骨髓间充质干细胞移植对慢性哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的影响

目的探讨同种异体骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对慢性哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响。方法 40只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、BMSC对照组、哮喘模型组和BMSC治疗组。从雄性BALB/c小鼠分离BMSC。用卵白蛋白(OVA)制备慢性哮喘模型。观察BMSC移植对慢性哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的影响,并采用流式细胞术检测BMSC对脾组织CD4+CD25+调节性T细胞比例的影响。结果哮喘模型组支气管上皮黏膜脱落,上皮黏膜有杯状细胞增生,部分管腔内有黏液栓塞,气道、血管旁有大量炎性浸润,以及气道平滑肌细胞增生和肥大。正常对照组及BMSC对照组无气道炎症及气道重塑的表现,而BMSC治疗组气道炎症及气道重塑明显减轻。与BMSC对照组及正常对照组比较,哮喘模型组CD4+CD25+调节性T细胞占淋巴细胞的比例显著降低(P<0.05);与哮喘模型组比较,BMSC治疗组CD4+CD25+调节性T细胞占淋巴细胞的比例明显提高(P<0.05);BMSC治疗组与正常对照组及BMSC对照组无显著差异。结论 BMSC移植能明显减轻慢性哮喘小鼠气道炎症及气道重塑程度,并能上调外周CD4+CD25+调节性T细胞的比例。

骨髓间充质干细胞对慢性哮喘小鼠血清白细胞介素12和白细胞介素4水平的影响

背景:研究显示,骨髓间充质干细胞移植通过减轻炎症程度来改善急性肺损伤的病情,而骨髓间充质干细胞移植对哮喘疾病的研究甚少。目的:观察慢性哮喘小鼠移植同种异体骨髓间充质干细胞后,其血清白细胞介素12和白细胞介素4水平的变化。方法:取40只雌性BALB/c小鼠,随机分为4组,正常对照组和骨髓间充质干细胞对照组以PBS致敏及激发小鼠,于第21天激发前气管内注射PBS或骨髓间充质干细胞30μL。哮喘模型组和骨髓间充质干细胞治疗组用鸡卵白蛋白制备慢性哮喘模型,于第21天激发前气管内注射PBS或骨髓间充质干细胞30μL。采用ELISA法检测各组小鼠血清炎症因子水平。结果与结论:病理提示哮喘模型组支气管上皮黏膜脱落,同时上皮黏膜有杯状细胞增生,部分管腔内大量黏液栓塞;气道、血管旁有大量炎性细胞浸润以及气道平滑肌细胞增生和肥大。正常对照组及骨髓间充质干细胞对照组无气道炎症及气道重塑的表现,而骨髓间充质干细胞治疗组气道炎症及气道重塑明显减轻。对比骨髓间充质干细胞对照组及正常对照组,哮喘模型组白细胞介素12明显减低,白细胞介素13和白细胞介素4明显增高;而骨髓间充质干细胞治疗组较哮喘模型组白细胞介素12明显升高,白细胞介素4明显降低。结果表明骨髓间充质干细胞治疗哮喘可能通过降低白细胞介素4水平,提高体内白细胞介素12水平,从而改善气道炎症及气道重塑的程度。

间充质干细胞发挥治疗作用的机制研究

间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）是属于中胚层的一类多能干细胞,具有强大的增殖能力和多向分化潜能。MSCs分布于骨髓、肝脏、脾脏、肌肉、

间充质干细胞是否可以用于哮喘的治疗

支气管哮喘是由嗜酸粒细胞、肥大细胞和T淋巴细胞等多种细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾患,主要病理特点为上皮层大量的以嗜酸粒细胞为特征的炎性细胞浸润及以上皮下纤维化、平滑肌增生、胶原蛋白沉积为主的气道重塑。哮喘的发病机制较为复杂,而炎症因子表达异常在哮喘的发病机制较为复杂，而炎症因子表达异常在哮喘的发病中发挥主要作用。

电子支气管镜诊治支气管异物的体会

目的总结支气管异物诊断与治疗体会,评价电子支气管镜在诊治支气管异物中的价值。方法对67例支气管异物患者的临床资料进行回顾性分析。结果支气管异物以右侧多见,电子支气管镜钳取支气管异物成功率达94.2%。结论电子支气管镜对支气管异物的诊治有重要意义。

P21 ras、骨桥蛋白及CD44v6与肺鳞癌和腺癌关系的研究

目的研究P21 ras、CD44v6、骨桥蛋白(OPN)在肺鳞癌和腺癌中的表达及其与肺鳞癌和腺癌预后的相互关系。方法应用免疫组化方法对96例非小细胞肺癌患者分别检测P21ras蛋白、CD44v6、OPN的表达,分析P21ras蛋白、CD44v6、OPN与肺癌组织学类型、分化程度、TNM分期等的关系,并通过34例随访病例了解以上指标与肺癌预后的关系。结果⑴中OPN及CD44v6在鳞癌中表达率高于腺癌,而P21ras蛋白则在鳞癌及腺癌间表达差异无统计学意义,但P21ras蛋白、CD44v6、OPN三者共同表达在鳞癌则高于腺癌;(2)晚期肺癌P21ras蛋白、CD44v6、OPN的阳性表达率均显著高于早期患者,而CD44v6及OPN则在淋巴结已有转移者阳性表达率显著高于无淋巴结转移者;(3)P21ras蛋白、CD44v6、OPN阳性组累积生存率低于阴性组。结论 P21ras蛋白、CD44v6、OPN在鳞癌三者共同高表达,三者共同作用可能与肺鳞癌的发生、发展密切相关,P21ras蛋白、CD44v6、OPN的阳性表达预示着非小细胞肺癌不良预后。

DNA异倍体测定对良恶性胸腔积液鉴别诊断价值的研究

目的探讨流式细胞术检测DNA异倍体对良恶性胸腔积液的诊断价值。方法选取胸腔积液住院病人50人,其中确诊恶性胸腔积液30人,良性胸腔积液20人。各例均行胸水脱落细胞学、流式细胞术DNA含量、胸水癌胚抗原(CEA)及腺苷脱氨酶(ADA)测定。结果恶性胸腔积液组异倍体阳性率73.3%;良性胸腔积液异倍体阳性率5.0%,两组相比有统计学意义(P(0.01)。恶性胸液组CEA平均值为(34.8±14.9)μg/L;良性胸液组CEA平均值为(4.7±1.5)μg/L,两组相比差异有统计学意义(P(0.01)。恶性胸液组ADA平均值为(27.1±10.8)IU/ml;良性胸液组ADA平均值为(52.7±22.2)IU/ml,两组相比差异有统计学意义(P(0.01)。流式细胞术DNA含量分析对恶性胸水诊断的敏感性为73.3%、特异性为85.0%;流式分析联合胸水CEA检测对恶性胸水诊断的敏感性提高到83.3%,特异性提高到100%。结论流式细胞术细胞DNA分析,是对细胞病理学、肿瘤标志物分析的有益补充,具有良好的临床应用价值。

端粒酶活性的测定在鉴别良、恶性胸腔积液中的价值

目的研究端粒酶在良、恶性胸腔积液中的表达,评价端粒酶在鉴别良、恶性胸腔积液中的价值。方法用端粒重复序列扩增法(TRAP)检测20例恶性胸腔积液和19例良性胸腔积液中端粒酶的表达,分析良、恶性胸腔积液端粒酶表达的差异。结果20例恶性胸水脱落细胞中端粒酶活性检测阳性者9例,阴性11例,端粒酶活性阳性表达率为45%;19例良性胸水脱落细胞中4例端粒酶活性阳性表达,15例阴性,端粒酶活性阳性表达率为21.1%;4例TRAP检测阳性患者中肺结核患者2例,另外2例为肺炎旁胸腔积液;经统计学分析良、恶性胸腔积液患者间端粒酶活性表达无显著性差异。结论本研究结果尚不足以证明端粒酶可作为鉴别诊断良、恶性胸腔积液的生物学标志物。

八段锦与有氧运动训练对稳定期慢性阻塞性肺疾病患者肺康复效果及免疫功能的影响

目的对比八段锦与有氧运动训练两种不同康复模式对稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺康复效果与免疫功能的影响。方法前瞻性纳入就诊的180例COPD稳定期患者作为研究对象,随机分为八段锦组和对照组。在COPD标准化治疗的基础上,八段锦组采用八段锦康复训练,对照组采用有氧踏车运动训练,治疗6个月。并对患者每3个月进行1次全面评估,通过比较两组患者肺功能、6 min步行试验(6MWT)距离、COPD评估测试问卷评分(CAT评分)、Borg评分、AD评分,评价肺康复效果。通过检测血中CD3、CD4、CD8水平,比较两组患者的免疫功能。结果干预前八段锦组肺功能第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、第1秒用力肺活量占预计值的百分比(FEV_(1)%)与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后3个月、6个月八段锦组肺功能明显优于治疗前以及对照组(P<0.05)。干预前八段锦组6MWT、CAT评分、Borg评分、AD评分与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);干预后3个月、6个月八段锦组6MWT、CAT评分、Borg评分、AD评分明显优于对照组(P<0.05);且6个月时各项指标均优于治疗3个月时(P<0.05)。干预前八段锦组CD3、CD4、CD8水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),干预后3个月、6个月八段锦组CD3、CD4水平明显升高,CD8水平明显降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);6个月时CD3、CD4水平均优于治疗3个月时(P<0.05)。结论将八段锦应用于稳定期COPD患者的肺康复训练中并长期坚持下去,可明显提高患者的肺康复效果并改善患者的免疫功能指标。

新型冠状病毒肺炎患者6例临床特征和影像学表现

目的总结6例新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者的临床特征和影像学表现,为COVID-19早期确诊和临床干预提供依据。方法选择上海中医药大学附属第七人民医院2020年1月1日至2020年2月22日严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测阳性的6例COVID-19患者,回顾性分析流行病学史、临床表现、影像学资料和实验室检查。结果6例患者均有明确的武汉旅行或居住史,4例患者有发热,3例有咳嗽,2例有流涕、咽痛等上呼吸道症状,2例有头痛、肌肉酸痛等全身症状。6例患者胸部CT检查均可见肺部异常表现,病灶均为双侧分布,下肺病灶多于上肺,主要表现为双侧肺野外带多发磨玻璃影、实变影、“铺路石”征及不同程度纤维化。发病后较晚行胸部CT检查可见肺实变和明显纤维化。结论COVID-19影像学具有一定的特征性表现,结合患者流行病学史、临床表现和SARS-CoV-2核酸检测能早期诊断。

骨髓间充质干细胞分泌半乳凝素1可抑制哮喘小鼠的气道炎症

背景:课题组前期研究表明移植骨髓间充质干细胞能减轻哮喘气道炎症程度且能调节哮喘炎症因子水平,进一步体外研究提示骨髓间充质干细胞分泌的半乳凝素1能影响树突状细胞的免疫功能,而骨髓间充质干细胞分泌的半乳凝素1对哮喘的作用尚不明确。目的:观察骨髓间充质干细胞分泌的半乳凝素1对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法:构建小鼠pLVX-gal-1-shRNA并感染骨髓间充质干细胞。取40只雌性BALB/c小鼠,随机分为正常对照组、哮喘模型组、骨髓间充质干细胞组、重组半乳凝素1蛋白组、干扰半乳凝素1表达的骨髓间充质干细胞组,对比各组小鼠肺泡灌洗液中炎症细胞总数及分类的差异,采用苏木精-伊红染色观察各组小鼠气道炎症变化。结果与结论:(1)针对小鼠半乳凝素1基因设计了4条RNA干扰序列,通过Real-timePCR验证249干扰位点的干扰序列对半乳凝素1基因干扰效果最佳,并以此进行后续的体内实验;(2)与正常对照组相比,哮喘模型组肺泡和气道周围有大量的炎症细胞聚集,以嗜酸性粒细胞为主;骨髓间充质干细胞组或重组半乳凝素1蛋白组气道及肺泡灌洗液中炎症细胞显著减少,而半乳凝素1基因干扰的骨髓间充质干细胞输注对哮喘小鼠气道及肺泡灌洗液炎症细胞聚集无明显影响;(3)结果表明骨髓间充质干细胞分泌的半乳凝素1对哮喘小鼠气道炎症有明显的抑制作用。

基于微信平台的自我管理干预对COPD患者肺功能及生活质量的影响

目的研究基于微信平台的自我管理干预对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能及生活质量的影响。方法选择2017年1月至2018年12月在我院治疗的COPD患者80例,采用随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组各40例。对照组患者参照《COPD自我管理知识手册》进行自我管理,观察组患者采用基于微信平台的自我管理干预,比较两组患者的肺功能、生活质量、焦虑抑郁及运动耐力等指标。结果干预前,两组患者的第1秒用力呼气容积(FEV1)、第1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV1/FVC)、6分钟步行试验(6 MWT)和Borg评分相近(P>0.05);干预后,两组患者的肺功能和运动耐力均明显提高,观察组患者的FEV1、FEV1/FVC和6 MWD均高于对照组,Borg评分低于对照组(P<0.05)。干预后,观察组的呼吸症状、活动受限、疾病影响和圣乔治呼吸问卷(SGRQ)总分均低于对照组(P<0.05)。干预前,两组患者的医院焦虑抑郁情绪测量表(HAD)评分和抑郁自评量表(SDS)评分相近(P>0.05);干预后,观察组的HAD评分和SDS评分均低于对照组(P<0.05)。结论基于微信平台的自我管理干预可以明显提高COPD患者的肺功能,提高运动耐力和生活质量,缓解患者的焦虑抑郁情绪和呼吸困难症状,值得在临床推广应用。

自拟平哮汤治疗对支气管哮喘急性发作期患者外周血嗜酸粒细胞及IgE水平的影响

目的评价自拟平哮汤治疗支气管哮喘(简称哮喘)急性发作期的临床疗效、外周血嗜酸性粒细胞及IgE水平。方法将62例符合纳入标准患者随机分为治疗组32例和对照组30例。对照组采用布地奈德福莫特罗吸入剂及多索茶碱等药物治疗,治疗组在对照组的基础上加服自拟平哮汤。两组均4 d为1个疗程,共3个疗程。观察两组有效率、缓解时间、中医证候及最大呼气峰流速PEF、EOS、IgE指标。结果治疗组总有效率为96.88%,第1疗程临床症状两组均有缓解,治疗组优于对照组(P<0.05);治疗组患者在第1疗程后PEF、EOS、IgE均较治疗前改善(P<0.05);治疗组中患者的PEF、EOS、IgE改善较对照组明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论自拟平哮汤联合解痉平喘等药物治疗哮喘,能明显改善哮喘急性发作临床症状,缩短治疗时间,改善中医证候及PEF、EOS、IgE,效果明显优于单纯西药治疗。

长链非编码RNA-H19特异性吸附微RNA-760调控nanog基因表达促进非小细胞肺癌细胞增殖和迁移

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)-H19对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移的影响及分子机制。方法收集2015年10月至2016年5月海军军医大学(第二军医大学)长海医院确诊的20例NSCLC患者手术切除的NSCLC组织及相应的癌旁正常组织。通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测NSCLC组织及癌旁正常组织,人NSCLC细胞系A549、NCI-H1299和人正常肺上皮细胞系BEAS-2B中lncRNA-H19的表达。在A549细胞中过表达lncRNA-H19后,采用CCK-8法和Transwell实验分别检测细胞的增殖和迁移能力。利用生物信息学分析预测lncRNA-H19与微RNA(miRNA)-760的结合位点,通过双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA-H19对miRNA-760的吸附作用,采用qPCR和蛋白质印迹法分别检测lncRNA-H19过表达对miRNA-760及下游靶基因nanog表达的影响。通过对A549细胞转染miRNA-760模拟剂过表达miRNA-760后,检测过表达miRNA-760对lncRNA-H19促进NSCLC细胞增殖和迁移作用的影响。结果LncRNA-H19在NSCLC组织和A549、NCI-H1299细胞中均呈高表达,分别与其在癌旁正常组织和BEAS-2B细胞中的表达水平相比差异均有统计学意义(P均<0.01)。与对照组相比,过表达lncRNA-H19后A549细胞的增殖能力增强(P<0.05)、迁移能力提高(P<0.01)。在线数据库starBase v3.0预测分析结果显示lncRNA-H19能特异性吸附miRNA-760。双荧光素酶报告基因检测结果显示lncRNA-H19与miRNA-760之间存在特异性结合。与对照组相比,过表达lncRNA-H19可抑制A549细胞中miRNA-760的表达(P均<0.05),并促进其下游基因nanog在mRNA和蛋白水平的表达(P均<0.01)。过表达miRNA-760可抑制lncRNA-H19对A549细胞增殖和迁移的促进作用,与lncRNA-H19过表达组相比差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论LncRNA-H19可通过特异性吸附miRNA-760调控nanog基因表达,从而促进NSCLC细胞增殖和迁移。

NGS检出微小微单胞菌肺炎1例及文献复习

微小微单胞菌(Parvimonas micra,P.micra)是一种存在于口腔、胃肠道、呼吸系统和女性生殖系统黏膜上的革兰阳性厌氧球菌。P.micra最初也称为微小消化链球菌(Peptostreptococcus micros),直到2006年被重新分类为小单胞菌属[1],即微小微单胞菌(Parvimonas micra)。

间充质干细胞在支气管哮喘治疗中的应用:挑战与策略

支气管哮喘(简称哮喘)缺乏特别有效的治疗手段。间充质干细胞(MSC)因具有抑制炎症、改善气道重塑的作用及可经呼吸道给药等优势,在哮喘治疗领域被广泛研究。虽然近年来对MSC治疗哮喘的应用性探索不断涌现,但其治疗哮喘的临床试验结果并不理想。不同类型的干细胞、不同哮喘患者的病理生理特征的差异给MSC的临床应用带来了严峻的挑战。本文就目前MSC治疗哮喘的作用机制研究及临床应用挑战进行回顾分析,以更好地了解MSC治疗哮喘的潜力及临床应用的可行性。

表现为肺部磨玻璃结节的浸润前病变和浸润性腺癌的CT及病理对比研究

目的对肺部局灶性磨玻璃密度影(ground-glass opacity,GGO)患者CT影像和病理特征进行分析,以提高对GGO的认识。方法回顾性分析30例GGO患者,根据病理表现分为浸润前病变、微浸润性腺癌和浸润性腺癌,分析总结患者GGO的影像学表现对GGO病灶的病理切片行Masson染色、Ⅳ型胶原染色和维多利亚蓝染色,对比分析各组患者病理表现的差异以及病理与影像学特征的关系。结果 30例GGO患者中,浸润前病变13例,微浸润性腺癌3例,浸润性腺癌14例。磨玻璃结节中浸润前病变、微浸润性腺癌和浸润性腺癌的结节直径依次增大,实性成分依次增多,分叶、毛刺、支气管充气征等依次更多见;在血管集束征的肺结节与供血血管关系方面,浸润性腺癌多为Ⅲ型,浸润前病变多为Ⅱ型。Ⅳ型胶原染色和维多利亚蓝染色提示浸润性腺癌肿瘤组织中网状纤维和胶原纤维呈不同程度的缺失,而Masson染色可见浸润性腺癌胶原纤维增生且肺浸润癌中央可见纤维瘢痕。进一步分析病理与影像特征,结果提示肿瘤组织中有明显纤维瘢痕的患者的肺结节与供血血管的关系多为Ⅲ型。结论对于持续存在的GGO,病灶直径越大、实性成分越多,其恶性疾病可能性越大。在肿瘤逐步进展过程中,肿瘤细胞破坏肺泡壁周围网状纤维和胶原纤维,进一步浸润刺激成纤维细胞增生分泌胶原纤维,形成肿瘤组织中的纤维瘢痕,这可能为血管集束征形成的病理基础。

气管镜测量人体气管长度和内径及左、右主支气管长度的研究

目的通过气管镜测量气管长度、内径以及左、右主支气管长度,为临床气道疾病的诊治提供理论基础。方法连续性纳入30例肺部病变较轻的患者行气管镜检查,测量患者气管长度,隆突上第5气管环和隆突上第10气管环左右径及前后径,以及左、右主支气管长度。结果气管以及左、右主支气管的长度分别为(13.09±1.40)cm、(4.57±0.51)cm、(1.80±0.72)cm。本研究测得电子气管镜(Olympus BF-260)距病变1 cm时的放大倍数为10.72,以此为基础测量隆突上第5气管环左右径为(2.76±0.32)cm,前后径为(2.44±0.27)cm;隆突上第10气管环左右径为(2.97±0.33)cm,前后径为(2.72±0.36)cm。隆突上第10气管环左右径及前后径均较隆突上第5气管环左右径及前后径大,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论本研究先行测量奥林巴斯BF-260的放大倍数,以此为基础用BF-260测量30例肺部病变较轻患者气管以及左、右主支气管长度和气管内径,客观反映了人体平静呼吸时气道的解剖结构。