日照市6221例女性HPV流行病学调查

目的分析山东省日照市妇幼保健院门诊就诊女性中人乳头瘤病毒(HPV)感染的流行特征,为日照市HPV的检测,预防和治疗策略提供理论依据。方法收集2019年1月至2021年12月在日照市妇幼保健院就诊的6221例女性宫颈生物脱落细胞为研究样本,采用PCR-反向点杂交法定性检测28种HPV基因型并统计分析。结果在受检的6221例女性中,HPV的检出率为38.74%(2410/6221)。受检人数年均增长率为34.69%,检出率年均增长率为16.49%。HPV检出率与受检月份之间的差异有统计学意义(χ^(2)=43.125,P<0.001),五月份检出率出现峰值为47.40%(282/595)。在所有HPV感染者中,以单纯高危型感染为主占比73.57%(1773/2410),其次是单纯低危型感染为23.44%(565/2410)。不同年龄组之间女性HPV检出率的比较,差异有统计学意义(χ^(2)=103.116,P<0.001)。HPV感染率前三的年龄段是<21岁、>60岁和21~25岁。检出率前四的HPV亚型都是高危型,依次是HR-HPV16、HR-HPV52、HR-HPV58、HR-HPV53。HR-HPV总检出率为29.66%(1845/6221),构成比为75.81%(2285/3014)。LR-HPV总检出率为10.24%(637/6221),排名前四的亚型依次是LR-HPV54、LR-HPV61、LR-HPV81、LR-HPV42。HR-HPV的检出率在年龄之间的差异有统计学意义(χ^(2)=145.737,P<0.001),HR-HPV16在<21岁年龄组里的检出率为11.59%(8/69),在56~60岁年龄组里检出率为4.44%(8/180)。结论日照地区女性HPV检出率逐年增高,5月份是易感月份,<21岁和>60岁是易感年龄段,并以单一高危型HPV16和HPV52感染为主。

核自身抗原精子蛋白(NASP)基因突变加重诱导型狼疮模型小鼠自身免疫应答

目的制备诱导型狼疮模型小鼠,探讨核自身抗原精子蛋白(NASP)基因突变对诱导型系统性红斑狼疮(SLE)模型小鼠自身免疫应答的影响。方法3月龄野生型B6(B6-WT)小鼠为对照组、NASP基因突变B6(B6-NASPM)小鼠为实验组。用伴刀豆球蛋白A(ConA)活化小鼠的脾脏淋巴细胞,提取其DNA为自身抗原,分别免疫B6-WT小鼠和B6-NASPM小鼠3次。EUSA检测血清抗双链DNA(dsDNA)IgG水平,HE染色检测肾脏病变情况,免疫荧光组织化学染色检测肾组织IgG和补体C3的沉积情况。流式细胞术比较B6-WT小鼠和B6-NASP^M小鼠的脾脏淋巴细胞亚群变化,从而探讨NASP基因突变影响小鼠免疫应答的机制。结果与B6-WT小鼠相比,B6-NASP^M小鼠体质量、肾脏指数和脾脏指数均无明显变化,其血清抗dsDNA IgG水平明显升高,肾小球细胞增生明显、IgG以及C3的沉积增加。脾脏CD3+T细胞、自然杀伤(NK)细胞比例降低、CD19+B细胞、调节性B细胞(Breg)比例增加。结论NASP基因突变促进小鼠产生更高水平的抗dsDNA IgG,促进肾脏肾小球内细胞增生、IgG及C3的沉积,并改变小鼠脾脏的免疫细胞的比例,加重狼疮模型小鼠的自身免疫应答。

小鼠NASP基因突变对脾脏淋巴细胞亚群的影响

目的制备NASP基因突变小鼠,探讨NASP基因突变对小鼠脾脏淋巴细胞亚群的影响。方法通过ES打靶技术定点突变小鼠NASP基因,提取鼠尾DNA,通过PCR和DNA测序技术鉴定突变阳性小鼠B6-NASP^M,通过RT-PCR和Western blot检测NASP的mRNA和蛋白表达水平。取6月龄B6-WT小鼠和B6-NASP^M小鼠脾脏,计算脾脏指数并用流式细胞仪检测脾脏淋巴细胞亚群的比例和细胞周期。结果PCR和DNA测序检测显示,成功制备了B6-NASP^M小鼠;NASP基因突变后不影响NASP蛋白在皮肤、脾脏、胸腺的表达。NASP基因突变对小鼠脾脏指数无显著影响(P>0.05)。流式细胞术检测结果表明,B6-NASP^M小鼠与B6-WT小鼠相比,其脾脏CD3^+T细胞比例下降(P<0.01),CD19^+B细胞比例上升(P<0.01);CD3^+CD4^+T细胞比例下降(P<0.05),CD3^+CD8^+T细胞比例上升(P<0.01),CD4/CD8比值下降(P<0.01);NK细胞比例下降(P<0.05)。B6-NASP^M小鼠脾脏淋巴细胞S期细胞略高于B6-WT小鼠(P<0.05)。结论NASP基因突变不影响NASP蛋白的表达,但可以改变小鼠脾脏的淋巴细胞的比例,造成B细胞比例升高,T细胞比例降低,降低CD4/CD8比值,从而造成小鼠免疫功能紊乱。

膳食纤维的黏度特性及其生理功能研究进展

膳食纤维被称为第七大营养素,是一种重要的功能性食品成分,具有广泛的理化性质及生理功能。其中,黏性多糖可使膳食纤维在液体中产生黏性。本文主要通过阐述膳食纤维黏度的研究现状,包括其基本概念、测量仪器和方法、影响其黏度的因素等方面,总结了膳食纤维中的黏性多糖在调节血糖反应、降血脂、影响肠道酶活性和消化率、润肠通便等方面的生理功能,为今后深入研究膳食纤维黏度特性、生理活性及其在食品领域中的应用提供一定的科学依据和理论参考。

小鼠Skint6基因突变对脾脏淋巴细胞亚群的影响

目的:制备Skint6基因突变小鼠模型,探究Skint6基因突变对小鼠脾脏各淋巴细胞亚群的影响。方法:利用CRISPR/Cas9技术定点突变小鼠Skint6基因,高分辨率熔解曲线(HRM)和DNA测序鉴定Skint6基因突变小鼠(B6-Skint6^(M));取6月龄B6-WT小鼠和B6-Skint6^(M)小鼠,qRT-PCR检测小鼠皮肤Skint6基因mRNA水平,考马斯亮蓝G-250法测定小鼠尿蛋白水平;计算小鼠体质量、脾脏指数和总细胞数并通过流式细胞术(FACS)检测其脾脏中各淋巴细胞亚群比例并计算细胞绝对数。结果:DNA测序结果显示B6-Skint6^(M)小鼠模型制备成功;qRT-PCR结果表明Skint6基因突变不影响皮肤Skint6 mRNA表达。B6-Skint6^(M)小鼠尿蛋白含量明显高于B6-WT小鼠(P<0.05)。Skint6基因突变对小鼠体质量、脾脏指数无显著影响(P>0.05)。FACS结果表明,与B6-WT组小鼠相比,B6-Skint6^(M)小鼠脾脏细胞数及淋巴细胞数明显增多(P<0.01);CD3^(+)T细胞比例及细胞绝对数明显上升(P<0.01,P<0.05),CD19^(+)B细胞比例下降(P<0.05);CD3^(+)T淋巴细胞亚群中CD8^(+)T细胞比例降低(P<0.01),双阴性T细胞(DNeg)比例及细胞绝对数明显上升(P<0.01,P<0.05);CD4^(+)CD69^(+)活化T细胞比例及细胞绝对数上升(P<0.05,P<0.01),CD4^(+)CD44^(hi)T细胞比例及细胞绝对数上升(P<0.01);Treg比例及细胞绝对数明显下降(P<0.001);Tfh细胞比例及细胞绝对数上升(P<0.05);Breg比例及细胞绝对数上升(P<0.05);CD3^(+)T淋巴细胞亚群中非典型CD3^(+)B220^(+)T细胞比例及其细胞绝对数增高(P<0.001)。结论:Skint6基因突变不影响皮肤中Skint6 mRNA表达,但可影响小鼠脾脏淋巴细胞亚群比例、细胞绝对数和活化状态,从而引起小鼠免疫功能紊乱。