PDGF-BB对放射诱导骨髓抑制模型小鼠的造血保护作用研究

目的:探讨血小板衍生生长因子(PDGF)-BB对放射诱导骨髓抑制模型小鼠的骨髓保护作用和减少人巨核细胞系Meg-01细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法:用4 Gy的^(137)Csγ射线辐照小鼠,建立小鼠骨髓抑制模型。在小鼠辐照前(d 0)和照射后d 7、14和21对小鼠进行体重称量和外周血细胞计数;取d 21处死后的小鼠胸骨组织进行形态学观察和股骨骨髓细胞进行集落细胞形成单位的培养。无血清培养Meg-01细胞24 h诱导细胞凋亡,PDGFBB处理Meg-01细胞48 h后进行细胞计数,应用流式细胞术检测细胞的早期凋亡、线粒体膜电位(JC-1)和凋亡蛋白酶CasPpase-3活性的表达。结果:小鼠外周血计数结果表明,PDGF-BB可刺激放射后小鼠白细胞、红细胞和血小板的恢复(<0.05),对白细胞尤为明显。PDGF-BB处理组小鼠可观察到骨髓增生,巨核细胞及其祖细胞数量均高于对照组。细胞集落形成的培养结果显示,PDGF-BB处理组可明显刺激CFU-MK、CFU-GM、BFU-E和CFU-F的形成。不同浓度PPDGF-BB处理Meg-01细胞后,结果显示,PDGF-BB在5-50 ng/ml浓度范围内对细胞具有较强的促进增殖作用(<0.001)。PDGF-BB(50 ng/ml)可明显降低Annexin V的阳性表达(P<0.01);与PDGF-BB处理组相比,对照组细胞中线粒体膜电位下降,表明凋亡细胞数量明显增加(PP<0.01);PDGF-BB处理组的Caspase-3的表达明显低于对照组(<0.05)。结论:PDGF-BB对放射诱导骨髓抑制模型小鼠的造血系统具有保护作用,尤其是巨核细胞及其祖细胞。对Meg-01有促增殖和抗凋亡作用,其抗凋亡作用可能是通过JC-1和Caspase-3通路介导的。

预防及抢先治疗下异基因干细胞移植后巨细胞病毒感染现状分析

目的了解预防及抢先治疗下异基因干细胞移植后巨细胞病毒(CMV)感染现状,为改进治疗措施、提高治疗效果提供依据。方法统计进行异基因干细胞移植且针对CMV进行预防、监测及抢先治疗的患者310例,分析CMV感染特点。结果异基因干细胞移植310例,发生CMV感染81例,感染率26.1%。其中CMV血症78例,发生率24.3%(78/310)。CMV病3例(视网膜炎2例,CMV脑炎1例),发生率1%(3/310)。CMV感染组移植物抗宿主病发生率高。未发现严重药物不良反应。治疗后,78例CMV转阴,占96.3%(78/81),但其中16例转阴后再次出现阳性,占19.8%(16/81)。3例持续阳性(其中2例死亡,1例放弃后死亡),占3.7%(3/81)。反复或持续阳性者监测淋巴细胞亚群,均显示NK细胞升高,CD4^+T细胞降低,CD8^+T细胞升高。结论预防及抢先治疗是异基因干细胞移植后CMV感染的有效方法,在此治疗方案下病毒复发率仍高,需定期监测,部分持续阳性需寻找新的方法。

移植预处理中使用抗人胸腺细胞免疫球蛋白后降钙素原检测对细菌感染的诊断价值探讨

目的 探讨造血干细胞移植（HSCT）预处理治疗中应用抗人胸腺细胞免疫球蛋白（ATG）后监测血浆降钙素原（PCT）对区分细菌感染和非感染性炎症是否有帮助。方法 本研究纳入了60例重型地中海贫血患儿,这些患儿均接受了HSCT,预处理方案包括环磷酰胺、氟达拉滨、白舒非、噻替哌以及ATG（总剂量：即复宁ATG 5 mg/kg,费森尤斯ATG;-F 15~30 mg/kg,从移植前的-3 d至-1 d分3次应用）。移植前的-3d至0d每天早晨抽取血液标本检测PCT和C反应蛋白（CRP）,同时记录每日体温变化。根据是否应用抗生素,患者被分为使用抗生素组（30例）,未使用抗生素组（30例）,其中又根据血培养结果分为血培养阳性组（7例）,血培养阴性组（47例）,另有6例未在1周内行血培养。结果使用抗生素组与未使用抗生素组之间4 d PCT值变化趋势相同,治疗方法与时间之间无交互作用（F=1.570,P=0.208）,两组间差别无显著性（P=0.061）。血培养阳性组与血培养阴性组之间PCT值变化趋势不同,血培养结果与时间之间有交互作用（F=3.747,P=0.021）,各时点内两组间比较差异均无显著性（P值均≥0.058）。以4 d PCT值作为诊断感染的ROC：曲线的曲线下面积（AUC）均小（≤0.567）,诊断价值低。结论 本研究表明,HSCT预处理治疗中应用ATG的患儿PCT值增高对于区分细菌感染和非感染性炎症反应没有意义。

TSP-1通过CD36/Caspase-3诱导巨核细胞白血病细胞系Meg-01凋亡的研究

目的:探讨血小板反应蛋白-1(TSP-1)对人巨核细胞白血病细胞系Meg-01凋亡的影响及可能的机制。方法:应用流式细胞术和免疫细胞化学染色检测Meg-01细胞CD36抗原的表达;采用不同浓度的TSP-1和CD36抗体FA6-152作用于Meg-01细胞,培养48 h,应用流式细胞术检测细胞的早期凋亡和凋亡蛋白酶Caspase-3的活性;采用细胞计数和小鼠巨核细胞集落(CFU-MK)培养探究TSP-1对巨核细胞生长分化的影响。结果:流式细胞术和免疫细胞化学染色结果均显示,Meg-01细胞表面有CD36抗原的表达。TSP-1(5μg/ml)对Meg-01细胞的生长起到抑制作用,而对CD36-的M-07e细胞作用不明显;加入CD36抗体FA6-152(5、10和25μg/ml)之后,TSP-1的抑制作用明显减弱。TSP-1(2.5、5和7.5μg/ml)增加Annexin V的阳性表达(P<0.01),并激活Caspase-3(P<0.01),表明TSP-1诱导细胞凋亡的作用显著;加入CD36抗体FA6-152(25μg/ml)之后,TSP-1诱导Meg-01细胞凋亡的作用明显减弱。TSP-1(5、10和25μg/ml)对小鼠骨髓细胞的CFU-MK形成也有明显的抑制作用,而β-TG则没有这种作用;CD36抗体FA6-152(25μg/ml)可明显减弱TSP-1对CFU-MK的抑制作用。结论:TSP-1有可能通过CD36/Caspase-3诱导巨核细胞白血病细胞系Meg-01细胞凋亡,这为临床上治疗巨核细胞白血病提供了潜在的新药开发研究靶点。

先天性角化不良症患儿的临床特征和基因分析:附1例报告

目的探讨先天性角化不良症(dyskeratosis congenita,DC)患儿的临床特征和基因特点。方法回顾我院收治的1例DC患儿的临床资料,提取患儿外周血DNA,PCR扩增DC的7个热点基因,包括DKC1、TERT、TERC、TINF2、NOP10、NHP2、WRAP53,进行DNA测序和基因分析。结果患儿外周血标本检测出DKC1基因中一个半合子变异:c.85-15T>C。其母亲为相应变异杂合携带者,并出现部分先天性角化不良的临床表现如指(趾)甲变形等。结论当低龄患儿出现典型皮肤黏膜改变、骨髓衰竭、肿瘤易感性、有肿瘤家族史时,应考虑到DC可能。早期行相关基因检测可提高临床诊断的诊断率,减少误诊、漏诊。

噢!中草药

一、主题缘起初春的一个早晨,昕泽来园后就跑来跟我们说“:老师,我今天带了两个杯子,我感冒了,妈妈让我喝这杯子里的水。”他的话一下子吸引了其他孩子,纷纷跑过来围着他,好奇地问:“这是什么水啊?”“好喝吗?这个喝了有什么用啊?”“这肯定是药吧,我猜肯定不好喝。”“给我闻一闻,我能喝吗?”……昕泽开心地回答说:“哈哈哈,你们不知道吧?这是葱姜水,我姥姥给我熬的,驱寒气的。”“噢,就是中药吧,我也喝过中药,很苦的。”

大班幼儿批判性思维能力的培养研究——基于讨论式学习的思考

21世纪是"创造教育的世纪",要培养创造性人才,就要注意在教育过程中发展幼儿的创新能力,而培养批判性思维能力对提高幼儿的创造性具有非常重要的作用。本文主要探索批判性思维能力的培养与讨论式学习的关系,以求通过建立能引发幼儿质疑的心理环境、确立开放性的讨论题、采取灵活多变的讨论形式和实施针对性的指导这样的尝试来使幼儿在讨论活动中学得轻松自由,学得主动积极,从而培养其批判性思维能力。