pGEX-4T-1/HSV2-gG重组质粒的构建及表达

目的通过基因工程技术,构建含有目的基因的重组质粒(pGEX-4T-1/HSV2-gG)。方法用PCR技术扩增HSV2-gG基因的免疫优势表位片断;将PCR产物与质粒表达载体pGEX-4T-1连接;然后鉴定含有目的基因的重组表达载体;并转化大肠杆菌DH5α,诱导表达目的蛋白;以免疫印迹法检测表达的目的蛋白。结果PCR法扩增出1242bp的DNA片断;通过PCR法及测序法证实重组质粒中含有1242bp的DNA片断。SDS-PAGE和免疫印迹法证实重组蛋白在大肠杆菌中的表达。结论重组质粒HSV2-gG-pGEX-4T-1的成功构建及表达,为制备HSV-2血清诊断试剂奠定了基础。