《国际近视研究院近视防控白皮书Ⅲ》解读

目前,近视的高发生率是全球范围内共同面临的公共卫生问题,近视相关并发症的发生风险日益凸显。国际近视研究院(IMI)于2015年成立,旨在推动近视防控领域的科学研究和临床实践,且已陆续发表了近视诊疗和管理的近视防控白皮书。IMI于2023年发布了第3系列近视防控白皮书,进一步加深和拓展了近视研究和管理的关键问题,重点介绍了轴性近视眼的非病理性眼组织变化及脉络膜在眼球生长发育和近视防控管理中的作用,深入研究了不太典型人群(婴幼儿和青年成人)中近视的发病、进展和管理证据,调查报告了临床实践中近视管理的建议和策略,总结了自2019年以来近视研究中重要的新发现,并将其整合为IMI 2023文摘。本文对IMI第3系列近视防控白皮书的重点内容进行解读,帮助与近视防控相关的专业工作者了解国际相关研究提供的最新证据并优化近视相关疾病的防治策略,推动我国近视防控研究和管理工作的发展。

线粒体Lon蛋白酶及其相关疾病的研究进展

Lon蛋白酶(Lon protease,LON)是一种依赖ATP的高度保守的丝氨酸蛋白酶,负责分解并清除异常蛋白质。作为细胞内环境稳定的重要执行者,LON可与蛋白酶体一同降解折叠错误及损伤蛋白质,保证体内蛋白质的高质量,尤其在线粒体功能的维护方面发挥了较大作用。同时,LON的正常功能对细胞在各种应激下的存活亦具有重要影响。近年来的研究表明,LON表达水平或活性的异常参与了神经退行性疾病、糖尿病、心肌缺血、脑缺血及肿瘤等多种疾病的发生与发展。该文就LON的结构与功能、异常表达与疾病的关系及其活性干预研究进行综述,以期为临床上相关疾病的诊治提供思路。

上海地区6~8岁儿童近视前期流行病学调查

目的 了解上海市6~8岁儿童近视前期的分布现状及进展规律,并分析相关影响因素,为中国儿童青少年近视防控工作的开展提供理论依据。方法 采用随机整群抽样方法,选取上海市8个区8所小学一、二年级2 037名学生开展2年随访调查研究,基线及每年随访时进行视力、睫状肌麻痹电脑验光和眼轴长度等眼科检查,收集相关因素问卷信息,分析近视前期流行病学特征,运用多元Logistic回归分析近视前期和远视儿童发生近视的影响因素。结果 基线、第1年和第2年随访的总体近视前期检出率分别为26.2%,37.3%,41.3%,其中基线时6,7,8岁儿童近视前期检出率分别为20.7%,37.0%,42.6%,2年随访时8,9,10岁儿童为31.5%,38.3%,41.4%,性别间差异无统计学意义(χ^(2)=0.01~2.66,P值均>0.05)。基线近视前期儿童随访1年后近视发病率为31.5%,随访2年后累计近视发病率为62.0%,远高于远视儿童(0.6%和9.0%)。多因素分析结果显示,基线近视前期[OR(95%CI)=15.89(11.65~21.68)]、女生[OR(95%CI)=1.96(1.40~2.74)]、父母均近视[OR(95%CI)=2.66(1.82~3.90)]、基线AL[OR(95%CI)=1.32(1.03~1.69)]与随访2年新发近视呈正相关(P值均<0.05)。结论 近视前期低龄儿童2年内近视发生风险大,是开展监测与近视预防干预的重点人群。

烧伤患者泛耐药肺炎克雷伯菌噬菌体的生物学特性与基因组信息和对细菌生物膜的作用

目的分离可裂解烧伤患者泛耐药肺炎克雷伯菌的噬菌体,研究其生物学特性、基因组信息及对细菌生物膜的作用。方法(1)2018年,取分离自上海交通大学医学院附属瑞金医院(下称瑞金医院)烧伤患者血液的泛耐药肺炎克雷伯菌UA168(下称宿主菌)液,采用污水共培养法及滴板法和双层琼脂平板法,从瑞金医院污水中分离纯化得到烧伤患者泛耐药肺炎克雷伯菌噬菌体,将其命名为噬菌体KP168,观察其噬菌斑形态。(2)取噬菌体KP168液行氯化铯密度梯度离心和透析后,采用磷钨酸负染法通过透射电子显微镜观察噬菌体KP168形态。(3)取噬菌体KP168液,采用滴板法检测其对从瑞金医院烧伤患者血液中分离得到的20株泛耐药肺炎克雷伯菌的裂解能力,计算裂解率。(4)分别以感染复数为10.000、1.000、0.100、0.010和0.001共同常规振荡培养初始效价为9.3×10^11噬菌斑形成单位(PFU)/mL噬菌体KP168液(每管400μL)和浓度为1×10^9集落形成单位(CFU)/mL宿主菌液(每管4 mL)4 h(每种感染复数1管),采用双层琼脂平板法测算噬菌体KP168效价(测算方法下同)以筛选最佳感染复数,实验重复3次。(5)以感染复数为0.005混合浓度为1×10^9 CFU/mL宿主菌液(每管4 mL)和效价调整为5×10^7 PFU/mL噬菌体KP168液(每管400μL),分别于混合后0(即刻)、1、2、3、4、5、15、30 min(每个时间点1管)采用双层琼脂平板法计数噬菌斑(计数方法下同),计算已吸附噬菌体百分比以筛选最佳吸附时间,实验重复3次。(6)以感染复数为0.005混合浓度为1×10^9 CFU/mL宿主菌液(每管300μL)和效价调整为5×10^8 PFU/mL噬菌体KP168液(每管60μL),静置最佳吸附时间后常规振荡培养,分别于培养0(即刻)、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100 min测算噬菌体KP168效价,绘制一步生长曲线,实验重复3次。(7)取效价为2.5×10^10 PFU/mL噬菌体KP168液,分别于37、40、50、60、70℃静置培养1 h(每个时间点3管,每管1 mL),计数噬菌斑并绘制热稳定曲线。取效价为3.0×10^10 PFU/mL噬菌体KP168液,分别加入pH值为5.0、6.0、7.0、7.4、8.0、9.0、10.0的SM缓冲液于37℃静置培养1 h(每种pH值3管,每管含100μL噬菌体KP168液、900μL SM缓冲液),计数噬菌斑并绘制酸碱稳定曲线。(8)取噬菌体KP168液同实验(2)透析后行DNA抽提与测序,用Prokka对全基因组进行注释以获得噬菌体KP168编码序列,使用Nucleotide BLAST功能进行核酸序列比对以寻找与噬菌体KP168核酸序列相似度最高的已知噬菌体,使用Blastx功能将编码序列翻译成蛋白质后进行功能预测,比对抗性基因数据库和毒力因子数据库。(9)于96孔板中,分别以感染复数为1.000、0.100、0.010和0.001,在浓度为1.5×10^8 CFU/mL(浓度下同)的200μL宿主菌液中加入初始效价为5.8×10^10 PFU/mL噬菌体KP168液20μL(每种感染复数3孔)共同培养48 h;将200μL宿主菌液静置培养48 h后,分别加入效价为1×106、1×10^7、1×10^8、1×10^9、1×10^10 PFU/mL的噬菌体KP168液20μL(每种效价3孔)静置作用4 h。2种实验均以200μL宿主菌液中加入SM缓冲液20μL(3孔)为阴性对照,以220μL LB培养液(3孔)为空白对照,均采用酶标仪测定吸光度值并分别计算生物膜抑制率和生物膜破坏率,实验均重复3次。结果(1)成功分离纯化噬菌体KP168,其噬菌斑透亮,呈圆形,直径约1.5 mm。(2)噬菌体KP168呈正多面体结构,直径约为50 nm,无尾部结构。(3)噬菌体KP168可裂解20株烧伤患者泛耐药肺炎克雷伯菌中的13株,裂解率为65.0%。(4)感染复数为1.000时,噬菌体KP168与宿主菌共同培养4 h后,效价最高,以此为最佳感染复数。(5)噬菌体KP168与宿主菌混合后4 min,已吸附噬菌体百分比最高,以此为最佳吸附时间。(6)一步生长曲线表明噬菌体KP168裂解宿主菌时,潜伏期约10 min,裂解期约40 min。(7)噬菌体KP168在40℃、pH值为7.4时,噬菌斑数最多,活性最大。(8)噬菌体KP168基因组是线状双链DNA,长度为40114 bp;有48个可能编码序列;与Klebsiella phage_vB_Kp1相似度最高;编码序列翻译蛋白对应的已知最相似蛋白中包含23个假设蛋白和25个已知功能蛋白;未见抗性基因和毒力因子基因;获得GeneBank登录号MN585130。(9)以各感染复数共同培养噬菌体KP168与宿主菌48 h后,生物膜抑制率相近,平均约为45%;效价为1×10^9 PFU/mL噬菌体KP168作用于宿主菌已形成的生物膜4 h后,生物膜破坏率最高,达平均42%。结论本研究自污水中分离得到1株烧伤患者泛耐药肺炎克雷伯菌噬菌体——噬菌体KP168,该株噬菌体属于无尾科噬菌体,宿主谱宽、吸附时间短、潜伏期短,具有一定的热和酸碱稳定性;其基因组信息明确,不含抗性基因及毒力因子基因;对细菌生物膜的形成有抑制作用,对已形成的细菌生物膜有破坏作用。

体力活动模式对儿童青少年学习成绩的影响

体力活动有利于提高儿童青少年身心健康,越来越多的研究表明体力活动对提高儿童青少年学习成绩有积极作用。本文对现有文献进行回顾分析,探究体力活动模式与儿童青少年学习成绩之间的关系,分析不同时长、频次、强度和类型的体力活动对儿童青少年学习成绩的影响,为提高儿童青少年体力活动的质量和效果提供依据。高质量证据支持长时间、高频次、中高强度有氧体力活动对儿童青少年学习成绩有积极影响,家庭、学校及社会可以此为参考,科学合理增加儿童青少年的体力活动。

我国儿童青少年高度近视眼流行病学现状

近视眼,特别是高度近视眼,可严重影响儿童青少年的学习和生活质量,甚至与一系列眼部疾病有关。越来越多的研究结果表明,我国儿童青少年高度近视眼患病率持续上升,且随着年龄增加逐渐增长,并呈低龄化发展趋势。本文对现有文献进行回顾,探究不同时间、不同年龄、不同地区人群高度近视眼患病率差异,了解儿童青少年高度近视眼的流行病学现状,为进一步开展高度近视眼防控工作提供理论依据。

上海地区4~14岁儿童1年屈光进展及影响因素分析

目的了解不同年龄和屈光状态儿童屈光进展情况及其影响因素,为近视防控方案制定和工作实践提供参考。方法基于已有队列分层整群抽取上海嘉定区和松江区共20所幼儿园和中小学校,收集1510名4~14岁儿童2015年基线及2016年1年随访数据,包括睫状肌麻痹等效球镜(SER)、眼轴长度(AL)和角膜曲率等,分析SER和AL在不同年龄、屈光状态儿童中的分布和进展,采用多元线性回归探索SER进展量的影响因素。结果4~5岁儿童ΔSER保持相对稳定(平均-0.08~-0.07 D/年),6岁以上各年龄段SER均向近视方向明显漂移(平均-0.50~-0.31 D/年),11岁后回落至-0.44~-0.33 D/年;ΔAL在4~10岁组为0.27~0.35 mm/年,11~14岁组降低为0.15~0.22 mm/年。新发近视者的ΔSER和ΔAL最大[(-0.90±0.05)D,(0.51±0.02)mm],其次是低度近视组[(-0.68±0.04)D,(0.36±0.02)mm],中高度近视组[(-0.49±0.06)D,(0.23±0.03)mm]再次之,远视组[(-0.21±0.02)D,(0.26±0.01)mm]最低,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。年龄(β=-0.07)、基线SER(β=0.05)和ΔAL(β=-0.78)是4~10岁组屈光进展的独立影响因素,ΔAL(β=-1.55)是11~14岁组屈光进展的独立影响因素(P值均<0.05)。结论学龄前阶段儿童眼轴多为生理性增长,应通过增加户外活动等防止其超越生理性范围增长引起屈光近视化进展。小学阶段、近视前期和低度近视对象是近视防控重点动态监控和干预人群。