常州地区女性人乳头瘤病毒感染及基因型分析

目的 了解江苏常州地区妇女宫颈人乳头瘤病毒（HPV）感染的分布情况,为该地区宫颈疾病防治及疫苗的投入使用提供一定的依据.方法 采用导流杂交基因芯片技术对1 016例有性生活史妇女宫颈脱落细胞进行21种HPV基因型检测.结果 在被调查的1 016例妇女中共有20种HPV亚型被检测出来.HPV感染总阳性率为27.8%,高危型检出率为25.6%,低危型为3.4%,混合型感染为6.2%.HPV感染阳性排在前5位的亚型从高到低依次为HPV16,58,52,31和68.随着宫颈疾病病变级别升高,HPV感染率呈正向增加趋势.结论 常州地区HPV亚型感染分布以高危型HPV16,58,52,31,68为主,早期筛查和控制HPV感染能有效降低宫颈癌的发病率.

血必净对大鼠外伤性脑损伤后血清S100B和IL-6水平的影响

目的:探讨血必净对大鼠外伤性脑损伤的神经保护机制。方法:将40只健康成年雄性SD大鼠随机分成4组:正常对照组、血必净治疗组、胞二磷胆碱治疗组和生理盐水组。采用改进的Feeney氏法制作大鼠自由落体脑创伤模型。伤后第6小时、第24小时、第3天、第5天、第7天断尾采血,运用双抗体夹心ELISA方法检测各组治疗后血清中S100B蛋白和白细胞介素-6(interleuk in-6,IL-6)的含量。结果:与正常对照组相比,血必净治疗组、胞二磷胆碱治疗组和生理盐水组血清中S100B蛋白和IL-6的含量均显著升高(P<0.001);与生理盐水组相比,血必净治疗组和胞二磷胆碱治疗组血清中S100B蛋白和IL-6的含量显著降低(P<0.001);与胞二磷胆碱治疗组相比,血必净治疗组血清中S100B蛋白和IL-6的含量显著降低(P<0.05)。结论:血必净可能通过抑制脑外伤后S100B和IL-6的合成与分泌,降低全身和局部的炎症反应程度,从而发挥神经保护作用。

CRP水平及基因多态性和急性心肌梗死发病风险的关系

目的探讨中国苏南地区汉族人群血清C-反应蛋白(CRP)水平、CRP基因C+1444T多态性与急性心肌梗死(AMI)的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测了227例AMI患者(AMI组)和161例非冠心病者(对照组)的CRP基因C+1444T多态性,并应用酶联免疫吸附试验测定血清CRP水平。结果 AMI组CRP基因C+1444T型分布频率为CC 82.38%、CT 17.62%、TT 0%;对照组分别为CC 86.96%、CT 13.04%、TT 0%,两组基因型分布频率之间差异无统计学意义(P>0.05)。AMI组血清CRP水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。不同基因型之间的血清CRP水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论中国苏南地区汉族人群的CRP基因C+1444T多态性不增加AMI的易感性,并且不影响其血清CRP水平。

丹参酮ⅡA对2型糖尿病患者外周血中内皮祖细胞的影响

目的探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对糖尿病(DM)患者外周血中内皮祖细胞的影响及可能机制。方法将62例2型DM患者随机分为对照组和实验组,实验组在常规治疗基础上每天加用TanⅡA40mg,持续两周,测定治疗前后外周血中内皮祖细胞(EPCs)数量、EPCs表面CXCR4阳性率、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)浓度。结果实验组治疗后较本组治疗前和对照组治疗后SDF-1、EPCs、CXCR4上升差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);EPCs与SDF-1有显著性正相关(r=0.223,P<0.05)。结论TanⅡA可能是通过提高外周血中SDF-1水平和上调CXCR4的表达,诱导EPCs从骨髓动员进入外周血中而改善2型DM患者内皮功能。

2型糖尿病患者外周血中SDF-1水平和内皮祖细胞CXCR4表达率的变化

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)患者外周血中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)水平和内皮祖细胞(EPCs)表面SDF-1受体CXCR4表达率的变化及意义。方法:测定104例T2DM患者和26例健康对照者外周血中SDF-1水平、EPCs数量和CXCR4表达率。糖尿病患者分单纯糖尿病组、血管病变组。结果:SDF-1水平和EPCs数量对照组、单纯糖尿病组、血管病变组依次下降(P<0.05或<0.01);CXCR4表达率单纯糖尿病组较对照组、血管病变组升高(P<0.05或<0.01),血管病变组较对照组降低(P<0.05);SDF-1水平与EPCs数量成正相关(r=0.241,P<0.05)。结论:T2DM患者外周血中SDF-1/CXCR4轴与EPCs的数量及功能密切相关,参与血管病变的发生与发展。

糖尿病肾病患者外周血中SDF-1水平的变化及意义

目的探讨糖尿病肾病(DN)患者外周血中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)水平的变化及意义。方法测定74例2型糖尿病(DM)患者和26例健康对照者(NC组)外周血中SDF-1水平、内皮祖细胞(EPC)数量、EPC表面SDF-1的受体CXCR4表达率。DM患者按尿白蛋白排泄率分单纯DM组(SDM组)、早期DN组(EDN组)、临床DN组(CDN组)。结果SDF-1水平和EPC数量NC组、SDM组、EDN组、CDN组依次下降(P<0.05或0.01);CXCR4表达率SDM组较另3组升高(P<0.05或0.01),CDN组较其它组降低(P<0.05或0.01);2型DM患者SDF-1与HBA1c、病程、收缩期血压负相关(r=-0.398、-0.257、-0.241,P<0.05或0.01),SDF-1与EPC正相关(r=0.278,P<0.05);UAER与SDF-1、EPC负相关(r=-0.263、-0.248,P<0.05),UAER为因变量多元逐步回归分析,进入方程的变量依次为HBA1c、收缩压、SDF-1、EPC和病程。结论2型DM患者外周血中SDF-1/CXCR4轴的变化与DN的发生、发展有关。

慢性心力衰竭患者促炎性和抗炎性细胞因子的变化及临床干预研究

目的探讨慢性心力衰竭（CHF）患者炎性细胞因子变化对心功能的影响及临床干预后的效果。方法选择100例CHF患者（心衰组）及50例无心脏病的健康体检者（对照组），取静脉血6ml，采用CBA蛋白分析系统检测白细胞介素－8（IL－8）、TNF－α、白细胞介素－10（IL－10）水平，并做心脏超声检测。心衰组中随机选择68例分为西拉普利组和常规治疗组治疗，两组分别25例和20例完成随访12周。治疗12周时检测血清IL－8、IL－10和TNF－α水平及心脏超声。结果心衰组患者血清中IL－8、TNF－α、IL－10水平均明显高于对照组（P〈0．01）；IL－8、TNF－α及IL－10三者间互呈正相关（P〈0．05）；IL－8／IL－10及TNF－α及IL－10比值随CHF的加重而升高（P〈0．05）；西拉昔利组治疗后较治疗前血清IL－8、TNF－α水平显著下降（P〈0．05），IL－10水平呈上升趋势，心脏超声除左心室舒张末期内径外，各项指标均有显著改善；常规治疗组治疗后较治疗前仅LVEF和缩短分数有所改善，细胞因子水平无显著变化。结论CHF时各种炎性细胞因子分泌异常，抗炎性细胞治疗有望成为治疗CHF的新方法。

类风湿关节炎患者外周血单核细胞Toll样受体4的表达及其与血清白介素-18水平变化的相关性

目的探讨Toll样受体4(toll-like receptor-4,TLR4)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单核细胞表面的表达及其与血清白介素(interleukin,IL)-18变化的相关性。方法用流式细胞术分别检测34例RA患者、39例健康体检者和7例骨性关节炎(osteoarthritis,OA)患者外周血单核细胞表面TLR4的阳性率和平均荧光强度(meam fluorescence intensity,MFI),同时用酶联免疫吸附试验测定血清中IL-18的水平变化,分别统计TLR4阳性率与IL-18相关性及与疾病活动评分(disease activity score28,DAS28)的相关性。结果 TLR4在RA高度活动组、中低度活动组的CD14+单核细胞表面的阳性率分别为(24.58±10.13)%、(32.47±12.40)%,高于对照组(13.14±5.22)%和OA组(10.23±3.40)%,4组间差异有显著统计学意义(P<0.01);而MFI在RA高度活动组(47.34±19.85)道、中低度活动组(42.56±17.41)道低于对照组(59.38±28.05)道和OA组(67.90±31.40)道,4组间差异有显著统计学意义(P<0.05)。RA高度活动组的血清IL-18水平为(236.71±39.42)pgml,显著高于中低度活动组(195.32±20.69)pg/ml和正常对照组(185.49±42.96)pg/ml(均P<0.01),且3组间差异亦有统计学意义(P<0.01)。TLR4阳性率与IL-18水平呈正相关(r=0.261,P<0.05),而与DAS28呈负相关(r=-0.722,P<0.05)。结论 TLR4在RA患者外周血CD14+单核细胞表面表达上调且与血清IL-18的水平呈正相关,而与DAS28呈负相关。提示TLR4可能间接参与RA的发病过程,为RA的发病机制奠定了分子基础。

老年急性冠脉综合征患者KLOTHO基因C-1818T多态性分析

目的:观察中国苏皖地区汉族老年(≥60岁)人群KLOTHO基因第4外显子C-1818T多态性分布,探讨其与老年人急性冠脉综合征(ACS)的可能关系。方法:采用聚合酶链反应及基因芯片技术,检测272例老年ACS患者(ACS组)和139例老年非冠心病者(对照组)的KLOTHO基因C-1818T多态性。结果:(1)与对照组相比:ACS组CT基因型频率明显升高,差异有统计学意义(30.9vs20.9,P=0.031),CC、TT基因型及T等位基因频率差异均无统计学意义(分别为72.7vs65.4、6.5vs3.7和16.9vs19.1,P值均>0.05)。(2)将ACS组按性别进行进一步分析后发现,分别与对照组相比:①男性CT基因型频率明显升高,差异有统计学意义(28.5vs16.7,P=0.041),CC、TT基因型及T等位基因频率差异无统计学意义(分别为75.6vs68.5、7.7vs3.0和16.0vs17.3,P值均>0.05);②女性CC、CT、TT基因型及T等位基因频率差异无统计学意义(分别为68.9vs56.9、26.2vs37.5、4.9vs5.6和18.0vs24.3,P值均>0.05)。在调整相关危险因素并经多元Logistic回归分析后,与对照组相比:ACS组(优势比=1.993,95可信区间=1.180-3.367,P=0.010)和ACS组男性患者(优势比=2.156,95可信区间=1.010-4.602,P=0.047)CT基因型频率均显著升高,差异有统计学意义。结论:在中国苏皖地区汉族老年人群(特别是老年男性)中,ACS患者CT基因型频率升高,提示KLOTHO基因C-1818T多态性CT基因型与老年人特别是老年男性ACS的发病存在相关性。

针刺治疗对重型颅脑损伤患者脑脊液中IL-6、IL-10表达的影响

目的观察针刺治疗对重型颅脑损伤患者脑脊液中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)表达的影响,探讨针刺治疗实现脑保护的机理。方法将39例重型颅脑损伤患者按入院时间随机分为针刺组(20例)和对照组(19例)。对照组患者给予常规治疗;针刺组在常规治疗基础上针刺劳宫、厉兑和涌泉三穴位。应用Partec流式细胞仪测定患者入院后第1天、2天、3天和第5天脑脊液中IL-6及IL-10的含量。结果针刺组脑脊液中IL-6浓度在入院后第1天最高,第2、3、5天持续下降,均明显低于同期对照组(P<0.05);针刺组患者脑脊液中IL-10浓度在入院后第1天较高,高于对照组,第2、3、5天持续下降,均低于同期对照组,但差异均无显著性(P>0.05)。结论针刺治疗可明显抑制颅脑损伤后患者脑脊液中IL-6的表达,并有可能减轻IL-6表达水平上调相关的炎症反应所介导的继发性脑组织损伤。

江苏汉族人群杀伤细胞免疫球蛋白样受体及其特异性配体HLA分析

目的:分析杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)及其特异性配体HLAⅠ类分子在江苏地区汉族人群的分布特点。方法:分别利用real-time PCR法和PCR-SSP方法对173例无血缘关系的江苏汉族健康人群进行KIR和HLA-Cw,HLA-Bw4分型,并分析KIR/HLA配对组合的类型和数量。结果:江苏汉族人群中,>92%的个体同时表达四种抑制性KIR(iKIR)(2DL1,2DL2/3,3DL1,3DL2)。2DL2/HLA-C1,2DL3/HLA-C1,2DL1/HLA-C2,3DL1/Bw4的频率分别依次分别为0.243,0.971,0.457,0.590;2DS1/HLA-C2,2DS2/HLA-C1的频率为0.162,0.231。54.3%的个体只表达2DL1而不表达相应的配体HLA-C2,32.9%的个体只表达3DL1而缺乏配体HLA-Bw4,另有5.8%的个体只表达HLA-Bw4而不表达3DL1。27.7%的个体同时表达3种iKIR/HLA,26%的个体同时表达两种iKIR/HLA,25.4%的个体只遗传一个iKIR/HLA配对,未发现3种iKIR/HLA同时缺失的个体。结论:在江苏汉族人群中,存在KIR与HLA表型分离现象,抑制性KIR/HLA配对表达高于刺激性KIR/HLA配对,约1/4个体只表达单个iKIR/HLA配对。

SYBR green Ⅰ实时荧光PCR法检测KIR基因型

目的:建立一种新的杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因分型方法。方法:利用16对KIR序列特异性引物和两对内参照引物及荧光染料SYBR Green I进行实时聚合酶链反应(real-time PCR),分析各扩增产物的熔解曲线,确定各个KIR基因熔解温度和特征,并以此为依据判断16种KIR基因的出现或缺失。对样本DNA进行不同倍数稀释检测该方法的敏感性。结果:分析熔解曲线能有效地进行KIR基因分型。该方法甚至可以对0.1 ng DNA的样本成功进行KIR分型。利用该方法成功地对10例外周血基因组DNA和10例宫颈细胞基因组DNA进行了KIR分型。结论:SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR应用于KIR基因分型,具有简单、快速、敏感、实时和环保的特点,为实现KIR分型的自动化提供可能性。

花生四烯酸5-脂氧合酶激活蛋白基因多态性与急性冠状动脉综合征的易感性

目的探讨花生四烯酸5脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因SG1 3S114T/A多态性与急性冠状动脉综合征(ACS)的易感性。方法选择住院的胸痛患者714例,将确诊为ACS的患者377例作为ACS组,非ACS患者337例作为对照组,采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性方法检测ALOX5AP基因SG13S114T/A多态性,并进行logistic回归分析。结果 ACS组患者AA、AT和TT基因型频率分别为1 3.79%、50.93%和35.28%,对照组患者分别为12.76%、38.58%和48.66%,2组AT和TT基因型频率差异有统计学意义(P=0.041,0.020);ACS组男性AT基因型频率高于对照组(P=0.040),女性TT基因型频率低于对照组(P=0.013)。SG13S114T/A位点AT和TT基因型以及T等位基因是所有ACS(P=0.004、0.001和0.013)和男性ACS(P=0.014、0.005和0.020)发病的危险因素。结论 ALOX5AP基因SG1 3S114T/A多态性AT和TT基因型以及T等位基因可能与老年人,特别是老年男性ACS的易感性相关。

C反应蛋白基因多态性C+1444T与UAP相关性研究

目的:探讨中国苏皖地区汉族人群C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)基因C+1444T多态性与不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)的相关性。方法:以142例UAP患者和307例非冠心病者(对照组)作为研究对象,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法检测CRP基因C+1444T多态性。结果:CC、CT和TT基因型频率在UAP组和对照组的分布无统计学差异(P值分别为0.117、0.061和0.131)。C等位基因频率在UAP组和对照组分别为90.5%和92.86%,2组间差异无统计学意义(P=0.221)。结论:在中国苏皖地区汉族人群中,CRP基因+1444C/T多态性与UAP的发病无明显相关。

反应性关节炎患者淋巴细胞亚群和免疫球蛋白检测的临床意义

目的:研究反应性关节炎(ReA)患者外周血淋巴细胞亚群以及血清免疫球蛋白的变化及临床意义。方法:采用流式细胞术检测56例ReA患者和53例健康对照组外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD16+56+NK、CD19+B细胞的百分率;免疫比浊法检测血清IgG、IgA及IgM含量。结果:ReA患者与正常对照组比较,CD4+T淋巴细胞百分率、CD4+/CD8+比值及CD19+B淋巴细胞百分率均明显增高(P<0.01);血清IgG水平升高(P<0.05);CD15+56+NK细胞百分率明显降低(P<0.01);CD3+T、CD8+T淋巴细胞的百分率及血清IgM、IgA含量与正常对照组相比差异无统计学意义。结论:反应性关节炎患者体内细胞和体液免疫功能紊乱,监测ReA患者体内淋巴细胞亚群和免疫球蛋白水平,对于ReA的免疫治疗具有重要的临床意义。

急性冠脉综合征患者血小板反应蛋白-1基因多态性分析

目的研究中国人群血小板反应蛋白-1（TSP-1）基因A2210G（N700S）多态性与急性冠脉综合征（ACS）的相关性。方法采用病例-对照研究,入选2005年6月-2010年11月在江苏大学附属武进医院和江苏省人民医院住院的412例ACS患者及同期337例非冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）者作为对照组,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析的方法检测TSP-1 A2210G多态性,采用logistics回归分析TSP-1基因多态性分布与ACS的相关性。结果 TSP-1基因A2210G多态性AG基因型在ACS组和对照组的分布无显著性差异（1.5%vs.0.6%,P=0.43）,未检测到GG纯合子。G等位基因频率在ACS组和对照组分别为0.7%、0.3%（P=0.43）。多元Logistic回归分析显示,TSP-1基因AG基因型与ACS无显著相关性（OR=2.36;95%CI：0.46-12.48;P=0.46）。结论 TSP-1基因700N→S变异在中国人群中发生频率低,且与ACS的发病无显著相关性。

内皮脂肪酶584C/T多态性与急性冠脉综合征相关性研究

目的:探讨内皮脂肪酶(endothelial lipase,EL)基因584C/T多态性与急性冠脉综合征(acute coronary syn-drome,ACS)及血脂的相关性。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测324例ACS患者和299例健康体检者内皮脂肪酶基因584C/T基因型。结果:ACS组血清HDL、ApoA-I水平及ApoA-I/ApoB明显低于对照组,而LP(α)却明显高于对照组。中国常州地区汉族人群存在EL 584C/T基因多态性,基因型及等位基因频率分布符合Hard-Weinberg平衡。ACS组CC、CT、TT基因型频率分别为60.2%、35.8%、4.0%;对照组CC、CT、TT基因型频率分别为56.2%、40.8%、3.0%;两组间基因型频率分布无统计学意义(P=0.389)。ACS组C等位基因频率为78.1%;对照组C等位基因频率为76.6%,两组间等位基因频率差异也无统计学意义(P=0.528)。经校正性别、年龄、糖尿病、高血压、吸烟、高脂血症等冠心病危险因素后,结果仍然表明该多态性与ACS无明显相关性。T等位基因携带者(CT+TT)血脂水平及其比值与CC基因型者比较差异无统计学意义。结论:中国常州地区汉族人群EL 584C/T基因多态性与ACS无明显相关性,与血脂及其比值也无明显相关性,EL 584C/T多态性可能不是中国常州地区汉族人群ACS发病的易感因素。

不稳定型心绞痛患者C-反应蛋白基因多态性与其血清水平的相关性

目的:探讨中国苏南地区汉族人群不稳定型心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)患者C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)基因+1444C/T多态性与其血清CRP水平的相关性。方法:本研究包括172例不稳定型心绞痛患者(UAP组)和230例非冠心病者(对照组),分别应用酶联免疫吸附法和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法检测血清CRP水平及CRP基因+1444C/T多态性。结果:①本研究人群存在CRP基因+1444C/T多态性;②UAP患者血清CRP水平(8.269/9.179μg/ml)显著高于非冠心病者(3.578/2.236μg/ml)(P<0.001),且经多因素Logistic回归校正各影响因素后,仍提示血清CRP水平与UAP发病风险相关;③血清CRP水平在UAP组与对照组各基因型之间无显著差异(P>0.05),进一步按性别和年龄分组后,仍未发现该基因多态性不同基因型间的血清CRP水平有任何差异(P>0.05)。结论:中国苏南地区汉族人群CRP+1444C/T基因多态性与血清CRP水平无相关性。

KLOTHO基因C-1818T多态性与中国苏皖地区汉族人群急性冠脉综合征的相关性分析

目的:探讨KLOTHO基因第4外显子C-1818T多态性与中国苏皖地区汉族人群急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的可能关系。方法:应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)及基因芯片(gene microarray)技术对375例ACS患者(ACS组)和235例经相关检查排除冠心病(CAD)者(对照组)进行KLOTHO基因C-1818T多态性的检测。结果:与对照组相比:①ACS患者CC、CT和TT基因型以及T等位基因型频率分布无显著差异;②老年人(≥60岁)、男性和老年男性ACS患者的CT基因型频率均明显升高(P值分别为0.031、0.035和0.041)。在调整相关危险因素并经多元Logistic回归分析后,CT基因型与老年人和老年男性ACS均存在相关关系(P值分别为0.010和0.047),与男性ACS无明显相关关系(P=0.103)。结论:在中国苏皖地区汉族人群中,KLOTHO基因C-1818T多态性CT基因型与老年和老年男性ACS的发病均存在相关性。