lncRNA HCG18调控miR-324-5p/GLI1轴在急性髓系白血病细胞增殖和侵袭中的作用机制

目的长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调对急性髓系白血病(AML)的作用机制尚不清楚。探讨lncRNA HCG18控微小RNA-324-5p(miR-324-5p)/胶质瘤相关基因同源蛋白1(GLI1)轴对AML细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法选择2017年1月-2021年3月在本院血液科住院治疗的AML患者35例作为研究对象(AML组),另选取同期在本院治疗并进行骨髓穿刺检查的非血液系统肿瘤性疾病患者30例作为对照组,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测所有入选人员骨髓单个核细胞中lncRNA HCG18与miR-324-5p的表达。体外培养AML细胞HL-60,将细胞分为对照组、si-NC组、lncRNA HCG18 siRNA组、miR-NC组、miR-324-5p mimics组、miR-324-5p mimics+GLI1 NC组、miR-324-5p mimics+GLI1组、lncRNA HCG18 siRNA+NC inhibitor组、lncRNA HCG18 siRNA+miR-324-5p inhibitor组,分别检测检测HL-60细胞中lncRNA HCG18、miR-324-5p表达、HL-60细胞增殖、迁移与侵袭及GLI1、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达。双荧光素酶报告系统分析miR-324-5p与lncRNA HCG18、GLI1的靶向关系。结果与对照组比较,AML组患者骨髓单个核细胞中lncRNA HCG18表达水平(2.85±0.32)较对照组(1.03±0.11)显著升高(P<0.01),而miR-324-5p表达水平(0.47±0.05)较对照组(1.05±0.09)显著降低(P<0.01);沉默lncRNA HCG18表达或过表达miR-324-5p后HL-60细胞增殖、细胞迁移与侵袭数、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验显示,miR-324-5p与lncRNA HCG18、GLI1均有靶向关系;抑制miR-324-5p表达可逆转沉默lncRNA HCG18表达对HL-60细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用;GLI1过表达可逆转过表达miR-324-5p对HL-60细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用。结论lncRNA HCG18在AML细胞中高表达,抑制lncRNA HCG18表达可通过调控miR-324-5p/GLI1轴抑制AML细胞增殖、迁移与侵袭。

香芹酚对白血病细胞生物学行为的影响及其机制

目的:探讨香芹酚对白血病细胞生物学行为的影响及其对circ-0008717/miR-217分子轴的调控作用。方法:体外培养人急性淋巴细胞白血病细胞Molt-4,分别加入不同浓度的香芹酚处理细胞;si-NC、si-circ-0008717分别转染入Molt-4细胞(si-NC组、si-circ-0008717组),pcDNA、pcDNA-circ-0008717、anti-miR-NC、anti-miR-217分别转染入Molt-4细胞后加入香芹酚处理细胞(香芹酚+pcDNA组、香芹酚+pcDNA-circ-0008717组、香芹酚+anti-miR-NC组、香芹酚+anti-miR-217组);MTT、平板克隆形成实验、流式细胞术分别检测细胞活力、集落形成数、细胞凋亡率;RT-qPCR法检测circ-0008717和miR-217的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测circ-0008717与miR-217的靶向关系。结果:经香芹酚处理后,细胞活力明显降低(r=-0.9405),circ-0008717的表达水平明显降低(r=-0.9117),集落形成数明显减少(r=-0.9256),细胞凋亡率明显升高(r=0.8464),miR-217的表达水平明显升高(r=0.9468);与si-NC组比较,si-circ-0008717组miR-217的表达水平升高(P<0.001),细胞活力降低(P<0.001),集落形成数明显减少(P<0.001),细胞凋亡率升高(P<0.001);与香芹酚+pcDNA组比较,香芹酚+pcDNA-circ-0008717组细胞活力升高(P<0.001),集落形成数明显增多(P<0.001),细胞凋亡率明显降低(P<0.001);circ-0008717可靶向调控miR-217的表达;与香芹酚+anti-miR-NC组比较,香芹酚+anti-miR-217组细胞活力明显升高(P<0.001),集落形成数明显增多(P<0.001),细胞凋亡率明显降低(P<0.001)。结论:香芹酚可通过下调circ-0008717的表达而促进miR-217的表达从而减弱白血病细胞增殖、克隆形成能力及促进细胞凋亡。

M2型急性髓系白血病患者骨髓中MMSA-8、MMSA-1表达及临床意义

目的:检测急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中多发性骨髓瘤相关抗原(MMSA)-8、MMSA-1表达情况,探讨二者在急性髓系白血病中的临床意义。方法:纳入2019年1月-2020年1月本院M2型急性髓系白血病患者83例为研究组,同期血液科诊断为单纯缺铁性贫血患者15例为对照组,实时荧光定量PCR检测骨髓单个核细胞中MMSA-8、MMSA-1表达水平。将研究组患者根据疗效分为缓解、未缓解,根据预后状况分为预后良好、预后中等和预后不良,分析MMSA-8、MMSA-1与疗效、预后的关系。另收集研究组患者的一般资料,包括入院时血常规白细胞数、血红蛋白、血小板数和骨髓原始细胞百分比,Pearson法分析MMSA-8、MMSA-1与患者临床资料以及MMSA-8与MMSA-1的相关性。结果:对患者骨髓单个核细胞中MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平分析结果显示,研究组患者明显高于对照组患者(P<0.05);研究组中未缓解患者明显高于缓解患者(P<0.05),预后中等、预后不良患者均明显高于预后良好患者(P<0.05),预后不良患者仅MMSA-1 mRNA水平明显高于预后中等患者(P<0.05)。Pearson法分析结果显示,研究组患者MMSA-8、MMSA-1与白细胞数呈正相关(r=0.468,r=0.516),MMSA-8与MMSA-1呈正相关(r=0.318)。结论:M2型急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中MMSA-8、MMSA-1水平升高,二者均与疾病发生发展关系密切,且对预后有一定预测价值。

花姜酮对多发性骨髓瘤细胞U266增殖和凋亡的影响及机制

目的探讨花姜酮(zerumbone)对多发性骨髓瘤细胞U266增殖和凋亡的影响及其机制。方法花姜酮5,10和20μmol∙L^(-1)处理U266细胞48 h,MTT法检测细胞存活率,克隆形成实验检测克隆形成率;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;RT-qPCR检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA表达,Western印迹法检测周期蛋白D1、Bax、Bcl-2和HMGB1蛋白表达。结果与细胞对照组相比,花姜酮5,10,20μmol∙L^(-1)组细胞存活率显著降低(P<0.05);细胞克隆形成率显著降低(P<0.05);细胞凋亡率和S期细胞比例显著增加(P<0.05),G_(2)和M期细胞比例显著降低(P<0.05);HMGB1 mRNA表达显著降低(P<0.05),细胞周期蛋白D1、Bcl-2和HMGB1蛋白表达降低(P<0.05),Bax蛋白增加(P<0.05)。结论花姜酮抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖和促进细胞凋亡,可能与下调周期蛋白D1、Bcl-2、HMGB1和上调Bax蛋白表达有关。

低电压电死后心脏病理改变在法医鉴定中的意义

随着现代社会的快速发展,电在生活中的应用越来越广泛。低电压是指〈1 000 V的电压。在中国,人们常接触的电压为220 V的交流电,低电压电击死亡屡见不鲜,主要途径是接触电线,DVD漏电或手机充电时通话也可引起电击死亡[1-3]。

猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白联合CD25单抗用于恶性血液病单倍体移植中急、慢性移植物抗宿主病预防的临床分析

目的探讨猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白(ALG)联合CD25单抗在恶性血液病单倍体移植中预防急、慢性移植物抗宿主病(GVHD)的疗效和安全性。方法回顾性分析我院2018年5月~2020年6月首次单倍体移植中行ALG联合CD25单抗预防GVHD的恶性血液病患者18例,记录预防期间的不良反应、干细胞植入时间、急性移植物抗宿主病(aGVHD)和慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的发生率、累及器官及治疗方法、巨细胞病毒(CMV)和EB病毒(EBV)激活率、感染发生率、嵌合状态、总生存(OS)率及无排异无复发生存(GRFS)率。结果纳入患者使用ALG期间的不良反应包括皮疹、心慌、呼吸困难等,通过激素及抗过敏治疗后均能有效缓解。所有患者均成功植入,白细胞植入中位时间为11(9,13)天,血小板植入中位时间为12(10,16)天。aGVHD发生率为33.3%,其中2例为Ⅲ~Ⅳ度(11.1%),10例发生cGVHD(55.6%),其中3例为广泛性(16.7%),7例为局限性(38.9%)。6例患者(33.3%)出现EBV血症,7例患者(38.9%)出现CMV血症,5例(27.8%)患者发生细菌感染,其中深部真菌感染发生2例(11.1%)。所有患者在+1、+3、+6、+9、+12、+18月行供受者嵌合度检测,均为完全供者型。中位随访时间384(219,530)天,死亡2例,中位生存时间未达到,总生存(OS)率85.23%。结论ALG联合CD25单抗在恶性血液病单倍体移植中预防GVHD是有效和安全的。