目的:从皖南尖吻蝮蛇毒中分离纯化一种新的抗凝蛋白组分-7221(ACPF-7221)。研究小鼠对ACPF-7221的急性毒性反应及死亡率并确定其LD50及95%可信区间。方法:先后用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析、Sephadex G75分子筛、SP Seph...目的:从皖南尖吻蝮蛇毒中分离纯化一种新的抗凝蛋白组分-7221(ACPF-7221)。研究小鼠对ACPF-7221的急性毒性反应及死亡率并确定其LD50及95%可信区间。方法:先后用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析、Sephadex G75分子筛、SP Sepharose Fast Flow阳离子交换柱层析、Sephadex G50分子筛过滤对尖吻蝮蛇粗毒进行分离纯化,利用部分凝血活酶活性时间(APTT)活性检测筛选出抗凝成分。ACPF-7221从小鼠的尾静脉注射,根据每组小鼠的体重确定其相对应的给药量。根据死亡结果计算出LD50及其95%可信区间。结果:分离纯化的ACPF-7221由相对分子质量分别为25000、30000、50000的3种蛋白所构成三聚体,其蛋白含量约为65%。小鼠静脉注射LD50为7.848mg/kg,LD50(95%可信区间)分别为7.353~8.375mg/kg。结论:利用离子交换柱层析法可从皖南尖吻蝮蛇毒中提取出一种新的抗凝蛋白组分,此组分由3种相对分子质量各异的蛋白所构成三聚体。通过对小鼠急性毒性实验确定LD50及其95%可信区间。肺为急性毒性的靶器官,肺出血窒息是其死亡的原因。展开更多
目的:分离纯化皖南尖吻蝮蛇蛇毒(Wannan Agkistrodon acutus venom)中抗肿瘤活性蛋白并研究其活性。方法:利用DEAE-sepharose Fast Flow和SP-sepharose Fast Flow阴阳离子交换层析以及Sephadex G-75凝胶过滤层析等分离方法从皖南尖吻蝮...目的:分离纯化皖南尖吻蝮蛇蛇毒(Wannan Agkistrodon acutus venom)中抗肿瘤活性蛋白并研究其活性。方法:利用DEAE-sepharose Fast Flow和SP-sepharose Fast Flow阴阳离子交换层析以及Sephadex G-75凝胶过滤层析等分离方法从皖南尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化得一种抗肿瘤活性蛋白,用CCK-8法检测该蛋白对体外培养的白血病K562细胞、结肠癌细胞(SW480)、胃癌细胞(SGC7901)、肝癌细胞(HepG2)的增殖抑制作用。结果:分离纯化得一相对分子质量约23700的抗肿瘤活性组分(ATF1-c),CCK-8检测对体外培养的K562、SW480、SGC7901、HepG2细胞的增殖抑制作用,呈剂量-时间依赖关系。结论:ATF1-c对体外培养的人癌细胞有明显的抑制和杀伤作用。展开更多
文摘目的:从皖南尖吻蝮蛇毒中分离纯化一种新的抗凝蛋白组分-7221(ACPF-7221)。研究小鼠对ACPF-7221的急性毒性反应及死亡率并确定其LD50及95%可信区间。方法:先后用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析、Sephadex G75分子筛、SP Sepharose Fast Flow阳离子交换柱层析、Sephadex G50分子筛过滤对尖吻蝮蛇粗毒进行分离纯化,利用部分凝血活酶活性时间(APTT)活性检测筛选出抗凝成分。ACPF-7221从小鼠的尾静脉注射,根据每组小鼠的体重确定其相对应的给药量。根据死亡结果计算出LD50及其95%可信区间。结果:分离纯化的ACPF-7221由相对分子质量分别为25000、30000、50000的3种蛋白所构成三聚体,其蛋白含量约为65%。小鼠静脉注射LD50为7.848mg/kg,LD50(95%可信区间)分别为7.353~8.375mg/kg。结论:利用离子交换柱层析法可从皖南尖吻蝮蛇毒中提取出一种新的抗凝蛋白组分,此组分由3种相对分子质量各异的蛋白所构成三聚体。通过对小鼠急性毒性实验确定LD50及其95%可信区间。肺为急性毒性的靶器官,肺出血窒息是其死亡的原因。
文摘目的:分离纯化皖南尖吻蝮蛇蛇毒(Wannan Agkistrodon acutus venom)中抗肿瘤活性蛋白并研究其活性。方法:利用DEAE-sepharose Fast Flow和SP-sepharose Fast Flow阴阳离子交换层析以及Sephadex G-75凝胶过滤层析等分离方法从皖南尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化得一种抗肿瘤活性蛋白,用CCK-8法检测该蛋白对体外培养的白血病K562细胞、结肠癌细胞(SW480)、胃癌细胞(SGC7901)、肝癌细胞(HepG2)的增殖抑制作用。结果:分离纯化得一相对分子质量约23700的抗肿瘤活性组分(ATF1-c),CCK-8检测对体外培养的K562、SW480、SGC7901、HepG2细胞的增殖抑制作用,呈剂量-时间依赖关系。结论:ATF1-c对体外培养的人癌细胞有明显的抑制和杀伤作用。