集胞藻PCC 6803高产精氨酸藻株的紫外诱变选育

精氨酸在医药和食品工业上具有广泛用途。集胞藻PCC 6803是单细胞蓝藻,能利用工业废气(主要成分是氮氧化物NOx)与水反应生成的硝酸盐和亚硝酸盐合成氨基酸等化合物,因而选育高产精氨酸藻株,不仅能提高精氨酸产量,而且能去除工业废气中的NOx,具有潜在的应用前景。研究在集胞藻PCC 6803中利用紫外诱变,筛选抗0.8 g/L D-精氨酸和抗0.2 g/L 6-氮尿嘧啶的突变株,选育到了一株精氨酸产量显著提高的突变株#13807-111-55,它每OD730值细胞的胞外精氨酸产量相比出发株提高了62.3倍,达到(0.76±0.1)mg/(L·OD730),总精氨酸产量相比出发株提高了6.0倍,达到(0.82±0.08)mg/(L·OD730)。该突变株每OD730值细胞的胞外精氨酸产量明显高于胞内,表明该突变藻株是精氨酸分泌型,因而具有潜在的应用前景。

多变鱼腥藻ATCC 29413基因的一步插入失活

多变鱼腥藻ATCC 29413有潜力发展为异养生长产异形胞蓝藻的研究模式种,但由于细胞内的限制-修饰系统等原因,其基因转移效率极低。研究克隆了该藻株的两个甲基化酶(M.AvaⅠ和M.AvrⅡ)基因ava_3181和ava_4359,构建了辅助质粒pHB6088,对运载质粒进行甲基化保护以避免被细胞中的限制酶切割。以ava_1237和ava_4412基因为例,研究证明利用该辅助质粒和接合转移系统可通过双交换对多变鱼腥藻ATCC 29413的基因实现一步插入失活。