肌注马波沙星在猪组织中残留消除规律

旨在分析马波沙星在猪体内的残留消除规律并为制定休药期提供依据。30头健康猪按体重以2mg·kg-1肌注给药,每天1次,连续给药3d,最后一次给药后第0.5、1、3、5、8天随机宰杀5头猪取样。试样用三氯甲烷提取,45℃下氮气吹干和正己烷净化后,经高效液相色谱C18色谱柱分离后用紫外检测器检测。结果显示:给药后12h肾组织中的药物浓度最高,为4.93μg·g-1,第5天所有组织的药物浓度均低于最高残留限量。采用Winnonlin软件计算各组织的消除动力学参数,消除快慢依次为肌肉、注射位点、肾、肝和皮脂,其消除半衰期(t1/2β)分别为17.86、17.92、18.20、18.90、21.20h。肾的药时曲线下面积(AUC)最高,为200.16μg·h·g-1,说明肾是马波沙星在猪体内作用的靶器官。参照EMEA对马波沙星制定的MRL,计算得肾的休药期最长,为5.46d。马波沙星注射液在猪体内吸收迅速,分布广泛,消除缓慢,建议休药期为6d。

液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱回旋共振组合质谱法鉴定乙胺嘧啶在大鼠体内的代谢物

研究乙胺嘧啶在大鼠体内的代谢方式与途径。大鼠以5 mg/kg单剂量口服乙胺嘧啶后在不同时间点分别采集其血液、尿液和粪便样品。采用液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱回旋共振组合质谱仪(LCLTQ-Orbitrap)检测乙胺嘧啶在大鼠体内的代谢物,结合相关代谢软件,共鉴定出10种代谢产物,主要的代谢途径包括苯环上的羟基化、N-氧化、双氧化、N-葡萄糖醛酸结合、甲基化+葡萄糖醛酸结合、羟基化+葡萄糖醛酸结合和N-氧化+葡萄糖醛酸结合。除乙胺嘧啶3-N-氧化物已经在大鼠体外代谢研究中被发现外,其余9种代谢产物均首次在大鼠体内发现。根据其精确分子量及多级质谱的碎片特征,对这些代谢产物的化学结构做出推断,并建立乙胺嘧啶在大鼠体内的代谢谱系。研究表明,乙胺嘧啶在大鼠体内的Ⅰ相代谢方式主要是羟基化和N位氧化,Ⅱ相代谢方式主要是甲基化和葡萄糖醛酸结合。

盐酸氯苯胍灌服后在兔尿液和粪便中的排泄规律

【目的】建立氯苯胍在兔尿液和粪便中的高效液相色谱检测方法,以测定氯苯胍在兔排泄物中的排泄量.【方法】12只健康新西兰大白兔灌服盐酸氯苯胍15mg·kg^-1后,于不同时间间隔收集其所有粪便和尿液,粪便称质量、尿液定容后冻存.称取0.2g粪便,用体积比为2∶1的三氯甲烷-甲醇混合液提取,氮气吹干;量取1mL兔尿,用体积分数为0.2%乙酸酸化的乙酸乙酯提取,氮气吹干,残渣均用乙腈-水（体积比30∶70）溶液复溶,CNWHLB柱净化,浓缩后用甲醇定容,上机检测.【结果和结论】氯苯胍在兔尿中的检测限与定量限分别为0.005和0.01μg·mL^-1,通过尿液排泄的氯苯胍占给药总量的比例为0.56%;在兔粪便中的检测限与定量限分别为0.01和0.05μg·g^-1,通过粪便排泄的氯苯胍占给药总量的比例为87.17%.氯苯胍在兔尿和粪便中排出高峰期分别在给药后0～6和6～12h,占给药后累积排泄总量的比例分别为28.37%和38.46%.结果显示,该检测方法满足测定氯苯胍在兔尿和粪便中排泄量的要求,内服盐酸氯苯胍后大部分氯苯胍随尿液和粪便排出体外.

伊维菌素PLA及PLGA微球混悬液在犬体内的药代动力学研究

【目的】研究并比较伊维菌素微球与伊维菌素普通注射液在犬体内的药代动力学（简称药动学）特征．【方法】18只健康比格犬随机分为3组，分别单次皮下注射伊维菌素聚乳酸（Poly lactic acid，PLA）微球混悬液（3 mg· kg-1），乙交酯丙交酯共聚物（ Poly lactic-co-glycolic acid ， PLGA ）微球混悬液（3 mg · kg-1）及伊维菌素普通注射液（0.3 mg· kg-1），反相高效液相色谱法测定犬血浆内伊维菌素的浓度，运用药动学软件Winnonlin 5.2.1的非房室模型分析方法，计算出有关药动学参数．【结果和结论】伊维菌素普通注射液皮下注射给药后，达峰时间为（1.33±0.21） d，达峰质量浓度为（44.3±5.1） ng· mL-1，药时曲线下面积（AUC0～∞）为（323.26±23.56） ng· mL-1· d；伊维菌素PLA及PLGA微球混悬液皮下注射给药，AUC0～∞分别为（1041.47±73.73）、（1461.77±102.54） ng· mL-1· d，伊维菌素在犬体内维持血药质量浓度＞1 ng · mL-1的时间达140 d以上，所制备的PLA微球和PLGA微球具有明显缓释特性．

一种新的沙丁胺醇人工抗原的合成及单克隆抗体的制备

【目的】为证明采用4-溴丁酸乙酯半抗原合成人工抗原可制备灵敏度高、特异性好的单克隆抗体.【方法】将硫酸沙丁胺醇(SAL)与4-溴丁酸乙酯反应制备半抗原(SAL-HS);通过N-羟基琥珀酰亚胺活化酯法合成免疫原与包被原,用聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外光谱和质谱方法对沙丁胺醇免疫原及包被原进行鉴定.免疫原免疫Balb/c小鼠,采用融合技术产生杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备单克隆抗体,并鉴定其免疫学特性.【结果和结论】筛选出1株杂交瘤细胞株,其细胞培养上清液效价达1∶128 000,腹水效价达1∶2 560 000,免疫球蛋白亚型鉴定为IGg1;抗体对沙丁胺醇的半数抑制浓度(IC50)为:0.746 ng/mL;与其他同类结构药物的交叉反应率均小于0.015%.