草莓果实中新型杀螨剂乙唑螨腈和腈吡螨酯的残留量测定

本研究首次建立了草莓中新型杀螨剂乙唑螨腈、腈吡螨脂残留量测定的超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),筛选出净化方式为QuEChERS净化管(25 mg PSA+25 mg C18),采用超高效液相色谱-串联质谱仪检测,外标法定量。结果表明,草莓中乙唑螨腈、腈吡螨脂药物残留量在2~200μg·L^(-1)范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999 3,定量下限均为4.0μg·kg^(-1),加标回收率分别为87.0%~103.0%、86.4%~95.0%,相对标准偏差均小于5%。本方法提取及净化过程方便快捷,基质效应影响小,准确度高。应用本方法进行了草莓果实乙唑螨腈、腈吡螨脂残留的检测,30%悬浮剂3 000倍液间隔10 d施药2次后的原始沉积量分别为0.737、0.771 mg·kg^(-1),15 d后的残留量为0.045、0.037 mg·kg^(-1)。本方法适用于草莓乙唑螨腈、腈吡螨脂残留量的快速准确检测,为草莓质量安全风险评价提供技术支撑。

白菜EST-SSR信息分析与标记的建立

数量迅速增加的EST为开发新的SSR标记提供了宝贵的资源。本研究对4584条白菜EST进行了搜索,共检索出474个SSR,检出率为10·3%,包括40种重复基元。其中二核苷酸和三核苷酸重复单元的EST-SSR占主导地位,二者出现的频率基本相近,占总SSR的近83%;其它重复类型所占比例均不足5%。GA和GAA是二、三核苷酸中的优势重复类型,分别占二、三核苷酸重复类型的71·5%和37·5%。设计了15对EST-SSR引物,在合适的PCR反应体系下,以构建EST的白菜自交系A的DNA为模板,对设计的EST-SSR引物进行筛选,发现15对EST-SSR引物都能扩增出产物。进一步用这些可扩增的引物对28个白菜品种进行PCR扩增,发现7对引物显示多态性,占引物总数的46·7%。此结果表明,根据EST建立EST-SSR标记是一条简便而又有效的途径。

白菜的EST标记及其对油菜的通用性

根据白菜的表达序列标签,设计了28对引物。在对引物、dNTP、MgCl2的浓度及退火温度等参数进行测试后,建立了合适的PCR反应体系。在此反应体系下,以构建EST的白菜自交系A的DNA为模板,对设计的引物进行了筛选,发现有18对引物能对白菜DNA扩增出产物。用筛选出来的引物分别对17个白菜类品种进行PCR扩增,用琼脂糖凝胶电泳分析其产物的多态性,发现10对引物有多态性,占筛选引物的55.6%。为检测白菜EST标记的通用性,进一步利用设计的引物对不同油菜品种的DNA进行PCR扩增。在检测的28对引物中,共有24对引物能扩增出产物,占引物总数的85.7%,显示多态性的引物为18对,占引物总数的64.3%.。在对白菜DNA能扩增出产物的18对引物中,对油菜完全可用,且有13对引物产生多态性。而在那些对白菜未扩增出产物的10对引物中,也有6对能扩增出产物,其中5对显示多态性。结果证明,通过EST建立分子标记是可行的,而且这种标记对近缘物种是可通用的。

基于SSR和SCAR标记的草莓主栽品种指纹图谱构建及亲缘关系分析

利用RAPD、EST-SSR和SCAR标记对南方主栽的26个草莓品种进行指纹图谱及遗传多样性分析,结果表明:已公开的24对引物中有22对能扩增出产物,其中有18对扩增出多态性,占可用引物的81.8%。选用7对作为核心标记引物,构建出其中23个品种的特异指纹图谱,使它们相互区分。并根据扩增带型进行聚类分析,绘制成南方主栽草莓品种亲缘关系树状图,为目前已经趋于混乱的南方引进和主栽草莓品种的鉴定提供有效的技术支撑。

简单重复序列标记和序列相关扩增多态性标记在草莓遗传多样性分析中的比较

利用简单重复序列(simple sequence repeat, SSR)和序列相关扩增多态性(sequence related amplifiedpolymorphism,SRAP)标记分析了来自国内外43个草莓品种的遗传多样性,并比较了这2种分子标记的效果差异。结果表明:30对SSR引物平均多态性位点数为6.43个,每个位点的平均多态性信息含量(polymorphisminformationcontent,PIC)值为0.6284;20个SRAP引物组合平均多态性位点数为14.30个,PIC值高达0.9114。基于SSR标记的聚类结果与基于SRAP标记的聚类结果的相关系数为0.817,呈显著水平。而SSR标记、SRAP标记分别与SSR+SRAP联合标记的相关系数为0.938和0.966,都达到极显著水平。SSR和SRAP标记都能较好地分析草莓遗传多样性,其中SRAP标记的效果略优于SSR标记,而SSR+SRAP联合标记分析则能更好地评估种质的遗传多样性和亲缘关系。

白菜EST-SSR标记的通用性

EST-SSR是从表达序列标签(expressedsequencetag,EST)中开发的新型简单序列重复(simplesequencerepeat,SSR)标记。根据白菜EST设计了15对SSR引物,对白菜、油菜、玉米、高粱、水稻和茶树等进行了PCR,研究了白菜的EST-SSR标记在不同物种间的通用性。所设计的引物对不同白菜品种、近缘种油菜和远缘种玉米、高粱、水稻和茶树的扩增成功率分别为100%、93.3%、80%、93.3%、93.3%和86.7%。在15对引物中,有11对在远缘种中都有扩增产物,而且一些引物可显示多态性,多态性引物分别占了可扩增引物的33.3%、28.6%、28.6%和61.5%。这些结果表明,白菜EST-SSR引物具有较高的通用性,这对于比较基因组学研究有重要意义。

草莓炭疽病抗性室内快速鉴定方法研究及应用

【目的】为了研究建立我国草莓品种炭疽病抗性快速、稳定的室内测定方法,【方法】以有抗性差异的4个品种草莓苗为材料,根据田间鉴定结果,对胶胞炭疽菌孢子液浓度、接种部位、苗龄、接种后调查时间进行研究,形成草莓炭疽病抗性室内快速鉴定方法。此方法也在鉴定草莓杂交F1材料的炭疽病抗性上进行了应用。【结果】6叶期草莓苗的离体叶柄和匍匐茎都可以作为炭疽病抗性室内快速鉴定的材料,接种适宜孢子量2×105个·mL-1,发病调查时间为7 d后。对19个草莓品种或自交材料进行炭疽病抗性室内快速鉴定,其结果与田间观察结果基本相符。【结论】采用室内快速鉴定方法结果准确、操作简单,可全年进行,将大大加快品种选育和遗传研究的进程。

不同杀菌剂和诱导剂对草莓病害及产量的影响

为研究不同杀菌剂和免疫诱导剂对草莓主要病害和产量的影响,以草莓红颊品种为材料,采用双因素裂区试验设计,设诱导剂为主区,分清水对照(A0)和保康灵1号(A1)、仟禾福(A2)3种处理,设杀菌剂为副区,分清水对照(B0)、氢氧化铜(B1)、代森联(B2)、氯溴异氰尿酸(B3)、春雷霉素(B4)5种处理。结果表明:杀菌剂和诱导剂对草莓灰霉病有一定的防效。杀菌剂B2代森联相对防效最好,达18.8%。诱导剂A1和A2处理后病情指数分别降低了36.1%和10.7%。叶片性状观察发现,诱导剂对叶片长度、宽度和叶绿素含量都有一定程度的提高,但杀菌剂的效果不明显。A1处理后叶片净光合速率明显提高,产量提高16.6%,效果好于仟禾福。因此,草莓生产上使用代森联杀菌后结合诱导剂保康灵1号的使用,将明显提高草莓的产量和抗性。

基于RAPD和EST-SSR标记的秀珍菇菌株聚类分析

本研究利用RAPD标记和EST-SSR标记对10个不同来源的秀珍菇菌株进行聚类分析。200条RAPD引物中127条有扩增产物。引物可用率为63.5%。从NCBI数据库中下载秀珍菇及相近侧耳属食用菌EST序列2167条,聚类比对后得到全长为713.541 kb的非冗余EST 1442条,搜寻后得到的29个EST-SSR全部设计引物,其中26对引物(89.7%)显示多态性。根据17条RAPD核心引物和10对EST-SSR核心引物的扩增结果,对10个秀珍菇菌株进行了RAPD标记、EST-SSR标记及二者相结合的聚类分析。3种分析结果相近,且与菌丝、子实体生长特性分析结果相统一—10个供试菌株区分为5组:1～4号菌株为一组,6号和7号菌株为一组,8号和9号菌株为一组,5号和10号菌株各自为一组。

油菜素内酯对夏季草莓育苗素质及耐逆性的影响

在夏季高温条件下,对4个草莓品种幼苗进行大田喷施油菜素内酯,研究其对草莓育苗素质及耐逆性的影响。结果表明,油菜素内酯提高了章姬草莓苗素质,表现出高繁殖系数和根系活力,而其余品种未见明显变化。油菜素内酯能够显著降低红颊和章姬品种叶片细胞质膜透性和MDA含量,提高其抗逆能力,而其余品种未见明显变化。油菜素内酯提高了红颊和章姬草莓的APX活性,但也明显降低了红颊、丰香和甜查理草莓的CAT活性。因此,油菜素内酯可以提高抗逆性较差草莓品种章姬和红颊草莓苗的耐逆性。

不同CO_2加富方法对低温弱光条件下设施栽培草莓的影响

选用钢瓶液化CO2、化学反应CO2和吊袋CO23种常用CO2加富方式,研究不同CO2加富方法对东南沿海一带冬季低温弱光条件下设施栽培草莓红颊的影响。结果表明,采用钢瓶液化CO2加富,棚内CO2分布较均匀,草莓各指标均显著增长并高于其它2种处理。具体表现为:与对照相比,叶长、叶宽和叶厚分别增加55.6%、28.8%和97.6%;叶片叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量分别提高17.0%、28.1%和19.3%,叶绿素a与叶绿素b比值降低8.3%;可溶性固形物含量平均增加15.6%,硬度也有一定程度的增加;第1批果实单果重增加了22.5%,大果比例增加了50.2%,第2批果实的增加效应远不如第1批;总产量增加10.5%,总产值增加31.7%,投入产出比为1∶11.6。因此,钢瓶液化CO2加富是最适于田间草莓CO2加富的方法。

育苗期药剂处理对设施栽培‘红颊’草莓开花结果性状的影响

针对浙江省设施栽培‘红颊’草莓出现的花而不实问题,研究不同种苗来源和育苗期药剂处理对草莓花粉活力和产量的影响。结果表明:育苗期喷施200 mg/L多效唑,在草莓苗定植成活率、花序数、产量、大果率和花粉活力表现上,效果好于喷施300 mg/L多效唑,与对照相比,除了大果率其他指标都有所降低;在2个浓度多效唑处理15 d后加施20 mg/L赤霉素,各项指标均明显提升,尤其200 mg/L多效唑加20 mg/L赤霉素处理后,成活率和大果率显著提高;83 mg/L烯唑醇无论加施20 mg/L赤霉素与否,都不利于草莓的开花结果。丛生苗和疑似小叶苗花粉活力非常低,畸形率极高,几乎没有商品果,这可能是‘红颊’草莓花而不实现象的主要因素。建议在育苗后期采用200mg/L多效唑加20 mg/L赤霉素控苗,组培苗圃发现丛生苗、田间发现小叶苗及疑似小叶苗及时拔除。

生物制剂HY01对黄瓜苗期病害防治及生长的影响

研究了生物制剂HY01对黄瓜(Cucumis sativus L.)苗期猝倒病和立枯病的防治效果。结果表明,处理后黄瓜苗期猝倒病发病率降低94.8%,立枯病发病率降低92.7%,效果显著高于农药处理;黄瓜苗植株和根系生长指标都高于清水对照和化学农药处理,其中株高、主根长度和根须数的增加达到了显著水平。室内毒力测定结果表明,生物制剂HY01只有微弱的抑菌效果,不足以在田间产生杀菌作用。表明生物制剂HY01通过诱导植物抗性显著提高黄瓜苗期的抗病性,同时也有明显的促生长作用。

草莓工厂化育苗基质的筛选

以东北泥炭土为主分,辅以草莓种植地来源广泛的工农业废弃物,配制成8种不同配方的复合基质。通过对复合基质进行理化性质测定、观察其EC和pH值在育苗过程中的变化、分析所育子苗的生物学性状和第1批产果情况,并进行模糊综合评判,筛选出适合草莓无土育苗的基质配方为泥炭∶砖粒∶砻糠灰(3∶1∶1)和泥炭∶砻糠灰(1∶1)。

EST-SSR标记在白菜种质资源分析中的应用

利用EST-SSR标记对30份白菜种质资源进行分析。结果EST-SSR标记可以作为白菜品种鉴定、种质资源评价和亲缘关系进行有效分析。

免疫诱导剂在草莓病虫害绿色防控技术中的应用

为减少草莓上化学农药的使用,采用免疫诱导剂结合不同病虫害绿色防控技术,研究其对草莓产量、品质和病虫害发生率的影响。结果表明,综合病虫害绿色防控处理后,草莓当月产量和大果率平均比对照提高12.5%和8.2%,叶绿素含量提高9.9%,叶片电解质渗透率降低7.5%。不同绿色防控技术中,使用诱导剂减少化学农药使用后,产量、大果率和叶绿素含量分别提高6.6%、6.9%和6.0%,叶片电解质渗透率降低16.2%。综合病虫害绿色防控处理使草莓病果率降低17.7%,灰霉病病情指数降低24.3%,其中,诱导剂使用后,病果率和灰霉病病情指数降低13.1%和29.9%。

免疫诱抗剂“保康灵1号”对瓜类幼苗生长及成苗率的影响

本试验研究了免疫诱抗剂＂保康灵1号＂对甜瓜、西瓜和黄瓜种子成苗率及幼苗生理特性的影响。结果发现＂保康灵1号＂浇灌和浸种处理后3种瓜类成苗率平均提高6.4%,其中浇灌方式更有利于西瓜和黄瓜的成苗;＂保康灵1号＂处理黄瓜叶绿素含量和根系活力显著提高了13.7%和162.0%,甜瓜茎粗和根系活力显著提高11.1%和58.5%。因此免疫诱抗剂＂保康灵1号＂能提高瓜类的成苗率,明显提高黄瓜和甜瓜幼苗的生理指标,其中浇灌对西瓜和黄瓜效果更好。

吊瓜试管苗快繁技术研究及性别验证

吊瓜，学名栝蒌，属葫芦科多年生草质藤本植物。目前广泛载种的绝大部分是食用吊瓜，以吊瓜子为主要收益。吊瓜子具有极高的药用价值，是具有保健作用的休闲食品，深受广大消费者的喜爱。近年来浙江省的吊瓜产业发展迅速，取得了很好的经济效益，吊瓜生产基地面积迅速增长。

草莓炭疽病分生孢子离体快速繁殖技术探讨

为进一步了解草莓炭疽病菌的生物学特性,为其田间防控技术和抗性育种提供基础,研究了分离部位、接种材料、培养基、培养湿度、光照条件对菌丝体和分生孢子生长的影响。结果表明,以匍匐茎为接种材料,培养基中加氨苄青霉素50μg.mL-1和链霉素50μg.mL-1,能尽量减少草莓炭疽病菌分离时的污染率;以PDA或PSA为培养基,以孢子堆为接种材料,光照为252 lx,湿度为80%,是分生孢子产生的最佳条件。

观光采摘型草莓品种引进筛选试验

为丰富本地观光采摘型的草莓品种,引进了不同果形、果色、熟期性的草莓品种5个,与本地2个主栽草莓品种‘红颊’‘章姬’,在浙江省建德市进行了栽培试验,同时观测其生育期、植株生长势、果实性状等主要农艺性状。最终筛选出适合本地栽种的草莓品种4个,即‘红颊’‘越心’‘红玉’和‘白雪公主’,极大地丰富了目前观光采摘型的草莓品种,有利于当地草莓观光采摘业的进一步发展。