流感疫苗中间品—鸡胚尿囊病毒液质量控制的研究

为建立流感疫苗中间品—鸡胚尿囊病毒液质量控制点提供依据。用鲎试剂法、微生物限度检查法、沙门菌检查法检测流感疫苗中间品—鸡胚尿囊病毒液的细菌内毒素含量、微生物限度及沙门菌。在300份鸡胚尿囊病毒液中,细菌内毒素含量大于5EU/mL的阳检率为5%;微生物限度检查中小于10个/mL细菌菌落数的占78.67%,小于10个/mL霉菌菌落数的占80.67%,小于10个/mL酵母菌菌落数的占88.67%。沙门菌属的阳检率为4%,其中未检出A～F群的沙门菌。对流感疫苗中间品—鸡胚尿囊病毒液进行细菌内毒素,微生物限度及沙门菌检测可避免不合格尿囊病毒液进入后续生产,污染后续中间品。

人用甲型H1N1流感疫苗两种免疫方法动物免疫效果比较

目的:比较甲型H1N1流感疫苗0d一针免疫方法与0、21d二针免疫方法的免疫效果,同时观察季节性流感疫苗免疫后是否对甲型H1N1流感病毒具有交叉保护性。方法:用甲型H1N1流感疫苗分别按0d一针及0、21d二针2种免疫方法免疫BALB/c小鼠,首针免疫后14、21、28、35及42d眼眶采血分离血清,用血凝抑制(HI)法测定小鼠血清中甲型H1N1特异性抗体滴度,比较2种免疫方法的免疫效果。用季节性流感疫苗免疫小鼠,14、28d后采血分离血清,用甲型H1N1流感病毒特异性抗原采用HI法测定季节性流感疫苗抗血清是否能与甲型H1N1流感病毒特异性抗原进行非特异性结合。结果:二针免疫的方法在第21天加强免疫一次后,第28、35及42天时抗体滴度明显高于一针免疫方法的抗体滴度,且第42天时的抗体滴度约为一针免疫方法抗体滴度的4倍。用甲型H1N1流感病毒特异性抗原采用HI法测定季节性流感疫苗抗血清,未测出甲型H1N1交叉抗体。结论:0、21d二针免疫的方法在第28天后抗体滴度仍保持较高的水平,明显高于0d一针免疫的方法。季节性流感疫苗对甲型H1N1流感病毒无交叉免疫保护性。

狂犬病疫苗与干扰素α2b联合应用对小鼠的保护效果

[目的]研究IFN-α2b与狂犬病纯化疫苗对小白鼠的保护效果。[方法]将IFN-α2b与狂犬病纯化疫苗按不同的免疫程序应用于6个试验组中。1组:狂犬病疫苗腹腔注射0.5 ml/只,0、37、1、4 d免疫;2组:狂犬病疫苗腹腔注射0.5 ml/只,同时腹腔注射IFN-α2b 1 500IU/只,0、3、71、4 d免疫;3:狂犬病疫苗腹腔注射0.5 ml/只,0、37、d免疫;4组:狂犬病疫苗腹腔注射0.5 ml/只,同时腹腔注射IFN-α2b1 500 IU/只,03、7、d免疫;5组:狂犬病疫苗腹腔注射0.5 ml/只,03、、71、4 d免疫,于0、12、d腹腔注射IFN-α2b 1 500 IU/只;6组:狂犬病疫苗腹腔注射0.5 ml/只,0、3、71、4 d免疫,于0、12、、37、1、4 d腹腔注射IFN-α2b 1 500 IU/只。34、组于第9天攻击,12、、56、组于第21天攻击后计算其保护率。[结果]狂犬病疫苗与IFN-α2b联合应用组其保护率明显高于其他组,且按免疫程序同时应用IFN-α2b组其保护率最高。[结论]按狂犬病疫苗免疫程序同时应用IFN-α2b组其免疫效果最好,保护率最高。而提前应用IFN-α2b并没有增强狂犬病疫苗的保护率。

一种快速动态响应低电压纹波功率因数校正变换器的控制策略

功率因数校正(PFC)变换器的输出侧并联有源储能单元,可有效抑制PFC变换器输出侧的二次纹波。以采用Buck型有源储能单元的三相交错并联Boost PFC变换器为研究对象,对其控制策略进行研究。首先,为弥补传统Boost PFC双闭环控制中电流参考畸变与电压外环动态响应差的不足,提出基于生成正弦基准的Boost PFC双前馈控制策略,改善了负载和输入电压瞬变条件下输出电压的稳定性,并加快了切相速度。进而,提出一种有源储能单元的自适应控制策略,该方法在满足电压纹波要求的前提下,考虑负载、输入电压频率与PFC输出电容对有源储能单元电流参考的影响,以达到有源储能单元控制简化和效率优化的目的。最后,基于一台1.3kW原理样机的实验结果验证了所提控制策略的有效性。

近年来流感病毒抗原性变异的比较

目的了解流感病毒既往流行株与当前流行株抗原性变异的幅度.方法用2000年以来流行的与当前流行的A1、A3、B三株流感病毒株的标准抗原与免疫血清作交叉血凝抑制试验,根据所得数据计算抗原比,进行抗原性变异幅度分析.结果A1型2个流感病毒毒株间的抗原比为2.6;A3型4个流感病毒毒株间的抗原比为1.2～13.2;B型5个流感病毒毒株间的抗原比为1.8～22.6.结论自2000年以来,A1、A3型流感病毒抗原性变异幅度较小,B型流感病毒抗原性变异幅度较大.

新型磁性亲和吸附剂的制备及其在尿激酶纯化中的应用研究

合成了磁性聚乙烯醇和磁性聚甲基丙烯酸甲酯微球 ,并以它们为基质 ,用环氧氯丙烷、羰基二咪唑或溴化氰活化后 ,分别键合氨基乙酸、 6-氨基己酸、乙二胺或己二胺为间隔臂 ,用 1 -乙基 -3 -(3 -二甲基氨丙基 )碳二亚胺盐酸盐或羰基二咪唑为偶联试剂 ,分别偶联对氨基苯甲脒、 L-精氨酸甲酯、胍基乙酸或胍基己酸配体 ,合成了 1 7种磁性亲和吸附剂 ,并用于尿激酶粗品的纯化 .与前文制备的 8种磁性亲和吸附剂作对照 ,研究了基质、活化试剂、间隔臂分子、偶联试剂及配体等因素对尿激酶纯化效果的影响 .这些磁性亲和吸附剂在尿激酶的纯化中取得了较好的效果 ,大多数磁性亲和吸附剂的活性回收率在 40 %～ 70 %之间 ,纯化倍数为 1 5～ 40 ,吸附容量为 0 .0 8～ 0 .2 mg/m L.

T淋巴细胞-E玫瑰花试验检测胸腺肽生物学活性影响因素的探讨

欲完善和改进T细胞-E玫瑰花试验的检测条件,提高制品生物学活性检测的准确性.探究了E玫瑰花试验的影响因素.观察比较不同的脱E受体法、淋巴细胞和绵羊红细胞的比例、Hank's液的pH、离心速度对形成E玫瑰花结花率的影响以及染色和计数时间对E玫瑰花结花率观察的影响.观察不同来源的淋巴细胞与不同种红细胞形成E玫瑰花的相关情况.实验显示,脱E方法的优化更能反映胸腺肽制品的生物学活性,E玫瑰花的结花率明显优于常规脱E法.Hank's液的pH在7.0～7.5之间结花率为最佳.淋巴细胞和绵羊红细胞的最适比例为1∶20.离心速度以800r/min为宜.染色后4℃放置,16～20 h内观察为结果的最佳观察时间.豚鼠胸腺与家兔红细胞以及小牛胸腺与绵羊红细胞均具有相关性形成E玫瑰花.结果证明,优化试验条件有利于提高制品生物学活性的准确率.

神经内分泌因子对体外培养肝细胞ApoB100 mRNA丰度的影响

目的分析神经内分泌因子胰岛素、胰高血糖素和瘦蛋白对体外培养肝细胞ApoB100 mRNA丰度的影响,以阐明其在奶牛肝极低密度脂蛋白(VLDL)组装与转运中的调控作用。方法在体外培养的肝细胞培养液中分别添加胰岛素、胰高血糖素和廋蛋白,应用实时荧光定量PCR法检测神经内分泌因子对体外培养肝细胞中载脂蛋白B100(ApoB100)mRNA丰度的影响。结果随着细胞培养液中胰岛素和瘦蛋白浓度的增加,肝细胞中ApoB100 mRNA的水平逐渐降低;而随着培养液中胰高血糖素浓度的升高,ApoB100 mRNA水平呈先升高后降低的趋势。结论神经内分泌因子胰岛素、胰高血糖素和瘦蛋白通过影响ApoB100 mRNA的表达水平来调控肝细胞中VLDL的组装与转运。

流感病毒毒力评价指标的研究

为了在流感防治的研究中确立可靠、有效的流感病毒毒力评价指标 ,实验对鼠肺敏感株的EID50 和LD50 进行了测定和比较。结果可见 ,EID50 较LD50 更能反映病毒的感染力。因此 ,可用EID50 作为流感病毒的毒力评价指标 ,并建议将动物的平均死亡时间作为一个重要的毒力指标。

乙型肝炎卡介苗联合疫苗免疫豚鼠及小鼠的病理学研究

观察乙型肝炎卡介苗联合疫苗(简称HBV-BCG联合疫苗)皮下免疫豚鼠的毒性病理损伤,及其皮内免疫小鼠的局部毒性反应和可逆性改变,检查乙肝表面抗原是否为促使卡介苗毒力增强的潜在因素。豚鼠及小鼠均分设3组,即对照组、BCG组和HBV-BCG联合疫苗组。按计划免疫豚鼠及小鼠,豚鼠观察至42天全部活杀。小鼠观察至第3、5、7、9、11、15、20、25、30天各活杀3只。大体剖检,常规病理制片,HE染色,病理组织学观察和显微照相。对照组豚鼠及小鼠接种局部皮肤组织及全身各脏器均未见异常。与对照组相比,BCG组和HBV-BCG联合疫苗组豚鼠及小鼠接种局部皮肤均发生非特异性炎症反应,以及由BCG引起的特异性类上皮细胞肉芽肿性炎。2组接种局部皮肤的病理改变相似,未见明显差异。另外豚鼠蹊部、肺门和肠系膜淋巴结皮质内的淋巴滤泡有不同程度增生,生发中心活跃、扩大,副皮质区增宽。肺、肝、脾及其余各脏器均未见与疫苗相关的病理改变。BCG或HBV-BCG联合疫苗免疫豚鼠及小鼠所产生的病变,具有BCG原发性病变特征,均未见干酪样坏死或转向恶性化的结核性病变。证实HBsAg不具有促使BCG毒力增强的潜在危险。

防空群掩护固定目标兵力区分模型构建

兵力区分是防空兵战斗部署的重要环节。传统的区分方法过于笼统,同时针对性不强。对防空群掩护固定目标时兵力区分的原则、方法和程序进行了探讨,并按照目标重要程度排序空袭兵力需求分析防空兵力需求分析兵力分配的思路建立了防空群兵力区分的数理模型。

流感疫苗中卵清蛋白检定方法精确度的探讨

目的 :探讨流感疫苗中卵清蛋白检定法的精确度。方法 :将卵清蛋白标准抗原及待检流感疫苗适当地倍比稀释后进行对流免疫电泳。经与标准抗原的沉淀线对比分析后 ,计算待检样品中的卵清蛋白含量。结果 :流感疫苗中的卵清蛋白测定值可精确到 0 1μg ml。结论 :对流免疫电泳法易于操作 ,精确度较高 。

注射用胸腺肽热稳定性试验的观察

依照2005年版《中国药典》和2003年版《国家药品标准》,考察注射用胸腺肽制剂的热稳定性。将注射用胸腺肽制剂成品3批样品,于温度60℃±2℃、水浴自然光条件下,放置10h,多时段取样,观察其外观、多肽含量、酸碱度、可见异物和生物学活性。结果表明三批供试品的的各项指标均符合国家药品标准规定。注射用胸腺肽具有良好的热稳定性。

细胞培养结合实时荧光RT-PCR法快速检测甲肝病毒滴度的研究

目的建立一种细胞培养与实时荧光RT-PCR相结合的快速检测甲肝病毒滴度的方法。方法根据甲肝病毒(HAV)L-A-1株5'端基因组序列,设计了2条基因特异性引物及一条探针,建立实时荧光RT-PCR法,结合细胞培养检测甲肝病毒滴度,并与ELISA检测法进行比较。结果实验中建立的方法能特异检测甲肝病毒,细胞培养8d检测病毒滴度为lg107.0CCID50/mL。同一样本重复检测3次,批内样本Ct值的变异系数最大为0.89%,批间样本Ct值变异系数最大为1.66%。建立的细胞培养结合实时荧光RT-PCR法(细胞培养8 d)与细胞培养ELISA法(细胞培养28 d)检测甲肝病毒滴度结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论该方法具有快速、灵敏、特异等优点,应用于疫苗常规检测有良好前景。

成纤维细胞生长因子的生理病理作用及应用进展

成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factors,FGFs)以旁分泌或内分泌的方式参与多种生理活动的调节,维护成体组织的正常结构、功能并参与代谢调控。FGFs通过结合配体硫酸乙酰肝素或klotho使成纤维细胞生长因子受体二聚化而发挥生物学作用。过去的十年中,FGFs结构和分子机制的研究成果改变了人们对FGF信号在人类健康和疾病发生、发展中的认识,为以FGF及其受体为靶点的药物开发带来新的突破。文章综述了FGF的生理、病理作用及最新应用研究进展。

3—氰基—2—羟基吡啶磷酸酯的合成

β-酮醛和氰乙酰胺在碱的作用下环化得到3-氰基-2-羟基吡啶,用亚磷酸二乙酯在Atherton-Todd条件下磷酰化可以高产率得到3-氰基-2-羟基吡啶磷酸二乙酯,这些化合物显示了一定的生物活性,并可用于磷酸酯酶抑制剂的活性结构的设计.

重组CHO细胞C_(28)株S基因序列的测定及分析

目的测定重组CHO细胞C28株S基因序列,研究其遗传稳定性,并与已全基因序列测定的乙型肝炎病毒的S基因序列进行比较分析,预测和揭示现有疫苗株对当前疾病流行株的防病效果。方法从C28株中选取第22代、24代2、5代2、7代、28代2、9代3、0代、31代3、2代3、3代和34代细胞,根据GenBank中C基因型adr亚型乙型肝炎病毒的全基因序列设计引物。采用酚-氯仿法抽提CHO细胞基因组DNA,用PCR法扩增各代次细胞的S基因,回收700 bp左右的目的片段,克隆至pMD18-T载体上进行序列测定。利用生物学软件MEGA4.1和BioEdit进行S基因序列同源性分析,绘制系统进化树,分析与其他HBV病毒株S基因的同源性。应用实验动物测定C28株生产的重组乙型肝炎疫苗的效价。结果 C28株十一个代次之间S基因序列核苷酸和氨基酸同源性均为100%;C28株十一个代次S基因与其他病毒株S基因比较,与C基因型乙型肝炎病毒同源性最高,与其他基因型乙型肝炎病毒的核苷酸同源性达91.4%～95.1%,氨基酸同源性达84.5%～93.3%。免疫NIH小鼠结果显示5批重组乙型肝炎疫苗的效价均符合标准。结论 C28株S基因在传代及保存过程中具有较高的稳定性,对当前疾病流行株有较好的防病效果。

阴、阳离子交换法从米糠菲汀中提取植酸

本文研究了从米糠中提取菲汀，进而用阴、阳离子树脂交换法提取植酸的全过程。提出了合理的工艺条件和适应于工业化生产的途径。

rh-aFGF卡波姆940凝胶对1型糖尿病大鼠皮肤创伤的修复作用

目的研究重组人酸性成纤维细胞生长因子(recombinant human acidic fibroblast growth factor,rh-aFGF)卡波姆940凝胶对糖尿病大鼠皮肤创伤修复作用。方法使用STZ诱导产生SD大鼠糖尿病模型,建立全层皮肤切除和烫伤两种皮肤创伤模型,设置对照组、赋形剂组、90 AU rh-aFGF凝胶组和270 AU rh-aFGF凝胶组4个实验组。用创伤面积和愈合速率评价各组疗效;HE染色观察创面中成纤维细胞、肌成纤维细胞、胶原纤维和毛细血管生长情况;半定量评分评价rh-aFGF诱导的上述指标生长情况。结果 rh-aFGF卡波姆940凝胶明显减少糖尿病SD大鼠全层皮肤切除和烫伤模型的皮肤损伤面积(P<0.05),促进其创伤愈合速率(P<0.05)。HE染色结果表明,rh-aFGF卡波姆凝胶明显促进成纤维细胞和胶原纤维增殖评分(P<0.05)。结论 rh-aFGF卡波姆凝胶可能在一定程度上保护创面微环境和保护rhaFGF发挥生物学活性,促进成纤维细胞增殖和胶原纤维沉积,从而促进糖尿病SD大鼠皮肤创伤愈合过程,有望成为一种治疗糖尿病溃疡的新制剂。