD2的候选基因A02725对宿主紫杉烷类合成的作用,本研究克隆了候选基因A02725的DNA全长序列(1 524 bp);生物信息学预测结果表明该基因编码蛋白为亲水蛋白,含508个氨基酸,无信号肽和跨膜结构,与牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPPS)具有79%的一致性;进一步构建该基因的超表达载体并转化枝状枝孢霉MD2,通过抗性筛选以及Southern blot检测,共获得27株转基因菌株,其中5株转基因菌株的外源基因是以单拷贝方式整合。该结果为深入分析超表达候选基因A02725对宿主紫杉烷类合成的影响奠定了基础。