培养C2C12成肌细胞并分化成骨骼肌细胞,取细胞培养液通过柱前衍生化,将葡萄糖与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)络合,使用Unisphere Aqua C18色谱柱(2.0mm×150mm,粒径3.5μm)分离衍生化产物,流动相为V(10mmol/L乙酸铵(pH=5.30))∶V...培养C2C12成肌细胞并分化成骨骼肌细胞,取细胞培养液通过柱前衍生化,将葡萄糖与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)络合,使用Unisphere Aqua C18色谱柱(2.0mm×150mm,粒径3.5μm)分离衍生化产物,流动相为V(10mmol/L乙酸铵(pH=5.30))∶V(乙腈溶液)=78∶22,流速为1.0mL/min,检测波长为245nm,进样量为20μL,柱温30℃.葡萄糖质量浓度在100~500mg/L范围内具有良好的线性,相关系数0.998 5;精密度、重复性良好,平均回收率100.26%,RSD值为1.02%.地塞米松孵育处理的骨骼肌细胞在胰岛素刺激下对葡萄糖的摄取量与对照组相比显著减少.结果显示:柱前衍生化高效液相色谱法可用于评价骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型,为后续胰岛素抵抗机制探讨及药物筛选打下基础.展开更多
文摘培养C2C12成肌细胞并分化成骨骼肌细胞,取细胞培养液通过柱前衍生化,将葡萄糖与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)络合,使用Unisphere Aqua C18色谱柱(2.0mm×150mm,粒径3.5μm)分离衍生化产物,流动相为V(10mmol/L乙酸铵(pH=5.30))∶V(乙腈溶液)=78∶22,流速为1.0mL/min,检测波长为245nm,进样量为20μL,柱温30℃.葡萄糖质量浓度在100~500mg/L范围内具有良好的线性,相关系数0.998 5;精密度、重复性良好,平均回收率100.26%,RSD值为1.02%.地塞米松孵育处理的骨骼肌细胞在胰岛素刺激下对葡萄糖的摄取量与对照组相比显著减少.结果显示:柱前衍生化高效液相色谱法可用于评价骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型,为后续胰岛素抵抗机制探讨及药物筛选打下基础.
