酶固定化技术及固定化酶应用的研究进展

酶是一种对环境友好的生物催化剂,在环境修复、医药、化工和食品等领域广泛应用,但游离酶的催化性能易受环境因素的影响。酶的固定化技术是提高游离酶的催化稳定性的主要技术之一。首先综述了几种不同的酶固定化技术,介绍了不同固定化技术的优点及特点;其次介绍了不同固定化载体对不同酶的固定效果,并分析了其优势;最后讨论了固定化酶面临的挑战和未来发展前景。

氯胺酮雾化吸入对哮喘大鼠肺一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨氯胺酮雾化吸入对哮喘大鼠肺一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法:40只BrownNorway大鼠随机分为对照组(C组)、哮喘模型组(A组)、氯胺酮1组(K1组)、氯胺酮2组(K2组)、氯胺酮3组(K3组),每组8只。A组用卵蛋白辅以百日咳杆菌菌苗及氢氧化铝为佐剂注射致敏,2周后雾化吸入卵蛋白激发。K1、K2、K3组大鼠以同样方法致敏,在激发前分别雾化吸入12.5、25.0、50.0mg/ml的氯胺酮。C组注射和雾化吸入PBS。取肺组织提取RNA,以RT-PCR法分析NOSmRNA的表达,并作肺组织病理学检查。结果:A组肺组织切片显示为急性气道炎症性改变,与A组相比,K1、K2、K3组炎症状态明显减轻。iNOSmRNA的表达与C组比较,A组明显增强,并有显著性差异(P<0.01),与A组比较,K1、K2、K3组iNOSmRNA表达明显减弱,有显著性差异(K1组P<0.05,K2组、K3组P<0.01)。K1、K2、K3组间无明显差异。eNOSmRNA各组表达无显著性差异,nNOS在各组呈微弱表达。结论:氯胺酮雾化吸入可抑制卵蛋白所致的大鼠肺iNOSmRNA高表达,并改善肺部炎症,对肺损伤有保护作用。雾化吸入氯胺酮12.5mg/ml已达到治疗效果。

氯胺酮雾化吸入对哮喘大鼠气道高反应性的影响

目的:观察氯胺酮雾化吸入对哮喘模型大鼠气道高反应性的影响。方法:40只Brown Norway大鼠随机分成对照组(C组)、哮喘模型组(A组)、氯胺酮1组(K1组)、氯胺酮2组(K2组)、氯胺酮3组(K3组),应用动物体描箱法测定大鼠的气道反应性,采用RT-PCR反应测定核因子-кB(NF-кB)的基因表达,采用免疫组化的方法观察NF-кB在支气管上皮的表达。结果:在乙酰胆碱(ACH)浓度为50、100、200μg/kg时,K1、K2、K3组呼气阻力(Re)的增长率明显小于A组(P<0.01);在ACH浓度为50、100、200μg/kg时,K1、K2、K3组肺动态顺应性(Cldyn)的下降率明显小于A组(P<0.01)。大鼠肺NF-кB p65 mRNA的表达水平和支气管上皮NF-кB阳性细胞率A组显著高于C组(P<0.05),治疗组K1、K2、K3明显低于A组(P<0.05)。结论:氯胺酮雾化吸入治疗可明显减轻哮喘模型大鼠气道高反应性。

超声引导下喉上神经阻滞联合羟考酮在支气管镜检查术患者的应用

目的探讨超声引导下喉上神经阻滞联合静脉注射羟考酮在支气管镜检查手术患者的应用效果。方法行支气管镜检查患者96例随机分为两组,每组48例。两组均行5 mL 2%利多卡因喷喉和3 mL 2%利多卡因雾化吸入表面麻醉。A组静脉注射丙泊酚1~2 mg/kg和雷米芬太尼0.05~0.10μg/kg;B组静脉注射羟考酮0.1 mg/kg,并采用1%利多卡因3 mL行超声引导下双侧喉上神经阻滞。记录麻醉前(T0)、麻醉后(T1)和气管镜插入声门时(T2)的BP、HR和SpO_(2),观察术后苏醒和不良反应。结果与A组比较,B组术中基本处于清醒合作状态,血压、心率波动较小,低氧血症发生率低(0 vs.20.8%),术后不良反应发生率低(18.8%vs.79.2%)(P<0.05)。结论对于行支气管镜检查术患者,超声引导下行1%利多卡因喉上神经阻滞联合静脉注射羟考酮能有效减轻手术刺激,提高检查安全性,减少不良反应。

氯胺酮对致敏原诱导哮喘模型大鼠的肺保护

目的观察氯胺酮对哮喘模型大鼠气道高反应性及炎症的影响。方法 56只 BrownNorway 大鼠随机分成阴性对照组(A 组)、哮喘模型组(B 组)和不同浓度氯胺酮雾化吸入预处理组(C组、D 组和 E 组)及不同剂量氯胺酮腹腔用药预处理组(F 和 G 组)。采用卵蛋白(OVA)辅以百日咳杆菌菌苗和氢氧化铝为佐剂注射致敏大鼠。雾化吸入10 mg/ml OVA 激发。氯胺酮预处理组大鼠在激发前分别给予12.5 mg/ml、25 mg/ml 或50 mg/ml 浓度的氯胺酮雾化吸入或50μg/kg,100μg/kg剂量的氯胺酮腹腔注射。A 组采用磷酸盐缓冲液替代 OVA 进行雾化吸入。最后1次激发后24 h,测定气道反应性。并取肺组织作诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的基囚和蛋白表达,一氧化氮(NO)生成量及病理组织学检测。结果 (1)B 组的呼气阻力(Re)增长百分率的剂量反应曲线向左上移位,而且PC100(Re 增长达100%幅度时所需乙酰胆碱的激发剂量),PC200及 PC400值显著低于 A 组(分别为14.65±1.19vs32.28±1.43,15.17±1.19vs38.91±1.39及16.28±1.18vs56.53±1.38)差异有统计学意义(P<0.01)。氯胺酮预处理组的 Re 剂量反应曲线向右下移位,而 PC100,PC200及PC400值均明显高于 B 组(P<0.05)。(2)B 组可见明显的气道炎症性病理改变。氯胺酮治疗组炎症细胞浸润及上皮细胞损伤程度明显减轻,肺间质水肿改善。(3)B 组 iNOS 基因表达与 A 组相比明显增强(1.00±0.07vs0.48±0.07,P<0.01)。与 B 组相比,iNOS 基因的表达在 C 组(0.65±0.07),D 组(0.58±0.09),E 组(0.56±1.00)及 F 组(0.66±0.06)均减低,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)与 A 组相比,B 组 iNOS 蛋白表达(0.54±0.08)明显增强(P<0.05),而与 B 组相比,iNOS 蛋白表达量在 C 组(0.20±0.03),D 组(0.18±0.03)及 F 组(0.21±0.04)均减低,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)B 组肺组织 NO 产量[(0.39±0.04)μmol/g 蛋白]显著高于 A 组(P<0.01)。肺组织 NO 产量在 C 组[(0.19±0.03)μmol/g 蛋白],D 组[(0.17±0.03)μmol/g 蛋白]及F组[0.16±0.04)μmol/g 蛋白]明显低于 B 组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论氯胺酮明显抑制致敏原诱发的肺 iNOS 的高表达,降低 NO 的过度产生,从而减轻炎性损伤,抑制气道高反应性,对哮喘模型大鼠具有肺保护作用。