基于转录组挖掘香菇木质纤维素降解相关基因

对用木屑培养料(木屑组)和PDA培养基(PDA组)培养的香菇(Lentinula edodes)菌丝进行转录组测序分析,对两组样本进行主成分分析和相关性分析,对差异表达基因进行筛选和聚类分析;以PDA组为对照,对木屑组中显著差异表达的基因进行筛选以及GO功能富集、KEGG代谢通路分析;采用定量PCR方法验证9个差异表达基因表达情况。结果表明:培养基质造成的基因表达差异大于菌株,8个样本可分为两组(PDA组和木屑组);与PDA组相比,木屑组有677个基因的表达存在显著差异,其中445个基因(与木质纤维素降解相关的180个)上调,232个基因(与木质纤维素降解相关的38个)下调,表明木屑培养基能够显著诱导木质纤维素降解相关基因表达。GO功能富集分析结果表明,上调表达基因在氧化还原酶活性、水解酶活性、代谢过程、水解酶活性(水解O-糖基化合物)、水解酶活性(作用于糖基键)等代谢过程中显著富集。KEGG代谢通路分析结果表明,上调表达基因在溶酶体、转运蛋白、氨基糖和核苷酸糖代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、淀粉和蔗糖代谢、肽酶和抑制剂通路中显著富集;下调表达基因在MAPK信号通路-酵母、不饱和脂肪酸生物合成、二噁英降解通路中显著富集。研究结果为揭示香菇培养基质利用的分子机制和选育高效利用基质菌株提供参考。

通过限制培养基中氮元素含量促进香菇分泌木质素过氧化物酶

为考察香菇(Lentinula edodes)是否分泌木质素过氧化物酶(lignin peroxidase,LiP),采用4种(酵母麦芽浸膏、完全、基础、PDA)培养基培养香菇菌株,以赤芝(Ganoderma lucidum)为对照,通过固体显色法检测各菌株对显色底物(亮蓝、天青B)的脱色情况;以刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)和赤芝为对照,测定各菌株液体培养后制备的粗酶液中木质纤维素降解酶的活性。以氮元素含量为0.05%胰蛋白胨(限氮培养基)培养香菇菌株,以刺芹侧耳为对照,通过固体显色法检测限氮培养基中各菌株对显色底物(亮蓝、天青B、活性黑5)的脱色情况;并以酒石酸缓冲液(pH 3.5)、天青B(底物)、藜芦醇(电子供体)、H_(2)O_(2)(活化剂)配制脱色反应体系,测定香菇菌株液体培养后制备的粗酶液中LiP的活性。结果表明:在4种培养基中培养的香菇菌株未能使亮蓝与天青B脱色,赤芝使两者均脱色;且在香菇粗酶液中未检出LiP活性。采用限氮培养基培养的香菇菌株使亮蓝与天青B脱色;采用PDA与限氮培养基培养的香菇菌株均未使活性黑5脱色,刺芹侧耳使其脱色。在实验范围内,香菇菌株于限氮培养基上培养12 d后,随着培养时间增加,所有菌株LiP活性均上升;12 d时不同菌株LiP活性无差异;22 d时菌株1504 LiP活性(39.74 U·L^(-1))较强,对天青B的脱色率在反应12 h时最高可达66.21%;菌株215、a 2 sm 99、gsm 207 LiP活性次之,分别为29.86、29.24、27.34 U·L^(-1);菌株bsm 83活性较弱为13.28 U·L^(-1)。研究结果表明通过限制培养基中氮元素的含量可以促进香菇分泌木质素过氧化物酶。

平安诚信铸辉煌 创业创新谋发展

乔恕,佳木斯安诚轿车销售服务有限公司董事长。 当他走出校园、走上工作岗位时,就与汽车结下了不解之缘。在汽车行业摸爬滚打了三十余年的他,始终坚持着＂双品牌战略＂发展,在1996年9月和1998年8月,先后创建了佳木斯地区最早的两家汽车4S店,即一汽-大众大众品牌4S店和保定长城汽车品牌4S店。

宝来1.8L轿车冷车运转不稳故障一例

故障现象：一辆2003年生产的宝来1．8L轿车，行驶里程7万km。据用户反映，该车每天早上刚起动时发动机运转不稳、抖动，但工作几分钟后就正常了，冬季白天在外面停放一段时间后也会出现这种现象。

5GSH-8型谷物干燥机的研制

介绍了 5GSH 8型谷物干燥机的工艺流程、结构特点及主要设计计算。该机采用四级顺流干燥工艺 ,降水幅度大、干燥质量好、单塔连续作业 ,高水分谷物可一次降到安全水分 ,并配有较完善的自控系统 ,适于水稻。

操纵装置设计的人机工程问题初探

汽车操纵装置的类型很多,如何让驾驶员轻松自如、舒适方便的操纵是汽车设计者所要考虑的问题。本文从人机工程学的角度对操纵装置的设计问题进行了探讨。

外源vpl1基因对香菇双核菌丝体木质素降解酶活性和基因表达的影响

为探索刺茎侧耳多功能过氧化物酶vpl1基因在香菇菌丝体中的异源表达及功能,对比分析了野生型双核菌丝体与拥有1个或2个转化子的双核菌丝体在木质素降解酶活性和基因表达上的差异。首先,经过转化子筛选和功能验证,筛选出3个具有vpl1基因的香菇t-Asm136单核转化子。其次,将3个单核转化子与其野生型w-Asm136单核菌丝体分别与实验室已有的香菇t-Bsm83单核转化子与其野生型w-Bsm83单核菌丝体进行单单杂交,获得1个纯野生型双核菌丝体、4个单转化子双核菌丝体和3个双转化子双核菌丝体。最后,仅野生型、1个单转化子和2个双转化子双核菌丝体能在木屑培养基上正常生长。这4个双核菌丝体在木屑培养基上Lac、MnP和VP酶活和对应基因的表达量不同,其中vpl1的导入使双核转化子vpl1基因上调了2-12倍,MnP酶活上调13-30倍,mnp2a表达量上调4-18倍,mnp2b表达量上调6-11倍。证实了vpl1的导入能够增强MnP的酶活力和基因的表达水平。

轴承机房里的鏖战

“终于完成了.”“我们成功了.”10月17日17时,在山东能源淄矿集团唐口煤业公司提升中心,一阵阵欢呼声传来。听着“轰轰轰轰”的副井主提升机正常运转声,施工人员疲惫的脸上绽放开笑脸。原来,为了节约外委施工费,该公司提升中心28名施工人员经过56小时的鏖战,克服了主提升机电机转子及滚筒拆装、起吊沉重、工序繁琐等困难,成功地自主更换了副井主提升机非电机侧轴承,打破了一直以来依赖外委维修的惯例,节约了施工费用20余万元。