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乡村振兴背景下江苏省高素质农民培训的现状
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作者 戴一凡 《中国就业》 2024年第3期11-13,共3页
目前,中国正处于全面建设社会主义现代化国家的新阶段,农村振兴战略被赋予更为重要的使命。农村发展不仅需维持农业生产稳定,还需推动产业多元化、提升农民收入及改善生活质量,这一切均依赖于高素质农民队伍的支持。江苏省是我国经济发... 目前,中国正处于全面建设社会主义现代化国家的新阶段,农村振兴战略被赋予更为重要的使命。农村发展不仅需维持农业生产稳定,还需推动产业多元化、提升农民收入及改善生活质量,这一切均依赖于高素质农民队伍的支持。江苏省是我国经济发展处于前列的沿海大省,农业人口众多,面临着南北发展不平衡、城乡差距较大等问题。传统的农业生产方式和管理模式已经无法满足现代化农业和社会发展的需求。农村人才短缺、农产品附加值低、农村社区基础薄弱等问题亟待解决。高素质农民培训,有望为江苏农村的可持续发展注入新的活力。本文旨在深入研究江苏省高素质农民培训的现状,探讨其机构、内容和效果,以期为江苏农村现代化发展提供理论指导和政策建议。 展开更多
关键词 产业多元化 发展不平衡 乡村振兴 我国经济发展 城乡差距 振兴战略 农民收入 农产品附加值
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浅析管理会计与财务会计的融合
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作者 戴一凡 《老字号品牌营销》 2024年第5期190-192,共3页
管理会计和财务会计是会计学的两个重要分支学科,将管理会计和财务会计有效地融合起来,可以为企业注入新的活力,提高企业市场竞争力。如何有效地融合企业的管理会计和财务会计,并改变企业的管理模式,成为企业所面临的新挑战。本文首先... 管理会计和财务会计是会计学的两个重要分支学科,将管理会计和财务会计有效地融合起来,可以为企业注入新的活力,提高企业市场竞争力。如何有效地融合企业的管理会计和财务会计,并改变企业的管理模式,成为企业所面临的新挑战。本文首先介绍了管理会计和财务会计融合的重要性,然后分析了企业在财务会计和管理会计融合中所面临的问题,最后提出了在新形势下有效实施会计融合的策略,希望为后期的企业财务管理提供参考。 展开更多
关键词 企业管理 管理会计 财务会计 有效融合
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单电机式强混合动力车辆控制策略 被引量:9
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作者 戴一凡 罗禹贡 +1 位作者 边明远 李克强 《中国机械工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第7期872-876,共5页
提出了基于一种新型的单电机、双离合器式强混合动力结构的车辆分层控制系统方案,制定了整车能量管理策略,并研究了车辆行进中启动发动机过程的动态协调控制方法。通过自行开发的前向仿真系统对能量管理策略进行了验证,在NEDC循环工况... 提出了基于一种新型的单电机、双离合器式强混合动力结构的车辆分层控制系统方案,制定了整车能量管理策略,并研究了车辆行进中启动发动机过程的动态协调控制方法。通过自行开发的前向仿真系统对能量管理策略进行了验证,在NEDC循环工况下等效百公里油耗降低了34%。同时通过动态台架试验,对车辆行进中启动发动机的动态协调控制策略进行了验证。 展开更多
关键词 强混合动力 单电机 分层控制系统 动态协调控制
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单电机强混合动力电动车辆的动态协调控制 被引量:22
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作者 戴一凡 罗禹贡 +4 位作者 李克强 任勇 周安健 段志辉 严钦山 《汽车工程》 EI CSCD 北大核心 2011年第12期1007-1012,共6页
为减小或消除单电机式强混合动力电动车辆在纯电动模式与发动机驱动模式间切换时产生的动力系统冲击,提出了发动机起动过程的转矩协调控制策略和发动机退出过程的转矩补偿控制策略。转矩协调控制策略包括起动模式下的发动机起动阻力转... 为减小或消除单电机式强混合动力电动车辆在纯电动模式与发动机驱动模式间切换时产生的动力系统冲击,提出了发动机起动过程的转矩协调控制策略和发动机退出过程的转矩补偿控制策略。转矩协调控制策略包括起动模式下的发动机起动阻力转矩补偿控制和调节模式下的发动机过冲转矩平衡控制,转矩补偿控制策略利用电机补偿发动机退出过程中动力系统转矩的变化。台架和实车试验结果表明了该动态协调控制策略可确保发动机的快速平稳起动和发动机退出时不产生动力系统冲击。 展开更多
关键词 强混合动力电动车 转矩协调控制 转矩补偿控制
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一种新型强混合动力结构的控制策略 被引量:6
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作者 戴一凡 罗禹贡 +4 位作者 边明远 李克强 段志辉 任勇 周安健 《汽车工程》 EI CSCD 北大核心 2009年第10期919-923,951,共6页
基于一种新型的单电机、双离合器式强混合动力结构,建立了其车辆分层控制系统,制定了整车能量管理策略,并研究了行进中启动发动机过程的动态协调控制。通过自行开发的前向仿真系统对能量管理策略进行了验证,结果表明在NEDC循环工况下等... 基于一种新型的单电机、双离合器式强混合动力结构,建立了其车辆分层控制系统,制定了整车能量管理策略,并研究了行进中启动发动机过程的动态协调控制。通过自行开发的前向仿真系统对能量管理策略进行了验证,结果表明在NEDC循环工况下等效100km油耗降低34%。同时通过动态台架试验,对行进中启动发动机的动态协调控制策略进行了验证。 展开更多
关键词 强混合动力 单电机 双离合器 分层控制系统 动态协调控制
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遗传病基因治疗研究的历史与现状 被引量:6
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作者 戴一凡 邱信芳 薛京伦 《自然杂志》 1990年第7期400-415,共16页
引言基因治疗(gene thcrapy),顾名思义,即是指在基因水平对遗传病进行治疗,具体地说,是将正常的基因通过某种途径转入到由于该基因缺陷而患有某种遗传病的患者体细胞内,并得到良好的表达,产生患者所缺乏的蛋白产物,从而达到永久性治疗... 引言基因治疗(gene thcrapy),顾名思义,即是指在基因水平对遗传病进行治疗,具体地说,是将正常的基因通过某种途径转入到由于该基因缺陷而患有某种遗传病的患者体细胞内,并得到良好的表达,产生患者所缺乏的蛋白产物,从而达到永久性治疗遗传性疾病的目的。近年来,随着分子遗传学特别是DNA重组技术的不断发展,越来越多的人结构基因被克隆和分析。 展开更多
关键词 基因表达载体 基因转移 病毒载体 外源基因 启动子 反转录病毒 辅助病毒 基因治疗研究 包装信号 病毒基因组
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智能网联汽车发展现状与趋势分析 被引量:13
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作者 戴一凡 李克强 《汽车制造业》 2015年第18期14-17,共4页
在以移动互联、大数据及云计算等技术为代表的新一轮科技革命方兴未艾的背景下,我国政府提出了“中国制造2025”及“互联网+”发展战略,大力推动产业转型升级和结构优化调整。汽车产业作为国民经济的支柱产业,其自身规模大、带动效... 在以移动互联、大数据及云计算等技术为代表的新一轮科技革命方兴未艾的背景下,我国政府提出了“中国制造2025”及“互联网+”发展战略,大力推动产业转型升级和结构优化调整。汽车产业作为国民经济的支柱产业,其自身规模大、带动效应强、国际化程度高、资金技术人才密集,必将成为新一轮科技革命以及中国制造业转型升级的重要产业。智能网联汽车,可以提供更安全、更节能、更环保、更便捷的出行方式和综合解决方案,是国际公认的未来发展方向和关注焦点。 展开更多
关键词 汽车发展 智能网 中国制造业 科技革命 产业转型 技术人才 移动互联 优化调整
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智能网联汽车(ICV)技术的发展现状及趋势 被引量:377
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作者 李克强 戴一凡 +1 位作者 李升波 边明远 《汽车安全与节能学报》 CAS CSCD 2017年第1期1-14,共14页
综述了智能网联汽车(ICV)技术的发展现状及趋势。ICV的体系架构包括价值链、技术链与产业链。ICV的4个发展阶段是:自主式驾驶辅助、网联式驾驶辅助、人机共驾、高度自动/无人驾驶;关键技术有:环境感知、智能决策、控制执行、人机共驾、... 综述了智能网联汽车(ICV)技术的发展现状及趋势。ICV的体系架构包括价值链、技术链与产业链。ICV的4个发展阶段是:自主式驾驶辅助、网联式驾驶辅助、人机共驾、高度自动/无人驾驶;关键技术有:环境感知、智能决策、控制执行、人机共驾、通信与平台、信息安全等。由于ICV是未来汽车技术发展的一个重要方向,其技术与产业发展是中国汽车工业转型升级的重要机遇;因而,中国要发展智能网联汽车,就应该充分结合本国体制优势,依托顶层设计。 展开更多
关键词 智能网联汽车(ICV) 驾驶辅助 人机共驾 无人驾驶
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碳酸盐岩酸蚀裂缝面粗糙度与导流能力相关性分析
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作者 戴一凡 侯冰 《断块油气田》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期672-677,共6页
酸蚀裂缝导流能力是评价酸压效果的一项重要指标,为研究酸蚀裂缝面粗糙度与导流能力的相关性,文中以四川碳酸盐岩储层灯四段井下岩心为研究对象,开展了酸蚀裂缝导流能力测试实验,提出了裂缝面粗糙度评价方法,研究了闭合压力和酸蚀时间... 酸蚀裂缝导流能力是评价酸压效果的一项重要指标,为研究酸蚀裂缝面粗糙度与导流能力的相关性,文中以四川碳酸盐岩储层灯四段井下岩心为研究对象,开展了酸蚀裂缝导流能力测试实验,提出了裂缝面粗糙度评价方法,研究了闭合压力和酸蚀时间对导流能力的影响。实验结果表明:当闭合压力一定时,酸蚀时间越长,酸蚀裂缝面整体粗糙度越高,导流能力随酸蚀时间的增加而增大;酸蚀裂缝面粗糙度与导流能力呈正相关,相关系数在0.75~0.99。通过研究可知,基于高斯曲率计算的碳酸盐岩酸蚀裂缝面粗糙度能较好地定量表征导流能力的相对大小,可为酸蚀裂缝导流能力的精细评价提供参考。 展开更多
关键词 酸压 酸蚀裂缝 粗糙度 导流能力 三维图像处理
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生物心脏瓣膜移植研究进展 被引量:11
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作者 何盛南 曲龙 +6 位作者 邹志成 王雨 邹尚友 戴一凡 蔡志明 黎明涛 牟丽莎 《器官移植》 CAS CSCD 2017年第5期410-412,共3页
心脏瓣膜移植手术已在临床开展50余年,全球开展了大量研究以提高生物心脏瓣膜移植的成功率。本文主要对机械瓣膜与生物瓣膜的选择、戊二醛固定的生物心脏瓣膜的优势及存在的问题、转基因猪心脏瓣膜的应用价值进行综述。
关键词 生物心脏瓣膜 异种移植 免疫排斥反应 钙化 α-1 3-半乳糖 心脏瓣膜置换 转基因猪 基因敲除 戊二醛 N-羟乙酰神经氨酸
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分布式电驱动车辆纵-横-垂向力协同控制 被引量:8
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作者 曹坤 罗禹贡 +3 位作者 戴一凡 褚文博 陈龙 李克强 《汽车工程》 EI CSCD 北大核心 2015年第9期985-991,共7页
针对现有研究多采用经验工况划分、主动悬架力简单分配等轮胎力解耦控制方法,难以实现车辆性能最优化的问题,提出了分层式轮胎纵-横-垂向力协同优化控制系统,在制定上层行驶期望目标和下层执行控制策略的同时,重点研究了中层轮胎纵-横-... 针对现有研究多采用经验工况划分、主动悬架力简单分配等轮胎力解耦控制方法,难以实现车辆性能最优化的问题,提出了分层式轮胎纵-横-垂向力协同优化控制系统,在制定上层行驶期望目标和下层执行控制策略的同时,重点研究了中层轮胎纵-横-垂向力优化分配。建立了融合轮胎负荷率和垂向力动态系数的统一优化目标函数,综合考虑了车辆行驶期望目标、轮胎附着极限和执行器特性等约束条件,最终解决了轮胎纵、横、垂向力的协同优化控制难题。基于Matlab/Simulink和CarSim的联合仿真结果表明,提出的分层协同控制系统能同时有效控制车辆行驶姿态和改善车辆操纵稳定性能。 展开更多
关键词 分布式电动车辆 纵-横-垂向力分配 协同控制
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n-3多不饱和脂肪酸对NOD小鼠T细胞的免疫调节作用 被引量:6
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作者 李琳 李晓曦 +2 位作者 毕欣芸 刘珊珊 戴一凡 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1707-1711,共5页
目的:探讨n-3多不饱和脂肪酸(n-3 poly unsaturated fatty acid,n-3 PUFA)对NOD小鼠T细胞免疫学功能的影响。方法:取野生型Balb/c小鼠和已出现典型的Ⅰ型糖尿病症状的NOD小鼠脾脏细胞,磁珠分选后获得小鼠CD4^+T细胞,将其分为4组:野生型... 目的:探讨n-3多不饱和脂肪酸(n-3 poly unsaturated fatty acid,n-3 PUFA)对NOD小鼠T细胞免疫学功能的影响。方法:取野生型Balb/c小鼠和已出现典型的Ⅰ型糖尿病症状的NOD小鼠脾脏细胞,磁珠分选后获得小鼠CD4^+T细胞,将其分为4组:野生型小鼠为Wild type组;NOD小鼠分为未处理组、二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)处理组、二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)处理组。DHA、EPA处理24 h,PMA和Ionomycin刺激活化后,采用CCK-8法检测T细胞增殖、流式细胞仪检测Th1/Th2极化、ELISA法检测T细胞细胞因子的分泌水平变化。结果:DHA、EPA对T细胞增殖具有显著抑制作用,促进NOD小鼠Th2细胞分化,抑制Th1细胞分化,经ELISA检测,DHA和EPA能够抑制T细胞IL-6、IL-17的分泌。结论:n-3多不饱和脂肪酸通过抑制T细胞增殖,平衡Th1/Th2比例和抑制IL-6、IL-17的分泌,对NOD小鼠的T淋巴细胞起到免疫抑制作用。 展开更多
关键词 N-3多不饱和脂肪酸 T细胞 NOD小鼠
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异种器官移植过程中预防T细胞排斥反应的研究进展 被引量:1
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作者 王雨 叶学军 +3 位作者 何盛南 戴一凡 蔡志明 牟丽莎 《器官移植》 CAS CSCD 2017年第4期324-327,共4页
异种器官移植是解决供体器官短缺的最适途径。基因工程已很大程度上克服了异种器官移植出现的超急性排斥反应等早期障碍,但是异种器官的成功存活还需要预防T细胞介导的急性排斥反应。目前异种器官移植中预防T细胞免疫排斥的方案分为3种... 异种器官移植是解决供体器官短缺的最适途径。基因工程已很大程度上克服了异种器官移植出现的超急性排斥反应等早期障碍,但是异种器官的成功存活还需要预防T细胞介导的急性排斥反应。目前异种器官移植中预防T细胞免疫排斥的方案分为3种:从基因水平进行改造减少T细胞免疫排斥反应、直接阻断T细胞免疫排斥反应、诱导移植受体的免疫耐受能力。在临床应用前,对这些方案进行研究和优化,有望实现异种器官移植后的长期存活。 展开更多
关键词 异种移植 器官移植 T细胞 免疫排斥 基因工程
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mfat-1小鼠胆固醇代谢特点及相关机制 被引量:1
14
作者 李斌 赵子建 +2 位作者 张晓霞 戴一凡 米树华 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期459-462,共4页
目的探讨mfat-1小鼠高脂饮食后血清胆固醇水平、胆固醇合成与吸收效率的改变及相关机制。方法mfat-1小鼠及C57BL/6小鼠各12只分别作为实验组和对照组,高脂饲料喂养4周后,心脏取血并取肝脏组织,气相色谱法检测小鼠肝脏膜脂质内二十碳五烯... 目的探讨mfat-1小鼠高脂饮食后血清胆固醇水平、胆固醇合成与吸收效率的改变及相关机制。方法mfat-1小鼠及C57BL/6小鼠各12只分别作为实验组和对照组,高脂饲料喂养4周后,心脏取血并取肝脏组织,气相色谱法检测小鼠肝脏膜脂质内二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、二十二碳五烯酸(DPA)、α-亚麻酸(ALA)、亚油酸(LA)、花生四烯酸(AA)的含量及血浆中总胆固醇、胆固醇合成标志物(角鲨烯、2,4-脱氢胆甾烷醇)及吸收标志物(菜油固醇、β-谷固醇、豆固醇)水平的变化,ELISA法检测两组小鼠肝脏中胆固醇合成限速酶3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-COAR)的表达水平。结果实验组小鼠肝脏膜脂质内ω-6/ω-3多不饱和脂肪酸(PUFA)比例显著低于对照组(1.70比6.04,P<0.01),血浆中胆固醇合成标志物角鲨烯、2,4-脱氢胆甾烷醇水平明显低于对照组(分别为0.63±0.17比1.24±0.36,3.89±0.54比6.57±1.06,P<0.05),胆固醇合成限速酶HMG-COAR的表达较对照组显著降低(379.76±22.37比443.98±27.99,P<0.01);胆固醇吸收标志物菜油固醇、β-谷固醇和豆固醇水平也显著低于对照组(分别为16.10±2.28比21.24±2.96、1.07±0.18比1.76±0.43、28.78±5.60比42.30±5.81,P<0.01);总胆固醇水平较对照组降低(0.91±0.07比1.16±0.85,P<0.01)。结论mfat-1小鼠通过抑制胆固醇的合成及吸收两种途径降低体内总胆固醇水平。 展开更多
关键词 Ω-3多不饱和脂肪酸 ω-6/ω-3多不饱和脂肪酸 胆固醇代谢标志物 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶
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多不饱和脂肪酸改善小鼠心肌脂质成分及缺血再灌注后线粒体功能 被引量:1
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作者 张晓霞 赵子健 +2 位作者 戴一凡 李斌 米树华 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第11期1503-1507,共5页
目的探讨增加不饱和脂肪酸摄入比例对心脏ω-6/ω-3多不饱和脂肪酸(PUFAs)比值及心肌缺血-再灌注时缺血区炎症状态及线粒体功能的影响。方法 C57BL/6小鼠80只,随机分为普通饮食组及植物油脂组(n=40)。喂养1个月后,建立心脏缺血再灌注模... 目的探讨增加不饱和脂肪酸摄入比例对心脏ω-6/ω-3多不饱和脂肪酸(PUFAs)比值及心肌缺血-再灌注时缺血区炎症状态及线粒体功能的影响。方法 C57BL/6小鼠80只,随机分为普通饮食组及植物油脂组(n=40)。喂养1个月后,建立心脏缺血再灌注模型。气相色谱法检测心脏ω-3及ω-6 PUFAs含量。TTC染色检测心肌梗死面积。差速离心法分离心肌线粒体,氧电极法测定线粒体呼吸控制率。实时定量PCR检测缺血区心肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达,ELISA法检测心肌TNF-α及白细胞介素-1(IL-1)蛋白含量。结果与普通饮食组相比,植物油脂组小鼠心脏ω-6/ω-3 PUFAs比值显著减低(P<0.05),心肌梗死面积显著减小(P<0.01),缺血区心肌线粒体呼吸控制率显著改善(P<0.05),TNF-αmRNA表达、TNF-α及IL-1蛋白含量均显著降低(P<0.05)。结论不饱和脂肪酸改善小鼠心肌脂质成分及缺血再灌注后线粒体功能。 展开更多
关键词 多不饱和脂肪酸 缺血-再灌注损伤 线粒体 炎性因子
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植物油降低心脏ω-6/ω-3多不饱和脂肪酸比值并改善心肌缺血再灌注的研究 被引量:1
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作者 张晓霞 米树华 +3 位作者 李斌 潘晓东 赵子建 戴一凡 《心肺血管病杂志》 CAS 2013年第6期773-776,共4页
目的:探讨适当增加饮食中植物油摄入,ω6/ω3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)比例,及其对心肌缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,I-R)时,细胞色素P450表氧化酶(cytochrome P450-enzyem)CYP2J表达及心肌损伤程度的影... 目的:探讨适当增加饮食中植物油摄入,ω6/ω3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)比例,及其对心肌缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,I-R)时,细胞色素P450表氧化酶(cytochrome P450-enzyem)CYP2J表达及心肌损伤程度的影响。方法:C57BL/6小鼠80只,随机分为普通饮食组及植物油组。分别以相应饮食喂养1个月后,建立心脏缺血再灌注模型,TTC染色检测心肌梗死面积。实时聚合酶链反应(PCR)及Western blot检测心肌CYP2J表达。气象色谱法检测细胞膜ω-3 PUFAs、ω-6 PUFAs及环氧二十碳三烯酸(11,12-epoxyeicosatrienoic acid,EET)含量。结果:植物油组小鼠心脏ω-6/ω-3比值显著低于普通饮食组,其缺血区心肌CYP2J表达及EET含量显著高于普通饮食组,心肌梗死面积显著改善。结论:适当增加饮食中植物油摄入降低心脏ω-6/ω-3比值,改善心肌缺血再灌注时CYP2J表达,改善心肌缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 Ω-3多不饱和脂肪酸 缺血-再灌注损伤 细胞色素P450表氧化酶 动物试验 小鼠
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以肺间质性改变为影像学表现的肺结核33例分析 被引量:12
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作者 王建军 吕群 +3 位作者 冯哲敏 阮肇扬 戴一凡 马潜 《现代实用医学》 2013年第1期24-25,共2页
目的总结以间质性肺疾病(ILD)改变为肺部影像学特征的肺结核患者临床特点,提高对不典型肺结核的警觉性。方法回顾性分析近5年影像学表现为ILD的患者33例。结果 33例患者中出现咳痰26例、呼吸困难18例、合并糖尿病4例和合并慢性阻塞性肺... 目的总结以间质性肺疾病(ILD)改变为肺部影像学特征的肺结核患者临床特点,提高对不典型肺结核的警觉性。方法回顾性分析近5年影像学表现为ILD的患者33例。结果 33例患者中出现咳痰26例、呼吸困难18例、合并糖尿病4例和合并慢性阻塞性肺疾病11例;33例中网格状改变者3例;结节样改变者12例;磨玻璃样改变者10例;多发性斑片状实变者9例;累及胸膜者14例,累及纵膈淋巴结7例。结论肺部影像学表现为ILD的患者,治疗前应排除肺结核。 展开更多
关键词 肺结核 间质性肺疾病 影像学
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运动学与动力学融合的车辆状态估计方法 被引量:1
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作者 李克强 罗禹贡 +2 位作者 边明远 戴一凡 陈龙 《科技创新导报》 2016年第27期186-186,共1页
汽车状态参数的准确获得是保证汽车主动安全系统有效性的重要要求。分布式电驱动车辆的新型结构为传统基于动力学的状态参数估计方法的突破提供了可能。通过分析基于运动学与动力学方法各自不同的误差特性,该文提出了对两种估计方法的... 汽车状态参数的准确获得是保证汽车主动安全系统有效性的重要要求。分布式电驱动车辆的新型结构为传统基于动力学的状态参数估计方法的突破提供了可能。通过分析基于运动学与动力学方法各自不同的误差特性,该文提出了对两种估计方法的估计结果进行融合处理的分布式电驱动车辆状态参数估计方法。利用理论推导,证明了该方法将能够有效的提高不同工况下的估计精度,提高估计方法的工况适应性。为验证该方法的有效性,开发了Car Sim与Simulink联合仿真试验平台。仿真结果表明,所提出的误差加权的融合状态观测方法提高了分布式电驱动车辆状态参数观测精度和鲁棒性。 展开更多
关键词 分布式电驱动车辆 车辆状态估计 多方法融合
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GPRASP2基因编辑猪胎儿成纤维细胞系的建立
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作者 张敏 姚俊 +6 位作者 鲁雅洁 王红顺 王盈 杨海元 魏钦俊 曹新 戴一凡 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期4-10,共7页
目的:采用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建G蛋白偶联受体相关分选蛋白2(G protein-coupled receptor associated sorting protein 2,GPRASP2)基因敲除的猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblast,PFF),为构建GPRASP2基因敲除巴马小型猪... 目的:采用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建G蛋白偶联受体相关分选蛋白2(G protein-coupled receptor associated sorting protein 2,GPRASP2)基因敲除的猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblast,PFF),为构建GPRASP2基因敲除巴马小型猪模型提供相应的供体细胞。方法:采用生物信息学方法对人与猪GPRASP2基因进行亲缘性和同源性分析,预测人与猪GPRASP2基因编码的氨基酸序列和蛋白二级结构;设计合成靶向巴马猪GPRASP2基因编码区上游和下游的单导向RNA(single guide RNA,sgRNA),以p X330质粒为载体,构建含有Cas9骨架的重组打靶质粒,并将此重组质粒转染至PFF中,G418药物筛选阳性单克隆细胞,测序分析其基因型。结果:生物信息学分析提示人/猪GPRASP2亲缘关系相近,同源性较高,且主要功能结构域Arm2的二维和三维结构相似。构建了靶向猪GPRASP2基因的重组打靶质粒并转染PFF,通过药物筛选、基因型分析和Western blot验证,成功获得GPRASP2基因敲除单克隆PFF。结论:人/猪GPRASP2基因亲缘关系相近且高度同源;采用CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术成功构建GPRASP2基因敲除的单克隆PFF,为建立GPRASP2基因敲除巴马小型猪模型奠定了前期基础。 展开更多
关键词 GPRASP2 CRISPR/Cas9 猪胎儿成纤维细胞 GPRASP2基因敲除细胞系
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人/猪SERPING1同源性比较及猪SERPING1敲除细胞系的建立
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作者 王蒙 朱晓晗 +4 位作者 刘晓蕊 李琳 王盈 杨海元 戴一凡 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第4期505-509,共5页
目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立SERPING1-/-猪胎儿成纤维细胞(PFFs)系,为构建遗传性血管性水肿模型提供细胞实验材料。方法首先比较人/猪SERPING1氨基酸同源性。其次,分析猪SERPING1基因有效的编码区,据此选择第八外显子为敲除靶... 目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立SERPING1-/-猪胎儿成纤维细胞(PFFs)系,为构建遗传性血管性水肿模型提供细胞实验材料。方法首先比较人/猪SERPING1氨基酸同源性。其次,分析猪SERPING1基因有效的编码区,据此选择第八外显子为敲除靶点,设计并合成靶向猪SERPING1的单导向RNA(sgRNA),连接到含有Cas9核酸内切酶的pX330载体上,构建SERPING1打靶载体pX330sgRNA,将其转染至猪胎儿成纤维细胞中,G418药物筛选阳性单克隆细胞。最后,用T7E1酶切实验检测靶点编辑情况,测序验证单克隆细胞基因型。结果生物信息学分析结果提示人/猪SERPING1蛋白氨基酸同源性较高,氨基酸比对相似性达到65.87%。成功构建打靶SERPING1的载体,并转染到细胞,药物筛选获得SERPING1基因敲除的单克隆细胞,测序确认了突变的基因型。结论人/猪SERPING1蛋白同源性较高,适合用于构建遗传性血管性水肿模型。构建的Cas9/sgRNA表达载体实现了SERPING1基因编辑,获得基因敲除的单细胞克隆,为后续SERPING1-/-猪模型的构建提供了必需的实验材料。 展开更多
关键词 SERPING1 CRISPR/Cas9 猪胎儿成纤维细胞
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