小鼠细小病毒NS1蛋白的原核表达、多克隆抗体制备及其免疫原性评价

【目的】通过原核表达系统表达小鼠细小病毒(Minute virus of mice,MVM)的非结构蛋白1(nonstructural protein 1,NS1),并制备其多克隆抗体,为MVM NS1蛋白生物学功能研究及相关检测方法的建立提供研究材料。【方法】通过同源重组将MVM NS 1基因与质粒pET-N-His-C-His进行连接构建重组质粒,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达,通过不同诱导条件筛选并纯化出无需复性的可溶性蛋白。将纯化后的重组蛋白NS1免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,通过间接ELISA法测定抗体效价。采用Western blotting和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定重组蛋白的表达及免疫原性。【结果】SDS-PAGE分析显示,诱导表达的重组蛋白大小为76 ku,在诱导剂(IPTG)浓度为0.6 mmol/L、诱导温度为28℃条件下表达效果最佳。间接ELISA结果显示,制备的多克隆抗体效价为1∶32000。Western blotting和IFA检测结果显示,制备的NS1多克隆抗体可与NS1蛋白及MVM特异性结合。【结论】本研究成功表达并纯化获得MVM NS1重组蛋白,并制备了免疫原性良好的多克隆抗体,为进一步研究NS1蛋白生物学功能及其在MVM复制感染机制中的作用、MVM临床诊断方法的建立奠定了基础。

医学实验动物福利伦理问题分析

实验动物是生命科学研究和发展重要的基础和支撑条件,对医学发展和人类健康具有十分重要的意义。但是如何正确对待实验动物生命,如何维护实验动物福利伦理,如何使动物实验符合生命伦理学规范等一系问题引起了人们的深思。文中对动物实验与动物福利伦理的关系、动物福利伦理的起源和发展、"3R"理论的提出、国内外实验动物福利伦理立法状况、影响实验动物福利伦理的因素等进行了分析,对如何加强并改善我国实验动物福利伦理工作提出了措施和建议。

维护实验动物福利 促进生命科学发展

实验动物是生命科学研究和发展重要的基础和支撑条件,为人类健康、科技进步和社会发展作出了巨大的贡献,实验动物福利影响其身心健康和质量,影响科学研究结果的准确性。因此,关爱实验动物,维护实验动物福利,是培育标准化实验动物、保障科学研究结果准确可靠的重要条件,同时也是提高公众人文素养,促进人与自然协调发展的需要,是人类文明和进步的标志。

鸡大肠杆菌病病原的分离、鉴定及特性

从江苏地区５个大型种鸡场孵化后期死亡的１６３枚鸡胚及８４羽出壳弱雏中分离鉴定出９９株大肠埃希氏菌，死胚分离率为３６．８１％，出壳弱雏分离率４６．４３％；从其它９个蛋鸡场４７羽疑似大肠杆菌病的病、死鸡的肝、脾、心包、腹水、输卵管、脑、眼中分离鉴定出２３株大肠埃希氏菌，分离率为４８．９４％。分离菌中有６７株对清洁级昆明种小鼠（ＫＭ）具有强毒力。对其进行大肠埃希氏菌Ｏ群抗原鉴定，共有２２种Ｏ型血清型，Ｏ１１、Ｏ８８、Ｏ１１５为优势血清型，Ｏ７８及Ｏ８１各为３株，Ｏ１８、Ｏ２０、Ｏ２６、Ｏ３６、Ｏ８９各为２株，其余为Ｏ３、Ｏ４、Ｏ９、Ｏ３０、Ｏ６０、Ｏ７５、Ｏ９３、Ｏ１０３、Ｏ１１４、Ｏ１３１、Ｏ１３３及Ｏ１４９；未定型菌１１株，占待检菌株的１６．４２％，其中Ｏ３、Ｏ９、Ｏ１８、Ｏ３０、Ｏ８１、Ｏ１１４、Ｏ１３１及Ｏ１４９为首次发现。对２９株不同血清型不同来源的分离菌进行抗生素敏感性试验，结果，所有菌株对头孢唑啉（ＣＦＺ）极度敏感；对其它抗生素的敏感性则各不相同。此外，本试验还对分离菌的生长培养特性，形态特征，生化特性及对ｌｄ鸡的致病性进行了研究。

医学实验动物学科的创新发展

医学实验动物学科是医学发展重要的基础和支撑条件,通过在编制、观念、人才、技术、科研、服务、文化、科普等领域的创新发展,构建了医学研究标准化动物实验支撑平台,开辟了发展医学实验动物学科新的途径和模式。

鸡大肠杆菌病研究进展

鸡大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）的某些菌株所致鸡的一类疾病总称。１８８９年Ｋｌｅｉｎ首先发现本病，但未分离出病原。１８９４年Ｌｉｇ－ｎｉｅｒｓ系统报道了本病并分离出病原，二十世纪中期以后，随着养禽业的发展，该病在各国的流...

不同品种实验兔主要脏器重量及脏器系数的研究

目的测定并比较分析我国主要品种实验兔主要脏器重量及脏器系数的差异。方法用电子天平分别测定了40只青紫蓝兔(GPB)、中国白兔(CW)及南京总医院培育的实验型封闭群新西兰兔(NZW)主要内脏器官肝、心、脾、肺、胰、肾、肾上腺、睾丸、卵巢、子宫输卵管的重量和脏器系数。结果各品种实验兔性别之间除GPB肺重量及NZW肺脏器系数差异有显著性(P<005)外,其余脏器重量和脏器系数性别间差异均无显著性(P>005)。NZW与GPB、CW之间肝、脾、肺、胰、肾上腺脏器系数之间差异有显著性(P<0.05),其余脏器系数不同品种之间差异无显著性(P>0.05);GPB与CW之间所有脏器系数差异均不显著(P>0.05)。结论实验兔主要脏器重量和脏器系数与品种特性具有一定的相关性。

鸡大肠埃希氏菌菌毛表达、血凝谱及粘附特性研究

对6株具有不同致病性的鸡大肠埃希氏菌分离株体外菌毛的表达、对13种不同红细胞血凝谱及血凝方式、对鸡胚成纤维细胞(CEF)及在体内外对1日龄鸡气管组织的粘附特性进行了研究,结果表明,具有致病性的菌株,在体外适宜的条件下,能表达菌毛,非致病性菌株不表达。不同菌株的血凝谱及血凝方式具有差异,除中等致病性菌株MG30e对大鼠红细胞(RBC)的凝集不能被D-甘露糖抑制,表现为抗甘露糖型血凝(MRHA)外,其余菌株对各种红细胞的凝集均能被D-甘露糖抑制(MSHA)。所有菌株在体外均能与CEF粘附,除MG38e对CEF具有侵袭性、Q50e对CEF的粘附方式为局限性粘附(LA)外,其余菌株对CEF无侵袭性,粘附方式为弥散性粘附(DA)。具有致病性的菌株气管接种6h后,或在体外与气管环37℃共同培养3h后,均能牢固地粘附于鸡气管粘膜上;而非致病性菌株在相同条件下,却不能牢固地粘附于鸡气管粘膜上。

屏障环境中实验鼠微生物质量控制

为了确保屏障环境中实验大、小鼠微生物质量符合国家标准,必须坚持加强对员工素质和技能的培训,制订并严格执行标准操作程序(SOP)和工作制度,维持性合理消毒、灭菌屏障环境及各种物品,定期维护保养屏障环境内各种仪器设备,定期自检大、小鼠微生物质量等综合性方法,才能保障屏障环境及实验大、小鼠的微生物质量。

在生命科学研究中影响动物实验结果的多因素分析

动物实验是生命科学研究最主要的方法之一 ,作者对影响动物实验结果的实验动物因素、环境因素、营养因素、化学药剂、隔离和饲养密度、运输、抓取和保定、微生物因素、社会因素和人类因素等进行了分析 。

江苏境内鸡源大肠埃希氏菌的某些生物学特性

从江苏九个蛋鸡场47羽疑似大肠杆菌病的病、死鸡的肝、脾、心包液、腹水、输卵管、脑实质、眼球液中分离鉴定出23株大肠埃希氏菌，分离率为48．94％。对其中17株进行血清型鉴定，共有11种血清型，其中O20、O78、及O89较为多见，分别占待检菌株的11．77％、1765％和11．77％，其余为O9、O18、O26、O3O、O36、O88、O131及O149，其中Og、O18、O30、O36、O131及O149为国内外首次发现，未定型菌2株。文中还对分离菌的致病性及抗生素敏感性进行了研究。

实验动物科普与伦理工作的探索与实践

关键词:实验动物;科普;伦理;生命科学;

实验动物屏障环境建设和管理模式初探

实验动物是生命科学研究和发展中的重要基础和支撑条件,如何建设和管理与现代生命科学研究相适应的实验动物屏障环境是每一个实验动物科技工作者所面临的问题。该作者结合实际工作和具体条件认为应重视新技术的应用和动物福利。

一株分离自肉雏鸡脑部大肠埃希氏菌的某些生物学特性

对一株分离自以神经紊乱为主要症状肉雏鸡脑实质的Ｅ．ｃｏｌｉ（ＬＣＢ）的某些生物学特性进行了研究。包括对ＫＭ小鼠及１ｄ鸡的致病性、血清学特性、抗生素敏感性、菌毛的表达及电镜观察、血凝性、溶血性。结果表明，该菌株血清型属０１３１，为国内外首次发现，腹腔接种对ＫＭ小鼠具有高致病性，脑内接种对１ｄ鸡也具高致病性，但腹腔及气管接种对１ｄ鸡无致病性，不产生溶血素，在ＮＢ中经３７℃７２ｈ培养不表达菌毛；对鸭、犬的ＲＢＣ表现强凝集，对鸡、豚鼠、马的ＲＢＣ表现弱凝集，血凝能被Ｄ－甘露糖抑制，表现为ＭＳＨＡ；菌株对ＰＩＰ、ＣＦＺ高敏，对ＧＥＮ、ＮＥＯ、ＣＴＮ中度敏感，对其它抗生素则低敏或耐药。

江苏省鸡源大肠埃希氏菌某些生物学特性研究

江苏省鸡源大肠埃希氏菌某些生物学特性研究恽时锋（南京军区南京总医院动物实验科，江苏２１０００２）兰邹然王伟武郑明球察宝祥（南京农业大学动物医学院，江苏２０１１９５）鸡大肠杆菌病是一种由大肠埃希氏菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）某些血清型菌株所致的在世界范围内影响家...

医院开展实验动物科普培训的实践和效果

实验动物作为生物医学乃至整个生命科学发展重要的基础和支撑条件，对医学发展具有重要的作用，其发展水平是一个单位是否具有竞争力和可持续发展的重要体现，而实验动物科学发展水平不仅体现在单位实验动物学科发展层次和从事实验动物工作科技人员的水平，对于从事临床医疗工作的医院而言，更重要的是体现在广大医学科技人员对实验动物科学重要性的认识和态度，

鸡胚源致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定

在江苏五个种鸡场,从孵化后期死亡的186枚鸡胚及84羽出壳弱雏中分离出99株大肠埃希氏菌,死胚分离率为36.81％,出壳弱雏分离率为46.43％。分离菌中有50株对昆明(KM)小鼠具有强毒力,对其进行大肠杆菌O群抗原鉴定,共有15种血清型,O_(11)、O_(81)、O_(88)及O_(115)为优势血清型,其余为O_3、O_4、O_(18)、O_(26)、O_(36)、O_(60)、O_(75)、O_(93)、O_(103)、O_(1l4)、O_(113)其中O_3、O_(18)、O_(36)、O_(81)、O_(114)为国内外首次发现,未定型菌9株,占待检菌株的18％。本文还对所分离大肠埃希氏菌的培养特性,形态特征,生化特性,致病性及抗生素敏感性进行了研究。