全科专业培训中多元模块教学法的应用研究

目的探索有效开展全科住院医师规范化培训,提高其专业和心理素养,以使其能胜任全科工作的培训教学方法。方法选取30名全科规培学员作为多元模块教学组,26名全科规培学员为传统教学组。多元模块教学组根据全科医学学科特点制定4个培训模块。并采取线上和线下相结合的教学方法。传统带教组为全科学员在固定带教老师的指导下学习。出科考核分为理论考核、综合能力和操作实践考核、课后作业三部分,由教学秘书统一考核。结果出科成绩考核多元模式教学组在临床操作技能、综合临床能力、基础理论成绩和课后PPT评分均高于传统教学组,差异有统计学意义(P<0.05)。培训效果多元模式教学组学员的学习主动性、专业认同感、人文关怀、沟通能力均高于传统教学组,四组差异均具有统计学意义(P<0.05)。规培学员对教学模式满意度调查显示多元模式组学员总体满意度高于传统带教组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论多元模块教学方法较传统教学方法取得了良好的培训效果,值得在全科专业住院医师规范化培训中推广学习。

腹腔镜结肠癌根治性切除术后原位转移的探讨

结肠癌在我国是最常见的恶性肿瘤之一，目前居恶性肿瘤发病率第4位，并有上升趋势。结肠癌在许多国家都是大肠切除的主要指征。传统的结肠癌开腹手术发展已相当成熟，并在过去几十年一直被认为是结肠癌治疗的金标准。1991年腹腔镜技术运用于结肠外科，现在已应用于结肠良性疾病的诊治和恶性疾病的姑息切除。同时，它在根治性切除结肠恶性肿瘤方面的应用也有所发展。但是腹腔镜结肠癌手术的推广和应用还远不如腹腔镜胆囊手术和胃底折叠手术，其主要原因是早期报道腹腔镜术后原位转移的高发生率，限制了其应用。

血清胃蛋白酶原在慢性胃部病变中变化的临床研究

目的分析不同胃部病变发生情况下血清胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)表达水平,为消化系统疾病的临床诊断提供一定帮助。方法收集2015年7月至2017年4月武汉大学人民医院住院患者372例,包括312例胃部病变患者和60例无胃部病变者(对照组)。根据胃部病变不同可分为幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,H. pylori)感染、胃炎、消化性溃疡、胃癌前病变、胃癌,其中胃炎包括浅表性胃炎组、糜烂性胃炎组、萎缩性胃炎组;消化性溃疡包括胃溃疡组、十二指肠球部溃疡组、复合溃疡组;胃癌前病变包括胃息肉组及残胃吻合口炎组。采用全自动生化分析仪检验血清PG(PGⅠ和PGⅡ)表达情况,并求PGⅠ与PGⅡ的比值(PGR),采用t检验及方差分析对各组的PG水平差异进行分析比较。结果 H. pylori感染组与对照组比较,PGⅠ、PGⅡ水平及PGR值明显升高,差异有统计学意义(P <0. 05)。在胃炎各组中,浅表性胃炎组PGⅠ、PGⅡ水平及PGR值与对照组相比,差异无统计学意义(P> 0. 05);糜烂性胃炎组与对照组比较,PGⅠ水平、PGR值明显升高,差异有统计学意义(P <0. 05),PGⅡ水平升高,但差异无统计学意义(P> 0. 05);萎缩性胃炎组PGⅠ、PGⅡ水平及PGR值与对照组相比均明显下降(P <0. 05)。在消化性溃疡各组中,胃溃疡组患者与对照组进行比较,PGⅠ、PGⅡ水平均明显升高(P <0. 05),PGR值变化不大差异无统计学意义(P> 0. 05);与对照组比较,十二指肠球部溃疡组及复合溃疡组PGⅠ、PGⅡ水平及PGR值明显升高(P <0. 05)。在癌前病变中,胃息肉组与对照组相比,PGⅠ水平及PGR值均显著升高(P <0. 05),PGⅡ水平也升高,但差异无统计学意义(P> 0. 05);残胃吻合口炎组PGⅠ、PGⅡ水平和PGR值与对照组相比均明显下降(P <0. 05)。胃癌组与对照组比较,PGⅠ水平、PGR值均明显下降(P <0. 05),PGⅡ水平升高,但差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论血清PGⅠ、PGⅡ水平和PGR值的联合运用可有助于慢性胃部疾病的筛查、诊断及鉴别,具有较为显著的临床意义。

原发性肝脏弥漫性大B细胞淋巴瘤1例报道

原发性肝脏淋巴瘤是一种原发于肝脏的结外淋巴瘤。该病临床少见，缺乏特异性的临床和影像学表现。其确诊多依赖于肝脏病理学、免疫组织化学和基因重排检测。现对本院收治的1例肝弥漫肿大、肝功能进行性损害的原发性肝脏淋巴瘤患者的临床资料进行总结，并结合文献分析如下。

丙型肝炎病毒抑制DNA损伤修复相关基因生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45α的表达

目的,探讨HCV感染对DNA损伤修复相关基因生长阻滞和DNA损伤诱生蛋白45仅（GADD45α）表达的影响。方法建立全基因HCVJFH1感染的Huh7．5．1细胞模型。用相对荧光定量PCR和Westernblot分别检测HCVJFHl感染和未感染的Huh7．5．1细胞中GADD45仅mRNA和蛋白质的表达水平。组间数据比较用单因素方差分析。结果HCVJFHl感染的Huh7．5．1细胞内有HCVRNA高水平复制及HCVNS5A蛋白质和核心蛋白的表达。与未感染Huh7．5．1细胞相比，HCVJFH1感染72h的细胞内GADD450α mRNA和蛋白质相对表达量均明显降低，分别为0．57±0．09比1．00±0．11和0．28±0．03比1．00±0．07，差异均有统计学意义（F值分别为75．407和560．04，P值均〈0．01）。结论HCV下调GADD45α的转录和蛋白质表达，影响DNA损伤修复，这可能是HCV感染致肝癌发生的机制之一。

生物信息学分析SPP1基因在肝细胞癌中的表达及机制

目的:生物信息学分析SPP1在肝细胞癌(HCC)中的表达及与临床预后的关系,并预测SPP1表达异常的分子机制。方法:GEPIA数据库分析SPP1 mRNA在肝细胞癌中的表达及与患者预后的关系;cBioPortal、MethHC、GCBI和StarBase和NetPhos 3.1 Server等数据库预测SPP1基因突变、启动子区甲基化水平、与SPP1结合的miRNAs转录后调控、蛋白翻译后修饰。结果:SPP1 mRNA在HCC中表达升高,其中SPP1高表达患者的总体预后差(log-rank P=0.00011)。HCC中SPP1存在基因扩增和深度缺失。启动子区甲基化水平降低(P<0.005),并与SPP1表达负相关(R=0.650,P<0.0001)。HCC中miR-146a表达降低,miR-146a能与SPP1的3’-UTR结合,miR-146a与SPP1的共表达有统计学意义(P<0.0001);4个激酶unsp、PKC、PKA、CKⅡ能在39个位点将其底物SPP1蛋白磷酸化。结论:生物信息学分析SPP1可作为早期肝细胞癌的潜在诊断指标。其升高可能与SPP1基因组扩增、启动子区去甲基化、转录后miR-146a对其3’-UTR调控、蛋白翻译后磷酸化修饰相关。

抑癌基因LHPP的生物信息学预测及在肝细胞癌中的表达分析

目的:利用生物信息学方法预测和分析磷酸赖氨酸磷酸组氨酸无机焦磷酸磷酸酶(LHPP)蛋白的结构和功能。方法:从NCBI的Gene数据库中获取LHPP基因信息及其编码蛋白序列,使用NCBI在线数据库、Expasy数据库的ProtParam和ProtScale、SignalP 4. 1 Server、TMHMM Server v. 2. 0、PSORTⅡPrediction、The Human Protein Atlas、SOPMA、SWISS-MODEL、NetPhos 3. 1 Server、PhosphoSite Plus、STRING等在线数据库对LHPP蛋白的生物学特性进行预测分析。结果:人LHPP蛋白的理论分子质量为29 kU,属于酸性、稳定、疏水、非分泌型、无跨膜区蛋白,主要存在于细胞质,线粒体、细胞核和内质网也可动态存在,其主要二级结构为随机卷曲和α-螺旋,存在磷酸化、乙酰化和泛素化位点,LHPP蛋白组织表达特异性不强,且在肝癌等多种肿瘤中表达下降。LHPP蛋白主要与ATP合酶α/β家族和磷酸化酶超家族相互作用,参与调控氧化磷酸化和能量代谢等信号通路。结论:生物信息学分析LHPP蛋白在肝癌中下降,可能与其相应结构位点发生磷酸化、乙酰化或泛素化后参与调控氧化磷酸化和能量代谢信号通路相关。

丙型肝炎病毒非结构蛋白5A下调抑癌基因PTEN的表达

目的萤虫素酶探讨丙型肝炎病毒非结构蛋白5A(HCVNS5A)对抑癌基因PTEN表达的影响。方法表达HCVNS5A的质粒(pCNS5A)转染QSG-7701细胞,采用间接免疫荧光法观察HCVNS5A蛋白的表达。构建PTEN启动子驱动的萤虫素酶报告基因表达质粒PTEN-Luc,并与pCNS5A共转染QSG-7701细胞,萤虫素酶实验检测HCVNS5A对PTEN启动子活性的影响。采用RT-PCR和Westernblot分析分别观察HCVNS5A对PTENmRNA和PTEN蛋白表达水平的影响。结果转染pCNS5A的QSG-7701细胞胞浆中可见HCVNS5A蛋白表达。PTEN-Luc与不同剂量的pCNS5A质粒共转染QSG-7701细胞,HCVNS5A表达组的PTEN-Luc相对活性下降,且转染HCVNS5A质粒的剂量越大,PTEN-Luc的相对活性越低。转染pCNS5A的QSG-7701细胞内PTENmRNA和蛋白质表达均较对照组下降,且随着HCVNS5A质粒剂量增大,PTENmRNA和PTEN蛋白表达下降更明显。结论 HCVNS5A通过抑制PTEN启动子的活性而抑制PTEN基因的转录和PTEN蛋白的表达,这可能是HCV所致原发性肝细胞癌的发病机制之一。

4例暴发型肝豆状核变性患者的临床特点及其治疗

我们采用注射激素、驱铜、血浆置换等方法综合治疗4例儿童暴发型肝豆状核变性（FWD），3例黄疸消退，肝功能基本恢复正常，现报道如下。

丙型肝炎病毒非结构蛋白质5A抑制Hepcidin因表达并促进肝细胞内铁储留

目的探讨丙型肝炎病毒（HCV）非结构蛋白质5A（NS5A）对Hepcidin基因表达的影响。方法用含HCVNS5A基因的表达质粒pcNS5A瞬时转染QSG7701细胞，采用逆转录-聚合酶链反应及Westemb10t试验观察HCVNS5A和Hepcidin的mRNA转录水平及蛋白质表达水平，铁染色后观察细胞内铁储留情况。检测数据的多组间比较行单因素方差分析，两两比较行LSD-t检验。结果转染pcNS5A质粒细胞内有HCVNS5A的mRNA和蛋白的表达，未转染质粒组和转染空白质粒pRc／CMV组细胞内无HCVNS5A的mRNA和蛋白的表达。未转染质粒组、转染pRc／CMV质粒组和转染pcNS5A质粒组细胞的HeIxzidinmRNA相对表达量分别为0．711±0．049、0．718±0．052和0．264±0．030，转染pcNS5A组HepcidinmRNA表达低于未转染质粒组和转染pRc／CMV质粒组（t值分别为-13．523和-13．045，P值均〈0．01）。转染pcNS5A质粒组细胞HeIxzidin蛋白表达较未转染质粒组及转染pRc／CMV质粒组下降，且随着转染pcNS5A质粒剂量的增加，Hepcidin蛋白表达下降更明显。铁染色结果显示，转染pcNS5A质粒细胞内铁较转染pRC／CMV质粒细胞和未转染质粒细胞高。结论HCVNS5A蛋白能抑制Hepcidin的mRNA和蛋白质表达，并引起细胞内铁的储留增加。