中枢神经系统弥漫大B细胞淋巴瘤脑脊液和血浆细胞因子水平分析

目的初步探索原发和继发中枢神经系统(CNS)弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者脑脊液和血浆细胞因子水平特点,及与无CNS累及DLBCL患者的差异。方法回顾性分析首都医科大学宣武医院血液科2019年至2022年收治的初治、检测了脑脊液和血浆细胞因子水平的DLBCL患者83例,根据临床特征分为3组:原发中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)组46例,继发CNSL(SCNSL)组12例,无CNS受累的系统性DLBCL(non-CNSL)组25例。收集患者治疗前血浆及脑脊液12种细胞因子结果,包括IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12P70、IL-17A、IFN-α、IFN-γ和TNF-α,进行组间比较。结果PCNSL组脑脊液IL-10水平[41.08(6.90,98.73)pg/mL]显著高于SCNSL组[9.13(0.98,26.22)pg/mL]及non-CNSL组[1.58(1.42,1.79)pg/mL],P值分别为<0.0001、0.0185。PCNSL组血浆IL-10[2.20(1.39,2.64)pg/mL]明显低于non-CNSL组[5.49(2.02,21.36)pg/mL]。83例患者中,共有40例患者同时检测了脑脊液和血浆的细胞因子水平,其中PCNSL组23例、SCNSL组10例、non-CNSL组7例。比较脑脊液和血浆的细胞因子水平发现,PCNSL组中69.6%患者(16/23)仅有脑脊液IL-10水平升高、17.4%患者(4/23)脑脊液和血浆IL-10水平同时升高、13.0%患者(3/23)均无升高;SCNSL组患者中10.0%患者(1/10)仅有脑脊液IL-10水平升高、50.0%患者(5/10)脑脊液和血浆IL-10水平同时升高、40.0%患者(4/10)均无升高;non-CNSL组57.1%患者(4/7)仅有血浆IL-10升高、14.3%患者(1/7)脑脊液和血浆IL-10水平同时升高、28.6%患者(2/7)均无升高。脑脊液及血浆IL-10同时升高、且0.2<CSF IL-10/Plasma IL-10<5.0时,对诊断SCNSL的灵敏度为50.0%,特异性为96.4%。结论PCNSL组患者脑脊液IL-10明显高于non-CNSL及SCNSL,血浆IL-10明显低于non-CNSL。当血浆及脑脊液IL-10升高、且脑脊液/血浆IL-10比值为0.2~5.0之间时,其诊断SCNSL具有较高的特异性。

外周辅助T细胞与自身免疫性疾病

近年研究发现了一个新的T细胞群体——外周辅助T细胞(T peripheral helper cells,Tph细胞),Tph细胞不仅具有B细胞辅助能力,还能促使B细胞迁移到外周炎症组织。目前研究发现多种自身免疫性疾病存在Tph细胞数目与功能异常,且其异常与疾病的活跃程度、病情严重程度密切相关。现就Tph细胞的发现、功能与调控以及Tph细胞在自身免疫性疾病中的作用研究进展进行综述。

迷你临床演练评估在血液科住院医师临床能力考核中的应用

目的探讨迷你临床演练评估工具在血液科住院医师临床能力考核中的应用效果。方法 2014~2015年应用迷你临床演练评估改良量表对在首都医科大学宣武医院血液科参加规范化培训的36名住院医师进行7个项目临床核心能力考核,并评价其应用效果。结果培训结束时住院医师在迷你临床演练评估的5个项目包括医疗面谈技能、体格检查技能、人文关怀、沟通技能、整体临床胜任能力中分数和合格率明显高于培训初期（P〈0.05）,考核教师及住院医师对迷你临床演练评估的满意度高达90%以上。结论采用迷你临床演练评估能全面考核住院医师临床工作能力,操作简单,兼具教学功能,值得在住院医师标准化培训中进行推广。

CIK细胞对慢性粒细胞白血病G_0期CD_(34)^+白血病细胞的杀伤作用

目的研究细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)对慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)中G0期原始干细胞(CD34+)的杀伤作用。方法5例CML慢性期患者外周血标本在体外诱导培养CIK细胞,流式细胞仪(FCM)检测其表型。G带法检测CIK细胞核型。应用免疫磁珠技术分选CD34+CML白血病细胞,AO染色后利用FCM检测CIK细胞对G0期CD34+CML白血病细胞的杀伤作用。半固体培养法检测CIK细胞对正常骨髓CFU-GM、BFU-E集落的影响。结果CIK细胞在培养第3周时,CD3+细胞数量达(97.29±3.55)%,CD3+CD56+细胞绝对数量增加了356倍,染色体分析证实,CIK细胞为正常核型,流式细胞仪检测CIK细胞对G0期CD34+CML白血病细胞平均杀伤率为66.73%。对照组与加入CIK细胞组的CFU-GM集落数分别为150±16和145±20,差异无统计学意义,P=0.38;两组的BFU-E集落数分别为68±5和65±8,差异无统计学意义,P=0.23。集落类型、大小两组相似,差异无统计学意义,P=0.46。结论CIK细胞可从CML患者外周血中大量扩增,来源于正常淋巴细胞,对G0期CD34+CML白血病细胞有明显抑制作用,对正常造血前体细胞无抑制作用,可作为过继细胞免疫治疗的效应细胞治疗CML。

骨髓增生异常/骨髓增殖性肿瘤-不能分类的差异表达的信号通路蛋白分析

目的:对骨髓增生异常/骨髓增殖性肿瘤-不能分类(MDS/MPN-U)的信号通路蛋白进行筛选,探讨差异表达的蛋白在MDS/MPN-U发病机制中可能涉及的作用。方法:采用蛋白通路芯片技术(protein pathway array,PPA)比较10例M DS/M PN-U患者和10例正常对照中性粒细胞信号通路蛋白表达差异,并通过蛋白质组学数据应用平台(IPA)分析差异蛋白参与的信号传导通路及建立信号传导网络。结果:与正常对照组比较,MDS/MPN-U组中共有25种蛋白存在差异表达,其中15种蛋白表达上调,10种蛋白表达下调。这些蛋白主要参与影响10个信号传导通路,这些通路与细胞增殖和免疫相关,并且相互作用,形成复杂信号传导网络。结论:采用PPA技术筛选M DS/M PN-U信号通路蛋白差异表达谱,有利于揭示M DS/M PN-U发病机制及寻找新的治疗靶点。

利妥昔单抗联合调整剂量EPOCH方案治疗胃肠道弥漫大B细胞淋巴瘤

通过对4例累及胃肠道的弥漫大B细胞淋巴瘤患者的发病经过、临床与病理特点、预后判断等方面进行综合分析,确定采用利妥昔单抗联合调整剂量的EPOCH(R-DA-EPOCH)治疗方案,对患者化疗后的治疗反应和转归情况进行了评价随访。除1例合并糖尿病、高血压多年的患者因出现严重感染死亡外,其他3例患者均获得完全缓解。将R-DA-EPOCH方案用于胃肠道弥漫大B细胞淋巴瘤的一线治疗,具有较好的近期疗效,需要扩大样本量来判断其远期疗效。

多参数流式细胞术检测B细胞非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯

本研究比较多参数流式细胞术(MPFC)与骨髓细胞形态学分析(BMA)检测B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)骨髓侵犯的临床价值。采用MPFC与BMA对96例B-NHL患者治疗前的骨髓同时进行检测,并进行二者之间的比较。96份骨髓标本中,BMA检测阳性者12例(12.5%),MPFC检测阳性者38例(39.6%),二者比较差异有显著性(p<0.05),12例BMA检测阳性者MPFC检测均为阳性。MPFC检测阴性的患者与MPFC检测阳性的患者的3年预计总生存率无明显差异,但它们的4年预计总生存率分别为(73.18±6.65)%和(44.13±19.55)%,二者差异显著(p<0.05)。结论:MPFC检测B-NHL骨髓侵犯的敏感性高于骨髓细胞形态学检测,MPFC检测阴性患者的4年平均生存率显著高于MPFC检测阳性患者,MPFC检测淋巴瘤骨髓侵犯可能成为淋巴瘤临床分期和预后判断的有效指标之一。

骨髓增生异常综合征患者细胞免疫表型异常

本研究探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者细胞免疫表型异常,确定其在MDS诊断中的价值。应用流式细胞术(FCM)检测136例血细胞减少伴骨髓病态造血患者的细胞免疫表型,采用流式细胞术积分系统(FCSS)对检测结果进行判断,确定阳性结果的敏感性与特异性,并与传统的诊断方法进行相关性检验。结果表明:136例患者中有111例临床确诊为MDS,非MDS患者25例。在111例MDS患者中FCSS判断为阳性结果的有85例,判断为中间结果的有18例,阴性结果8例;而在非MDS组,FCSS确定为阴性结果的有24例,判断为中间结果的有1例,无阳性结果病例。FCSS的诊断敏感性为76.6%,特异性为100%,与传统的诊断方法具有良好的相关性(R=0.613,p=0.000)。结论:MDS患者具有多项免疫表型异常,并可以累及多个细胞群体,其中主要免疫表型异常和累及2个以上细胞群体是MDS与非MDS的鉴别要点。

82例SARS患者T细胞亚群的变化与肺内病变的关系

目的 观察SAR5患者T淋巴细胞亚群绝对数量的变化与肺内病变情况(病变程度及肺内炎症吸收程度)。方法 用流式细胞仪MultiTEST方法对82例发病14d内的SARS患者外周血标本进行T淋巴细胞亚群绝对数量的动态监测,同时动态观察其与肺内病变程度及炎性病变吸收程度的关系,并分析糖皮质激素对T细胞亚群的影响。结果 ①51例病情较轻患者的外周血T细胞亚群在正常范围内或轻度异常,临床上不需要糖皮质激素治疗;②31例病情呈进展状态的患者均伴有CD4^+细胞减少及肺内病变重,需糖皮质激素治疗。82例患者外周血CD4^+细胞绝对数量与病变程度的相关性为r=-0.684,P=0.000;③31例经糖皮质激素治疗的患者CD4^+细胞及CD8^+细胞绝对计数明显少于糖皮质激素治疗前(P=0.000);④CD8^+细胞数量及与肺内病变吸收程度密切相关(r=-0.816;P=0.000)。结论 ①SARS患者肺内病变程度与CD4^+细胞数量呈负相关;②糖皮质激素治疗后SARS患者外周血CD4^+细胞及CD8^+细胞绝对计数减少;③SARS患者肺内病变的吸收程度与CD8^+细胞数量有良好的负相关性。

SARS患者在疾病早期CD4^+T细胞减少及其临床意义

目的 :观察SARS患者在疾病早期CD4 + 细胞的改变及其在疾病的发展及治疗选择中的临床意义。方法 :流式细胞仪方法对 5 2例发病 10天内确诊为SARS患者的外周血标本进行T细胞亚群的绝对计数检测并动态观察胸部X光病变的变化及疾病转归。结果 :在 5 2例患者中 ,有 34例CD4 + 细胞绝对数在正常范围内的患者 ,病变范围小、病情呈稳定状态 ,病变吸收快 ,不需要肾上腺糖皮质激素治疗 ;另有 18例患者出现CD4 + 细胞的绝对值低于正常 ,其中有 13例患者病情呈进展状态 ,加用肾上腺糖皮质激素治疗 ,有 5例CD4 + 细胞绝对数轻度减低患者 ,病情处于稳定状态 ,未加用肾上腺糖皮质激素治疗。两组CD4 + 细胞数经统计学分析P =0 0 0 0 ;CD4 + 细胞数与肺内病变程度的Pearson相关性检验结果为r =- 0 737;P =0 0 0 0 ;与糖皮质激素应用的Pearson相关性检验结果为r =- 0 5 73;P =0 0 0 0。结论 :①SARS患者发病早期外周血CD4 + 细胞绝对计数与肺内病变的程度呈良好的负相关 ;②CD4 + 细胞绝对数下降明显者需糖皮质激素治疗。

脑脊液流式细胞术在诊断非霍奇金淋巴瘤累及软脑/脊膜中的应用

目的探讨脑脊液流式细胞术(CSF-FCM)在诊断非霍奇金淋巴瘤(NHL)脑脊膜转移(LM)中的价值。方法回顾性分析3例影像学检查及脑脊液(CSF)病理检查均不典型的继发中枢神经系统淋巴瘤(SCNSL)的临床资料并复习相关文献。结果病例1诊断为睾丸弥漫大B细胞淋巴瘤,查体无神经系统症状,CSF细胞学检查阴性,但CSF-FCM检到少量单克隆B淋巴细胞(CD19+B细胞10个,表达kappa,不表达lambda),予R-CHOP-HD-MTX化疗及腰穿鞘内注射治疗,患者停化疗7月复发,脑组织活检证实中枢复发。病例2诊断为小B细胞淋巴瘤(脾边缘区淋巴瘤可能性大),查体有神经系统症状,CSF细胞学检查阴性,CSF-FCM检测到单克隆B细胞占CSF有核细胞65.8%,表达CD19 kappa,不表达lambda,确诊NHL脑脊膜累及。病例3确诊小B细胞淋巴瘤(淋巴浆细胞淋巴瘤可能),停化疗8月后出现神经系统症状,骨髓检查﹑CSF细胞学检查及脑活检均未明确诊断,CSF-FCM提示脑脊液单克隆B细胞增多,表达CD45dim+CD19+CD20dim+CD5-CD10-CD22dim+CD2部分+FMC7部分+KAPPA-LAMBDA+CD200+CD79b+CD25+CD103-CD11C-CD38部分+,确诊NHL的脑脊膜受累。结论所有存在CNS受累风险的淋巴瘤患者均应接受腰椎穿刺(LP)检查,CSF的流式细胞术分析有助于隐匿性脑脊膜受累的诊断。CSF样本的全面评估还包括二代测序基因检测、免疫球蛋白重链(IgH)或T细胞受体基因重排检测及细胞因子检测。

自体造血干细胞移植治疗恶性血液病疗效分析

目的评价自体造血干细胞移植（AHSCT）治疗恶性血液病的疗效。方法自1996年1月～2007年12月,采用AHSCT治疗恶性血液病患者共30例（男性14例,女性16例）,中位年龄40（19～52）岁。其中急性非淋巴细胞白血病（ANLL）25例（CR124例,CR21例）,急性淋巴细胞白血病（ALL）4例（CR14例）,粒细胞肉瘤1例。预处理方案主要包括：MAC（马法兰Mel160mg/m2＋阿糖胞苷Ara-C2.0g/m2＋环磷酰胺CY120mg/kg）方案或单次全身放疗（TBI）8～10Gy＋环磷酰胺（CY）120mg/kg方案。结果所有AHSCT患者均重建造血,无移植相关死亡。中位随访时间为82（12～144）月,存活21例（70.0%）,复发9例（30.0%）,与同期单纯接受化疗者比较：5年无病存活率（DFS）[分别为（69±8）%和（34±10）%]前者增高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论AHSCT移植患者移植相关死亡率低,无病生存率较高,可作为恶性血液病治疗的重要方法。

老年急性髓系白血病的巨核系病态造血及免疫表型特征

本研究探讨老年急性髓系白血病(AML)骨髓巨核系病态造血和白血病相关表型特征。在显微镜下分析147例初发非M3-AML患者骨髓巨核系病态造血,应用流式细胞术分析白血病细胞跨系列及跨阶段表达特征,结合外周血白细胞数、染色体核型及诱导完全缓解率等因素,用Logistic回归方法分析年龄≥60岁的老年AML与中青年患者的不同。结果表明:在147例患者中124例患者完成了标准方案治疗,其中70例达到完全缓解,包括老年组18例和对照组52例,经统计学处理p=0.008;并且共有32例(21.8%)存在巨核系病态造血;CD33与CD19/CD7共表达(跨系列表达)者55例(37.4%),CD34与CD11b共表达(跨阶段表达)者65例(44.2%);发病时外周血白细胞数>25×109/L的患者52例(35.4%)。经Logistic回归分析显示,老年患者与中青年患者在巨核系病态造血、CD34与CD11b共表达及CD33与CD7/CD19共表达方面具有统计学意义的差异(OR=4.315,2.761,0.397;p=0.001,0.006,0.020),而染色体核型及发病时外周血白细胞总数无统计学意义差异(OR=0.802,1.096;p=0.646,0.813)。结论:老年患者巨核系病态造血、抗原跨阶段表达和抗原跨系列表达情况明显多于中青年组。

Venetolclax联合阿扎胞苷治疗去甲基化药物单药治疗失败的老年急性白血病/高危骨髓增生异常综合征三例

老年是急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)的不良预后因素[1]。60~69岁患者的5年生存率为13%,而70~79岁患者的5年生存率仅为3%[2]。老年AML的治疗具有挑战性。如阿扎胞苷(azacitidine,AZA)和地西他滨等DNA去甲基化药物(hypomethylating agent,HMA)的作用靶点为AML中的异常DNA甲基化。这些药物能够诱导缓解并可能延长老年AML/骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者的生存期,但是中位生存期仍≤1年[3-4]。

七例血栓性血小板减少性紫癜临床特点

目的总结血栓性血小板减少性紫癜(thrombotic thrombocytopenic purpura, TTP)患者的临床表现、实验室检查特点及疗效。方法收集2015年1月至2017年5月首都医科大学宣武医院收治的7例TTP患者的临床资料,回顾性分析其临床表现、实验室检查、治疗及疗效。结果 7例患者首发症状为头痛或皮肤黏膜出血,随后出现精神症状。所有患者均有微血管病性溶血性贫血(microangiopathic hemolytic anemia, MAHA)和PLT减少,外周血破碎红细胞比例均>1%,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)及间接胆红素(I-BIL)水平升高。4例行血浆血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13)活性检测,3例降低。7例患者中,1例入院后8 h出现急性心力衰竭死亡,余6例每日行血浆置换联合糖皮质激素治疗,1例治疗过程中死亡。结论 TTP诊断主要依靠临床特征,尤其是MAHA、血小板减少、精神症状的'三联征'表现。尽早开始血浆置换是治疗成功的关键。

白血病相关表型在非M_3-AML中的表达及其与预后的关系

目的探讨白血病相关免疫表型在非M3急性髓细胞性白血病(非M3-AML)中的表达及预后意义。方法应用流式细胞仪检测147例非M3-AML患者白血病相关表型特征的表达,同时与外周血白细胞计数、骨髓增殖异常综合征病史或多系病态造血、染色体核型及老年等预后相关因素及临床完全缓解率进行比较。结果 CD33+CD7+和(或)CD33+CD19+(跨系列表达)者55例(37.4%),CD34与CD11b共表达(跨阶段表达)者65例(44.2%);发病时外周血白细胞计数>25×109/L者52例(35.4%);124例患者进行了标准化疗,经两个疗程后达到完全缓解者70例(56.5%)。经Logistic回归显示临床完全缓解状况与CD34与CD11b共表达密切相关(OR=0.489,P=0.000)。结论非M3-AML白血病细胞CD34与CD11b共表达与临床缓解率低密切相关,为临床预后不良的指标。