严峻的全球性公共卫生问题:致病菌产生超广谱β-内酰胺酶

病源微生物对抗生素耐药的加速发展给感染性疾病的控制和治疗带来了严重威胁。β-内酰胺类抗生素是临床治疗感染性疾病最常用抗菌药物[1],对于传统抗生素,

大肠埃希菌AmpC酶的临床实验室检测与报告

目的探讨致病大肠埃希菌AmpC酶的临床实验室检测方法,为临床合理使用抗生素提供科学依据。方法将纸片扩散法药敏试验中对头孢西丁中介或耐药的菌株采用三维试验和聚合酶链反应(PCR)基因扩增对AmpC酶进行确证试验。结果临床分离筛选的10株耐头孢西丁大肠埃希菌中采用三维试验和PCR基因扩增后1株被确证为AmpC酶菌株。结论耐头孢西丁的革兰阴性菌需要作AmpC酶试验或PCR基因扩增进行确证,准确AmpC酶检测结果对临床合理使用抗生素具有积极意义。

质粒 染色体介导的大肠埃希菌β-内酰胺酶基因型与耐药性分析

目的研究产β-内酰胺酶大肠埃希菌基因型及其相关耐药性。方法对临床分离的7株大肠埃希菌,作β-内酰胺酶测定、药物敏感试验、质粒DNA转化和DNA印迹试验。结果7株大肠埃希菌,经E-test法检测,均产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);质粒DNA电泳图谱显示7株大肠埃希菌均含有TEM型耐药质粒;通过大肠埃希菌质粒DNA和染色体DNA印迹试验证明7株大肠埃希菌耐药由质粒介导或由质粒与染色体共同介导。结论第一株大肠埃希菌β-内酰胺酶单纯由质粒介导,第2～7株大肠埃希菌β-内酰胺酶由质粒和染色体共同介导。由质粒与染色体双重介导的β-内酰胺酶增强了大肠埃希菌对抗生素的耐药性。

16SrRNA基因序列分析用于诊断病原性细菌感染初步研究

目的建立一种可适用于多种病原菌检测的方法,以提高病原学诊断率,有利于传染病的病原学监测。方法细菌16SrRNA基因通用引物对直接从血液、尿液、脑脊液标本中提取的细菌DNA进行PCR扩增,并对16SrRNA基因扩增产物进行克隆和序列分析。结果检测了28份临床标本,16SrRNA基因序列分析与尿液细菌培养结果不完全吻合;血液和脑脊液的16SrRNA的检出率均高于细菌培养。结论16SrRNA基因检测分析和细菌培养均具有良好的诊断效果,而针对16SrRNA基因的PCR直接扩增核酸并进行序列分析可对分离培养阴性的标本进行有效的补充诊断,可检测到多种病原菌如肠球菌,大肠杆菌,表皮葡萄球菌,牛链球菌,猪链球菌,布鲁氏菌,表皮葡萄球菌和脑膜炎球菌等,为疾病的诊断提供良好的线索。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药机制和临床耐药研究的新进展

金黄色葡萄球菌为临床常见的病原菌，能产生多种毒素、酶及抗原蛋白，具有较强的致病力，可以引起皮肤软组织感染、血流感染及全身各脏器感染。随着青霉素的广泛使用．有些金黄色葡萄球菌产生青霉素酶，能水解β-内酰胺环，表现为对青霉素的耐药。甲氧西林应用于临床后曾有效地控制了金黄色葡萄球菌产酶株的感染。但是之后不久，发现了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），成为医院感染的主要病原菌之l。

感染性心内膜炎病27例病原菌和临床分析

感染性心内膜炎（infective endocarditis,IE）是病原微生物侵犯心瓣膜心室壁或邻近大血管内膜引起的一系列以炎性表现为特征的感染性疾病。特征性病变损害为赘生物形成,瓣膜受损。因病情复杂及较高的病死率,多年来一直为临床所关注。近年来,随着抗生素的广泛应用、人口老龄化、心导管介入诊疗技术的广泛开展以及心脏手术心内移植物病人长期存活等变化因素,

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药表型和基因特征分析

大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌是医院感染常见的革兰阴性杆菌,第三代头孢菌素的广泛使用使细菌的耐药性越来越强,产生超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrumβ-lactamases,ESBLs）是革兰阴性菌对第三代头孢菌素耐药的主要原因。

16srDNA序列分析在腹泻粪便标本菌群分析应用

目的应用16s rDNA序列分析方法,对临床实验室没有分离到已知病原菌的腹泻病人粪便标本进行菌群分析,为腹泻病人的病原学诊断提供线索。方法根据细菌16s rDNA保守区序列设计通用引物,以腹泻病人粪便标本中的总DNA为模板,PCR扩增16s rDNA片段。将获得的片段克隆入T载体进行测序,与数据库中发表序列的进行比对,判断标本中细菌的种类和比例;PCR扩增常见的五类致病性大肠杆菌的特征基因应用于排除诊断。结果在3份粪便标本中,大肠杆菌为优势菌群(所占比例分别为84%、65%和81%);其他种群细菌为拟杆菌属(Bacteroides)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)和普雷沃氏菌属(Prevotella)等;实验室常规培养方法没有分离到常见的五类致病性大肠杆菌;PCR扩增没有发现常见的五类致病性大肠杆菌的特征基因。结论引起三例病人腹泻的病原菌可能是一种新的大肠杆菌;16s rDNA序列分析方法可应用于腹泻粪便标本菌群分析,为常规的病原培养方法提供补充,对疾病的诊断提供线索。

产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的耐药机制及治疗进展

产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌（KPC）的增多已成为国内外医院抗感染治疗的主要问题。KPC对大多数临床使用的抗生素产生耐药性,包括现有的β内酰胺酶类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类等。KPC感染治疗的研究很少,主要局限于案例和病例报告。1 KPC酶流行情况及分类特点目前产KPC酶的细菌已经在全球范围内广泛播散,自2001年在美国北卡罗来纳州肺炎克雷伯菌中发现由质粒介导的碳青霉烯类酶KPC-1[1]到2004年纽约州质粒介导的KPC一3的肺炎克雷伯菌引起的感染，仅几年时间，KPC内酰胺酶已在美国，特别是美国东北部各州蔓延，在局部造成暴发流行。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析和mecA基因检测

耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）是医院和社区感染的重要病原菌。自20世纪90年代初起MRSA检出率有逐年上升趋势,已引起全世界重视。MRSA不仅对β内酰胺类抗生素耐药,还常对喹诺酮类、氨基糖苷类和大环内酯类等抗菌药物耐药。由于其多重耐药性,易造成医院感染的暴发流行，全身感染的病死率高达50％以上。已成为临床抗感染治疗的一大难题。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌确证及药物敏感试验方法学比较

葡萄球菌是人类感染的最重要的病原菌之一,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA）所造成的院内感染日趋严重,由MRSA引起的感染已经成为临床抗感染治疗的难题之一。金黄色葡萄球菌为临床常见病原菌,能产生多种毒素、酶及抗原蛋白,具有较强的致病性,能引起皮肤软组织感染、血流感染及全身各脏器感染。

产AmpC酶鲍曼不动杆菌的耐药表型及基因型分析

目的通过对鲍曼不动杆菌产AmpCβ-内酰胺酶的耐药表型及基因型分析,研究其耐药特征和流行趋势。方法收集2010年1月至10月两所综合性医院临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌63株,采用琼脂扩散法进行药物敏感试验,采用聚合酶链反应检测AmpC酶。结果 63株鲍曼不动杆菌耐头孢西丁61株(96.8%),而且对临床其他常用抗生素的耐药率也非常高,均在90%以上(除亚胺培南,美罗培南,米诺环素,阿米卡星,头孢哌酮/舒巴坦,替卡西林/棒酸),表现为多重耐药,其中对米诺环素的敏感率最高为56%,头孢哌酮/舒巴坦位列第二为41.3%。所测63株鲍曼不动杆菌中AmpC酶阳性率为67%。结论鲍曼不动杆菌多重耐药有蔓延趋势,出现1株对临床现有抗生素全部耐药的菌株。AmpC酶在鲍曼不动杆菌的耐药机制中起重要作用,其携带率为67%。米诺环素和头孢哌酮/舒巴坦是目前本地区最为有效的抗菌药物。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌表型及基因型同源性分析

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是引起医院和社区感染的重要病原菌之一。近年来随着广谱及超广谱β-内酰胺类抗菌药物在临床上的广泛使用,MRSA的检出率不断增加。MRSA感染有逐年增高的趋势,且具有多重耐药的特点。对MRSA耐药机制进行研究,寻找药物作用的新靶点,是目前全世界都密切关注的问题之一。

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药分子学研究

目的研究该院临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药分子学机制。方法分析该院临床微生物实验室分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌株(CRKP),采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和全自动微生物分析仪(VITEK-2 compact)鉴定细菌并进行药物敏感试验分析,采用改良Hodge试验(MHT)和碳青霉烯酶灭活试验(CIM)进行表型确证;聚合酶链式反应(PCR)法检测碳青霉烯酶基因型,并进行基因测序BLAST比对和多位点序列分析(MLST)。结果46株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物均表现出高耐药性;耐碳青霉烯表型确证均呈阳性,PCR检测结果显示其中包括A类碳青霉烯酶(KPC-2型)和B类金属酶(NDM-1和IMP-4),MLST分型以ST11型为主。结论该院分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药分子学机制主要以产KPC-2型碳青霉烯酶的ST11型为主,同时有少量其他型别的检出,加强院内感染监测强度和力度,以及进一步规范抗菌药的合理使用显得尤为重要。

血管紧张素-Ⅱ联合β-氨基丙腈腹腔注射建立主动脉夹层小鼠模型

目的血管紧张素-Ⅱ(Ang-Ⅱ)联合β-氨基丙腈(BAPN)腹腔注射建立小鼠主动脉夹层模型。方法 80只C57BL/6J小鼠(3周龄,雄性)分为对照组和7个实验组,分别为:Ang-Ⅱ组、BAPN 0.1 g/kg组、BAPN 0.33 g/kg组、BAPN 0.67 g/kg组、Ang-Ⅱ+BAPN 0.1 g/kg组、Ang-Ⅱ+BAPN 0.33 g/kg组、Ang-Ⅱ+BAPN0.67 g/kg组。对照组每8 h给予腹腔注射0.9%氯化钠注射液0.1 ml,Ang-Ⅱ组每8 h腹腔注射4.0 mg/kg Ang-Ⅱ,3种不同剂量的BAPN组每日分别给予腹腔注射0.1、0.33、0.67 g/kg BAPN, 3个联合用药组分别在每8 h腹腔注射4.0 mg/kg Ang-Ⅱ的基础上,分别给予腹腔注射0.1、0.33、0.67 g/kg BAPN。每组均于相同时间点应用鼠尾测压器检测并记录小鼠血压,持续14 d,中途死亡小鼠直接解剖,取出主动脉。14 d后处死小鼠,取出主动脉行病理观察。结果未注射Ang-Ⅱ的3个BAPN组小鼠血压与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);注射Ang-Ⅱ的4个组血压与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组无主动脉夹层形成,HE染色显示血管壁结构完整;7个实验组HE染色显示部分小鼠血管壁弹力纤维破坏,假腔形成,炎性细胞浸润,提示主动脉夹层形成。BAPN 0.1 g/kg组、BAPN 0.33 g/kg组、BAPN 0.67 g/kg组,随着BAPN注入剂量的增加,主动脉夹层的发生率逐渐上升,分别为10%、30%、50%,部分小鼠因主动脉破裂死亡,3组分别为0、1、4只;Ang-Ⅱ组和Ang-Ⅱ+BAPN0.1 g/kg组主动脉夹层发生率较低(均为30%),死亡分别为1、0只;Ang-Ⅱ+BAPN 0.33 g/kg组和Ang-Ⅱ+BAPN0.67 g/kg组主动脉夹层发生率分别为70%和80%,Ang-Ⅱ+BAPN 0.33 g/kg组死亡2只,而Ang-Ⅱ+BAPN 0.67g/kg组8只形成主动脉夹层的小鼠均死亡。Ang-Ⅱ+BAPN 0.33 g/kg组主动脉夹层发生率高,死亡率不高,符合小鼠主动脉夹层模型的要求。结论 Ang-Ⅱ联合BAPN腹腔注射能成功诱导小鼠主动脉夹层模型。

山西某医院2016—2017年鲍曼不动杆菌临床分布及耐药变迁

鲍曼不动杆菌(AB)为革兰阴性条件致病菌。为了解我院AB的分布和耐药情况,探索其可能的耐药机制,本研究回顾性分析2016—2017年本院临床分离的AB其标本来源、科室分布及耐药情况,现报告如下。1材料与方法1.1标本来源:收集从2016年1月至2017年12月山西大医院微生物室分离的非重复AB,使用全自动微生物分析系统(VITEK2compact)进行细菌鉴定及药物敏感试验,将这些菌株于甘油肉汤-80℃保存。质控菌株为铜绿假单胞菌ATCC27853和大肠埃希菌ATCC25922,均购于卫生部临检中心。