创新实验室管理模式的研究与实践

创新实验室的核心目标就是提高大学生的创新能力,通过对高校创新实验室管理模式的研究,以"以人为本、因材施教、加强管理、自主发挥"为方针,采用多种措施(包括场所建设、制度建设、内涵建设、管理方案、配套措施等),实现提高创新能力的核心目标,取得良好的效果,但还需进一步的探索和研究。

谈高等职业教育研究的主要内容与注意的问题

高职教育是一种新型的教育形式,办学经验缺乏,因此有必要加强教育研究,在借鉴引进国外办学经验的同时,探讨符合高职教育自身发展规律的理论体系.目前高职教育的主要内容重点应是教育的定位与特色、人才市场、教育对象、教学内容与方法等.研究中应注意开辟新思路,进行社会调查,联系工作实际,针对具体问题深入探讨.

佐剂性关节炎大鼠血清白细胞介素4、白细胞介素10含量及滑膜组织病理形态学对针灸干预的反应

取雄性SD大鼠60只,按体质量随机分为4组,每组15只。正常组大鼠不做任何处理,其余各组大鼠用弗氏完全佐剂制作佐剂性关节炎大鼠模型。模型组不做任何治疗,针刺治疗组用电针刺激肾俞穴,刺血治疗组则在照海穴刺络放血。与正常组比较,模型组大鼠关节滑膜炎细胞浸润、滑膜细胞和滑膜纤维组织增生显著增多(P<0.01),血清白细胞介素4、白细胞介素10含量降低。与模型组比较,各治疗组关节滑膜组织形态学改变减轻,其中针灸治疗组病理改变减轻较刺血治疗组明显;针灸组血清白细胞介素4、白细胞介素10含量显著增高(P<0.01)。结果表明针灸治疗能有效减轻类风湿性关节炎对滑膜组织病理形态学的改变,其机制之一可能与其提高佐剂性关节炎模型大鼠血清白细胞介素4、白细胞介素10含量相关。

肺炎克雷伯菌新的qnrB31和qnrB32基因的特性

目的研究肺炎克雷伯菌中质粒介导的喹诺酮类耐药基因的分布和特性。方法 PCR检测qnr、qepA、aac(6')-Ib-cr基因,阳性产物进行DNA测序以确定其基因型,接合转移试验探讨质粒介导的喹诺酮类耐药基因的体外转移性,稀释法测定试验菌株的MIC,用切胶回收的方法初步定位耐药基因。结果我们在肺炎克雷伯菌KP3606株发现新的基因亚型qnrB31,GenBank登录号为HQ418999,肺炎克雷伯菌KP4047株发现新的基因亚型qnrB32,GenBank登录号为HQ704413;体外接合转移试验获得成功,各菌株和各接合子对喹诺酮类药物敏感试验有不同的结果,未检出qnrA、qnrS、qnrC、qnrD、qepA、aac(6')-Ib-cr基因;经基因定位,qnrB31和qnrB32基因位于约23kb的质粒上。结论在喹诺酮类耐药的各种基因中,qnrB是最有可能发生变异的基因,应引起足够的重视。

广泛耐药鲍曼不动杆菌OXA酶基因检测及OXA-23基因分析

目的研究台州学院医学院附属市立医院广泛耐药的鲍曼不动杆菌(Ab)苯唑西林酶(OXA酶)基因的分布特性及OXA-23基因特点。方法对60株Ab采用肉汤稀释法检测其最低抑菌浓度(MIC);聚合酶链反应(PCR)检测OXA酶的基因型,阳性产物进行DNA测序;对OXA-23阳性的菌株通过BamHⅠ酶切分析OXA-23以及周围基因的特性。结果 60株Ab对15种抗菌药物同时存在13种以上耐药;全部菌株检出OXA-2、OXA-10、OXA-24和OXA-58,为普遍流行;27株检测到OXA-51,为次要流行。普遍流行的OXA-2以OXA-2基因型(61.7%)和OXA-53基因型(21.7%)为主;OXA-10以OXA-10基因型(53.3%)和OXA-56基因型(23.3%)为主;OXA-24以OXA-24基因型(38.3%)和OXA-33基因型(36.7%)为主;OXA-58只有OXA-58(100%)为唯一基因型;次要流行的27株Ab OXA-51中有18株为OXA-51基因型(30.0%)。另外3株Ab属于OXA-23,都是OXA-23基因型,有关的基因结构包含转座子Tn2008和基因结构ISAba1-blaOXA-23。结论该院的OXA型β-内酰胺酶基因型以OXA-58与OXA-2为主要流行,而对于3株OXA-23及其周围基因检测表明,ISAba1与转座子Tn2008复合基因以及ISAba1与blaOXA-23的复合基因是其与众不同的特点。

亚健康的检测方法回顾

亚健康状态(Subhealth Status)是指机体虽无明确疾病,却呈现活力降低,适应力不同程度减退的一种生理状态,是介于健康与疾病之间的第三状态.人群中约有70%的人处于亚健康状态.许多医学专家认为,亚健康正成为威胁全球的世纪病.我国对亚健康的研究也在不断增多.国内研究者在研究中对亚健康的检测方法主要有以下几类.

丙肝核心抗原-CD40L胞外段真核表达载体的构建及其免疫原性分析

目的构建丙肝核心抗原-CD40L胞外段融合蛋白真核表达载体,并探讨其免疫原性。方法应用基因重组技术在原有载体的基础上构建真核表达载体pcDNA3.1-core-CD40L并加以鉴定。该表达质粒肌肉内注射免疫小鼠,ELISA法检测小鼠外周血中抗丙肝核心抗体,流式细胞仪检测小鼠外周血T淋巴细胞亚型,real time PCR法检测外周血单个核细胞内细胞因子,CTL杀伤实验检测小鼠脾淋巴细胞的杀伤活性。结果构建了真核表达载体pcD-NA3.1-core-CD40L,该载体能诱发小鼠产生高滴度的抗丙肝核心抗原的抗体,流式和real time结果证实该质粒能诱使小鼠T淋巴细胞由T0期向Th1和Th2转换,并以Th1为主,CTL杀伤结果显示该表达质粒能诱使小鼠产生高水平的细胞杀伤能力。结论成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-core-CD40L,该质粒能够在小鼠体内正确表达,并能诱发高水平的细胞杀伤活性。

台州市城乡小学生生长发育状况调查

目的:了解台州市城乡小学生生长发育及健康状况,同时为进一步开展儿童健康方面的研究提供基础资料。方法:采取整群抽样方式,城乡各抽取一所小学,按《中国学生体质·健康状况工作手册》要求, 进行体格发育方面的测试。结果:城市小学生男女各项发育指标均优于农村小学生,二者有显著差异。结论:儿童体格发育状况与经济水平有密切关系。

多药耐药大肠杆菌OXA基因检测及聚类分析

目的研究笔者医院多药耐药的大肠杆菌OXA基因的分布特性。方法采用MIC法,用Microscan公司肉汤稀释法药敏板来检测细菌的药敏结果;PCR检测OXA-1 Cluster、OXA-2 Cluster、OXA-10 Cluster、OXA-20 Cluster、OXA-23 Clus-ter、OXA-24 Cluster、OXA-51 Cluster、OXA-58 Cluster等基因,阳性产物进行DNA测序以确定基因亚型;用SPSS 17.0软件作聚类分析。结果药敏试验结果,实验菌株对阿米卡星、头孢西丁、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦的敏感率为60%～70%,对亚胺培南、美洛培能的敏感率为100%,而对头孢菌素类抗生素的敏感率较低,在30%以下;OXA基因PCR结果:以OXA-10 cluster和OXA-2 cluster流行为主,分别占检测菌株的31.3%和28.1%;测序结果:在OXA-10 cluster中以OXA-10基因与OXA-17为主,分别占3/10(30.0%),OXA-16基因次之,占2/10(20.0%);在OXA-2 cluster中以OXA-15基因为主,占4/9(44.4%),OXA-3基因和OXA-53基因次之,分别占2/9(22.2%);对分别以1,2,3,…,31,32编号的32株实验菌株OXA基因的检测结果聚类分析结果表明:实验菌株28-32-6-23-26-18-22-12-15-11株,8-30株,17-31-3株,1-24株,19-27-2-10-14-5株,4-29株,7-1株为OXA耐药基因克隆传播菌株;进一步对OXA基因测序结果作聚类分析结果表明:OXA-25、OXA-33、OXA-4、OXA-13、OXA-56基因型,OXA-10、OXA-17基因型,OXA-16、OXA-24、OXA-1、OXA-3、OXA-53基因型,OXA-15、OXA-20基因型为OXA耐药基因克隆传播的类型。结论在笔者医院存在OXA耐药基因医院内感染的趋势,并有暴发性流行的可能。

多药耐药铜绿假单胞菌耐药基因的研究

目的了解临床分离的多药耐药铜绿假单胞菌的耐药性及相关基因存在状况,为临床抗菌药物应用提供依据。方法对分离的49株铜绿假单胞菌用Microscan公司肉汤稀释法药敏板测定15种抗菌药物的敏感性;用聚合酶链反应(PCR)法检测49种铜绿假单胞菌相关耐药基因及外膜通道蛋白oprD2基因,并作R型聚类分析。结果多药耐药铜绿假单胞菌对氨基糖苷类的阿米卡星与喹诺酮类的左氧氟沙星耐药率耐药率相对较低,分别为24.5%、38.8%,对β-内酰胺酶类、头霉素类、碳青霉烯类、β-内酰胺酶与酶抑制剂复合物等抗菌药物的耐药率均>60.0%,提示试验菌株包含不同种类的耐药基因;49株多药耐药铜绿假单胞菌存在13种不同类型的β-内酰胺酶基因,其中A类与D类β-内酰胺酶基因的检出率较高,C类与B类β-内酰胺酶基因较低;A类有PER、TEM、SHV、CTX-M-13型等基因,分别占28.6%、32.7%、46.9%、2.0%;D类有OXA-10、OXA-14、OXA-17、OXA-2、OXA-23、OXA-51等基因,分别占24.5%、8.2%、6.1%、2.0%、4.1%、6.1%;C类检出DHA和MOX基因,分别占14.3%和6.1%;B类检出VIM2基因,占6.1%;检出3种氨基糖苷类修饰酶基因:aac(3)-Ⅰ(4.1%),aac(3)-Ⅲ(8.2%),aac(6′)-Ⅰb-Cr(2.0%),以aac(3)-Ⅲ最多;检出喹诺酮类耐药qnrB2与qnrB4基因,分别占6.1%和2.0%;检出oprD2基因高达85.7%;检出整合子遗传标志Int I1基因有5株,占10.2%;检出获得性抗菌制剂外排泵基因qacE1-sull基因有2株,占4.1%。结论 49株多药耐药铜绿假单胞菌对头孢菌素耐药主要与A类与D类β-内酰胺酶基因有关;oprD2基因的存在是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因。

开放性实验教学模式的研究与实践

目的探索培养适应社会需求，具有创新素质，卓越应用型医学人才的有效途径。方法在实验教学中，坚持以“发展个性、因材施教”的原则，采用不同类型的开放性实验教学模式，进行近百项开放实验项目的研究与实践。结果提高了大学生综合素质和创新能力，取得了显著成效。学生发表论文二十余篇，9个项目的成果获得了校级科研一、二等奖。结论高等学校开展开放性实验教学是提高整体教学质量的根本保证，是培养卓越应用型医学人才的新模式。

HCV发夹状siRNA表达质粒的构建及作用研究

目的建立HCV感染动物模型,并对HCV进行RNA干涉。方法制备HCV感染的HepG2细胞,RT-PCR法鉴定后腋下注射裸鼠,免疫组化法检测瘤组织内HCV NS3表达情况。制备带绿色荧光蛋白(GFP)的HCVsiRNA表达质粒,转染HepG2细胞,观察GFP表达情况。将此质粒注射模型小鼠,取瘤组织,RT-PCR及免疫组化法对其进行检测。结果在HCV感染的裸鼠实体瘤中检测到HCV NS3蛋白的稳定表达。成功构建了HCV发夹siRNA表达质粒,该质粒转染细胞后能够在其内正确表达。将该质粒尾静脉注射HCV感染的模型小鼠,注射4d后瘤组织内HCV NS3抗原阳性细胞阴转。结论成功建立了HCV感染的裸鼠模型,构建了HCV发夹siRNA表达质粒,该质粒能成功地干涉模型小鼠中的HCV。

肺炎克雷伯菌中发现新的qnrB31和qnrB32基因亚型

近来的研究发现，由质粒介导的qnr各类基因、aac（6’）-Ib-cr基因、qepA基因、mdfa基因的变异是引起喹诺酮类耐药的主要原因。这些基因缺乏分子或转座子介导，极易在同种或不同种细菌间传播。自从2006年JacobyGA等在肺炎克雷伯菌上首先发现qnrBl基因以来，陆续有新的qnrB亚型发现。

大肠埃希氏菌的qnrB基因检测与耐药机制研究

目的探索本地区医院大肠埃希氏菌喹诺酮耐药基因的分布及耐药机制。方法采用PCR扩增与测序、基因初步定位、质粒接合转移实验等方法确定喹诺酮耐药的大肠埃希氏菌qnr的基因类型,以分析研究有关的耐药特点与机制。结果各大肠埃希氏菌株中仅qnrB基因阳性,qnrA、qnrS、qnrC、qnrD、qepA、aac(6’)-Ib-cr基因均阴性;并且qnrB基因包括qnrB2、qnrB5、qnrB9、qnrB16、qnrB18、qnrB19和qnrB31等位基因;在这些qnrB等位基因中,qnrB31与qnrB16、qnrB2与qnrB9同源性较高;各qnrB等位基因分别位于约21.0 kb至28.0 kb长的质粒上。结论在本地区医院存在不同的qnrB等位基因流行;实验菌株的喹诺酮耐药与qnrB等位基因结构中LexA-蛋白结合位点共有序列缺失有关。