胃癌干细胞来源的伴侣分子-抗原肽瘤苗的制备及其免疫功能

目的：探讨从胃癌干细胞中提取伴侣分子？抗原肽的方法及其免疫功能。方法低温超声裂解筛选胃癌干细胞和胃癌细胞，经盐析粗提蛋白及透析后，采用十二烷基硫酸钠？聚丙烯酰胺凝胶电泳（ SDS？PAGE）分析伴侣分子？抗原肽表达量，采用溴化氰活化琼脂糖凝胶4B亲和层析分离、纯化伴侣分子？抗原肽，采用反向高压液相色谱、SDS？PAGE和Western blot法进行蛋白纯度分析，采用淋巴细胞增殖实验和细胞毒活性实验检测伴侣分子？抗原肽的免疫活性。结果成功制备并鉴定胃癌干细胞的伴侣分子？抗原肽，主要组分为HSP60？抗原肽、HSP70？抗原肽、HSP90？抗原肽和HSP110？抗原肽。0．75μg HSP70？抗原肽、1．00μg HSP70？抗原肽和1．00μg HSP90？抗原肽对淋巴细胞有明显的增殖作用，其A490值分别为0．26±0．03、0．45±0．05和0．32±0．04，而相应剂量的 HSP60？抗原肽和HSP110？抗原肽不能激活淋巴细胞。1．00μg HSP70？抗原肽组和1．00μg HSP70组的细胞杀伤率分别为（45．0±2．0）％和（16．0±2．0）％，差异有统计学意义（P＝0．012）。1．00μg HSP90？抗原肽组和1．00μg HSP90组的细胞杀伤率分别为（36．0±5．0）％和（13．0±4．0）％，差异有统计学意义（P＝0．048）。结论胃癌细胞中伴侣分子？抗原肽含量极低，而胃癌干细胞中伴侣分子？抗原肽含量明显增多，经提纯后可制备纯度较高的伴侣分子？抗原肽。提取的伴侣分子？抗原肽具有较强的免疫原性，可在体外制作瘤苗，可能在胃癌靶向治疗上有较好的应用价值。