HIV阳性肺结核患者抗结核疗效多因素分析

目的分析艾滋病病毒(HIV)阳性肺结核患者抗结核疗效影响因素,探索其影响因素预测指标。方法收集2019年1月至2022年2月在石家庄市第五医院诊治的64例HIV阳性肺结核患者病例资料。根据抗结核治疗6个月疗效分为有效组和无效组。比较2组研究对象一般资料、实验室指标的差异。通过二元Logistics回归分析HIV阳性肺结核患者抗结核疗效的影响指标。通过ROC曲线分析HIV阳性肺结核抗结核疗效的预测指标及诊断效能。结果单因素分析结果显示,抗结核治疗有效组和无效组血清白蛋白(ALB)、血红蛋白(HGB)、淋巴细胞计数(LYM%)、中性粒细胞(NEUT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、C-反应蛋白(CRP)、CD4计数差异有统计学意义(均P<0.05)。Logistics回归分析结果显示,HGB和CD4细胞越低HIV阳性肺结核抗结核无效的风险越高。ROC曲线结果显示,CD4细胞计数、HGB、两者联合均可用于预测HIV阳性肺结核抗结核疗效,其AUC分别为0.838、0.843和0.911。结论CD4细胞、HGB是HIV阳性肺结核患者抗结核疗效的重要影响因素,二者联合应用可有效预测HIV阳性肺结核患者抗结核疗效。

支气管镜检查及肺泡灌洗液NGS对HIV阳性肺结核的诊断价值

目的评价支气管镜检查及肺泡灌洗液二代基因测序对HIV阳性肺结核的诊断价值。方法收集2019年1月至2022年1月石家庄市第五医院的30例HIV阳性临床疑似肺结核或具有肺结核相关体征/症状且行支气管镜检查者的病例资料(其中24例送检肺泡灌洗液NGS)。分析其支气管镜下表现;利用ROC曲线评价肺泡灌洗液NGS及Xpert对HIV阳性肺结核的诊断价值;利用ROC曲线评价痰液、支气管镜及支气管镜联合痰液对HIV阳性肺结核的诊断价值。结果支气管镜检查结果:淋巴结瘘3例,新生物10例,瘢痕、狭窄3例,支气管炎性改变9例,未见异常5例;BALF NGS和Xpert诊断HIV阳性肺结核敏感度分别为71%、47%,特异度均为100%,ROC曲线下的面积值为0.85、0.74;痰液、支气管镜、痰液联合支气管镜诊断HIV阳性肺结核的敏感度分别为41%、68%、86%,特异度分别为88%、100%、88%,ROC曲线下的面积值为0.64、0.84、0.87。结论支气管镜检查及肺泡灌洗液二代基因测序是诊断HIV阳性肺结核的重要工具。

肝硬化腹水患者的临床特征及预后影响因素分析

目的分析影响肝硬化腹水患者预后的危险因素及其预测价值,为改善患者预后提供参考。方法回顾性分析2020年8—12月于石家庄市第五医院住院且病例资料完整的136例诊断为肝硬化腹水的患者临床信息,并根据患者治疗2周后临床症状改善情况将患者分为好转组和未好转组。对2组患者的临床基本信息及实验室检测资料进行对比,从中选出差异有统计学意义的变量进行Logistic回归分析评估影响患者预后的危险因素、并采用ROC曲线判断其对预后的诊断价值。结果未好转组患者的腹腔感染率明显高于好转组,白细胞计数和中性粒细胞比率也明显高于未好转组。另外,中性粒细胞/淋巴细胞比值、单核细胞/淋巴细胞比值、血小板/淋巴细胞比值在未好转组明显增高。在生化指标方面,未好转组丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、尿素氮、碱性磷酸酶、谷氨酰转移酶、总胆红素、直接胆红素和C反应蛋白均高于好转组。Logistic回归分析显示白细胞计数、AST和尿素氮是影响肝硬化预后的独立危险因素,3者对预后预测的AUC分别为0.721、0.784和0.655。结论肝硬化腹水患者外周血中的白细胞、AST和尿素氮水平对于其疾病的预后评判具有较高的临床预测价值。

新型冠状病毒刺突蛋白对单核巨噬细胞分泌炎症因子的影响

目的 探讨SARS-CoV-2对单核巨噬细胞分泌炎症因子的作用及机制。方法 纳入石家庄市第五医院2020年1月21日至2月10日以及2021年1月3日至1月7日住院的COVID-19确诊患者(病例组)与健康对照者(对照组)各53例,收集病例资料与血常规检测结果。采用SARS-CoV-2刺突蛋白刺激单核巨噬细胞,细胞增殖-毒性检测细胞活力,荧光定量PCR法检测炎症因子IL-6、IL-1β和CCL2与信号通路分子JAK1、STAT1和NF-κB的表达。结果 COVID-19患者的单核细胞比值与中性粒细胞比值高于对照组,而淋巴细胞比值、淋巴细胞计数、嗜酸性粒细胞比值、嗜酸性粒细胞计数与红细胞压积低于对照组。SARS-CoV-2刺突蛋白刺激单核巨噬细胞后,在100ng/ml与300ng/ml的浓度下细胞活力高于对照组(P=0.046),在浓度为500ng/ml时IL-6、IL-1β与CCL2的mRNA表达含量最高(P<0.01,P=0.036,P <0.001),在浓度100ng/ml时JAK1与STAT1的mRNA表达明显升高(P <0.001),在300ng/ml与500ng/ml刺激下,NF-κB表达增高(P<0.001)。结论 COVID-19患者的单核细胞升高,SARS-CoV-2刺突蛋白可能通过JAK1/STAT1信号通路促进单核巨噬细胞分泌炎症因子,在细胞因子风暴中发挥作用。

HBsAg定量检测技术进展及其临床意义

近年来,乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)定量检测技术不断创新发展,目前在慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染患者中得到了广泛应用.血清HBsAg定量水平与HBV复制相关,有助于鉴别慢性HBV感染自然史及预测疾病进展.实时监测HBsAg定量水平动态变化有助于预测慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者抗病毒治疗的疗效与指导停药,提高临床CHB患者优化治疗策略.现就目前HBsAg定量检测技术及其在临床应用方面的最新进展做一综述.

病毒性肝炎HAV，HBV，HCV，HDV和HEV重叠感染的研究

采用ＥＬＩＳＡ法检测了１０８例乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者血清中的五种肝炎病毒──甲型（ＨＡＶ）、乙型（ＨＢＶ）、丙型（ＨＣＶ）、丁型（ＨＤＶ）和成型（ＨＥＶ）肝炎病毒的标志物，并采用ＰＣＲ技术检测了患者血清ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ及ＨＤＶＲＮＡ。结果五种肝炎病毒重叠感染者３５例（３２．４％），单纯ＨＢＶ感染者７３例（６７．６％）。ＨＢＶ、ＨＡＶＭ重感染率为４．６％，ＨＢＶ、ＨＣＶ二重感染率为９．２％，ＨＢＶ、ＨＤＶＭ重感染率为１４．８％，ＨＢＶ、ＨＥＶ二重感染率为１．９％，ＨＢＶ、ＨＣＶ和ＨＤＶ三重感染率为１．９％。ＨＢＶ、ＨＤＶ二重感染者发生肝硬化（ＬＣ）的频率明显高于单纯ＨＢＶ感染者（Ｐ＜０．０１）。在慢性乙肝和ＬＣ患者中，ＨＢＶ、ＨＣＶ二重感染，ＨＢＶ、ＨＢＶ二重感染和单纯ＨＢＶ感染者血清ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ阳性率之间无显著差别。上述结果提示五型肝炎病毒重叠感染情况比较严重；ＨＤＶ感染可导致肝炎慢性化、肝组织损伤加重和肝硬化的发生。ＨＣＶ和ＨＤＶ感染对ＨＢＶ复制无明显影响。

逆转录套式PCR检测粪便样本中的SARS冠状病毒

为了观察SARS冠状病毒在SARS患者粪便中的存在规律,建立了检测SARS冠状病毒RNA的逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法,并应用该方法检测了241份SARS患者粪便样本。部分PCR产物应用测序技术进行验证。RTPCR的灵敏度为1010稀释度的病毒原液(原液为108TCID50/ml)。241份粪便样本的总体检出率为24.1%(58/241),其中发病后的前10d和20d的检出率均为50.0%。随着发病时间的延长,阳性检出率呈下降趋势。应用RTPCR从粪便中检测SARS冠状病毒是可行的,在发病50d以后仍有17.0%左右的阳性检出率,提示SARS恢复期患者具有排毒的可能性,给后续的卫生防疫措施提供了一定的参考数据。

血清HBV cccDNA检测方法的建立与临床应用

肝组织中乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA（cccDNA）是一种可反复转录的完整模板，是嗜肝病毒持续感染的关键因素，但血清中cccDNA的临床意义尚不十分清楚。为此我们建立了检测血清HBVcccDNA荧光定量PCR方法，检测了各型HBV感染者血清中cccDNA水平，并分析了与血清HBVDNA及病情变化的关系。

二元系统与磷酸传递信号传导

二元系统是细菌的信号传导系统 ,可分为经典与非经典系统。经典系统占主导地位 ,由组氨酸蛋白激酶(HK)和反应调节蛋白 (RR)两种蛋白组成 ,在特定位置上分别含有保守的组氨酸 (His)和天门冬氨酸 (Asp)残基 ,磷酸传递过程直接从HK到RR仅需一步即完成。而非经典系统需要多步骤磷酸接力传递过程 (His Asp His Asp) ,该系统除含有HK和RR两种成分外 ,还同时含有一个磷酸接受器结构域和一个含组氨酸的磷酸转移结构域 (HPt)。二元系统在细菌的生命活动中起到举足轻重的作用 ,因为在脊椎动物中尚未发现二元系统的存在 ,因此 。

应用突变特异PCR检测HBV前C区nt1896位点突变

目的建立检则HBV前C区突变的突变特异聚合酶链反应(msPCR)方法,探讨前C区突变与肝病临床分型、e系统状态及病毒复制的关系。方法根据HBV前C区nt1896G→A突变设计并合成引物,建立msPCR检测方法,通过测序和扩增产物电泳证实msPCR的特异性。结果229例急性肝炎、慢性肝炎轻度、中度、重度及肝硬化患者nt1896突变株感染率分别为25.0%、5.3%、5.2%、27.8%和20.0%;野生株和突变株混合感染率分别是62.5%、32.9%、50.6%、38.9%和38.0%。221例慢性HBV感染者中,野生株、突变株和混合感染者血清HBeAg阳性率分别为71.3%、34.8%和51.1%;HBVDNA含量分别为7.1×108±3.3×106、7.2×107±1.3×106和2.1×109±2.4×106copies/ml;ALT异常率分别为46.3%、73.9%和54.4%,突变组显著高于野生组(P<0.05)。干扰素治疗后,混合感染者血清HBVDNA的阴转率显著高于野生株(P<0.05)。结论msPCR检测nt1896突变灵敏特异,nt1896突变与肝病严重性有密切关系。

一种快速简便的SARS冠状病毒RNA提取方法

目的 建立快速简便的SARS冠状病毒RNA提取方法。方法 采用异硫氰酸胍 玻璃粉法提取病毒RNA ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测SARS冠状病毒RNA。结果 2 4例SARS患者的粪便和痰液标本同时采用异硫氰酸胍 玻璃粉法和QIAGEN公司的试剂盒提取SARS冠状病毒RNA ,其粪便标本RT PCR的阳性率分别为 83.3% (2 0 / 2 4 )和 10 0 .0 % (2 4 / 2 4 ) ;痰液标本RT PCR的阳性率分别为 16 .7% (4 / 2 4 )和 2 0 .8% (5 / 2 4 )。异硫氰酸胍 玻璃粉法RT PCR的阳性率与洗脱温度有关。结论 异硫氰酸胍 玻璃粉法提取SARS冠状病毒RNA简便、快速、经济 ,可用于临床。

慢性乙型肝炎患者肝组织中HBsAg和HBcAg的表达及其意义

本文用组化和免疫组化方法检测慢性乙型肝炎94例活检肝组织中HBsAg和HBcAg。研究结果显示慢迁肝、慢活肝和肝硬化患者单项HBsAg、HBcAg和两项均阳性的检出率之间无显著差异(P>0.05),而且HBsAg呈包涵体样型和弥漫型及HBcAg呈量单纯核型、胞浆型和两型同时阳性在3组患者中所占百分比之间也均无显著差别(P>0.05)。

应用系统发育树分析DDBJ基因库中HBV基因序列的基因型

为了充分利用核酸库中的HBV序列信息,探讨DDBJ核酸库中HBV基因序列的基因分型,采用ClustalX(1.8)软件比较HBV基因序列前S区序列差异并产生系统发育树。通过对下载的1471条HBV基因序列进行系统分析,获得了228条前S/S区完整的HBV基因序列,其中有66条序列的基因型已被各种方法所证实。利用软件分析绘制了基于228条HBV前S区基因序列的系统发育树。66条已知基因型HBV基因序列在系统发育树上的分型与其原有基因型完全吻合。在228条HBV基因序列中,有207条序列分别属于A、B、C、D、E、F和G等7个基因型,但另外21条序列不能归属于上述7个基因型的任何一种,而且它们又分为彼此相互独立存在的两群,暂分别称之为未分型Ⅰ和未分型Ⅱ。经比较未分型Ⅰ、Ⅱ和其他7个基因型前S区核苷酸序列,发现未分型Ⅰ、Ⅱ和D型前S区都有33个核苷酸缺失,但三者基因缺失片段的位置和形式各不相同。但其它六型前S区无大片段基因缺失。结果说明采用基于前S区的系统发育树基因分型分析方法正确可靠。除了现已证实的7个基因型外,尚可能存在另外两个新的HBV基因型。

病毒核酸定量测定方法及其存在的问题

随着科学技术的不断进步 ,人们不但能够对病毒核酸进行定性检测 ,如今发展到还能够定量检测病毒核酸分子。有关定量测定病毒核酸的方法已有学者作过总结和介绍 [1] ,但病毒核酸定量测定过程中存在的问题 ,却很少有人总结报道。本文根据作者在实际工作中发现的问题和参考国外有关文献 ,着重在这方面进行总结。但为了更好的说明这个问题 。

鼠疫耶尔森菌基因组进化与生态位适应研究

目的 探索鼠疫耶尔森菌基因组进化的基本规律及其与该菌在自然界适应性演化之间的内在联系。方法 对 36株鼠疫耶尔森菌和 7株假结核耶尔森菌进行芯片比较基因组分析 ,鉴定差异区段 (DFR) ,并对 2 6 0株鼠疫耶尔森菌进行PCR验证 ,分析各DFR在这些鼠疫耶尔森菌中的分布 ,同时进行基因组岛分析。结果 在鼠疫耶尔森菌基因组中鉴定出 2 2个DFR ,基于DFR图谱 ,将鼠疫耶尔森菌中国分离株分成 14个基因组型。鼠疫耶尔森菌共有 2 1个基因组岛 ,其中 18个已存在于假结核杆菌中 ,余下 3个为鼠疫耶尔森菌独有。结论 探明了各基因组岛在鼠疫耶尔森菌和假结核耶尔森菌间的差异分布 ,探究了鼠疫耶尔森菌的起源进化 ;建立了鼠疫耶尔森菌基因组分型系统 ;建立了各基因组型别间的系统发育关系 ,初步揭示了鼠疫耶尔森菌基因组的进化规律及其与鼠疫耶尔森菌生态位适应和鼠疫疫源地扩展之间的关系 。

346例肺结核患者结核分枝杆菌耐药性调查及耐多药结核病影响因素分析

目的了解当今结核分枝杆菌的耐药情况，并探讨引起耐多药结核病患者产生的危险因素。方法收集我院2014年112月346例肺结核患者临床诊疗信息及其临床分离株，其中男209例，女137例，年龄14~87岁，平均年龄（36．98土0．97）岁。采用比例法检测结核分枝杆菌对抗结核药物（异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素、氧氟沙星、卡那霉素）的敏感性，采用多因素非条件logistic回归分析耐多药肺结核患者的相关影响因素。P〈O．05为差异有统计学意义。结果346株结核分枝杆菌菌株中，耐药率为28．0％（97／346）；初治患者耐药率为20．1％（54／268），复治患者耐药率为55．1％（43／78），复治患者耐药率明显高于初治耐药率（X2=28．71，P〈0．01）。耐多药率为15．0％（52／346）；复治患者耐多药率为44．9％（35／78），初治患者耐多药率为6．3％（17／268），复治患者耐多药率明显高于初治耐多药率（y。一70．299，P〈O．01）。广泛耐药率为2．6％（9／346）；复治患者广泛耐药率E6．4％（5／78）]高于初治患者广泛耐药率[1．5％（4／268）]（X2=5．767，P〈O．05）。患者耐多药单因素分析表明，不同性别、年龄组耐多药率差异无统计学意义（7。值分别为0．635、3．110，P值均〉o．05）。患者耐多药多因素分析表明，复治患者耐多药率高于初治患者（OR=9．439，95％CI=4．317～20．639，X2=70．299，P〈o．01）、结核病合并糖尿病的患者耐多药率高于非合并糖尿病患者（OR--4．018，95％CI：1．038～15．551，X2=6．630，P〈O．05）、不规律用药的患者耐多药率高于规律用药患者（OR--3．91，95％CI=1．385～11．041，X2=18．492，P〈O．01）。结论当前石家庄市耐多药结核疫情处于全国较高水平。合并糖尿病、反复多次治疗及不规律用药等可能是导致患者耐多药的毹盼因素．

鼠疫耶尔森菌全基因组DNA芯片的研制及用于比较基因组学分析

目的 研制鼠疫耶尔森菌全基因组DNA芯片 ,并将其用于比较基因组分析。方法 挑选出 4 0 0 5条鼠疫耶尔森菌基因 ,PCR扩增各基因 ,以纯化的PCR产物点样制备芯片 ,采用双色荧光杂交策略 ,进行芯片比较基因组杂交。结果 设计了若干质控杂交组合 ,芯片杂交结果与全基因组测序结果完全一致。

FibroScan对慢性乙型肝炎肝纤维化患者的应用价值及ALT、AST对其诊断的影响

目的探讨瞬时弹性探测仪(FS)在慢性乙型肝炎肝纤维化患者中应用价值及ALT、AST对其诊断纤维化的影响。方法应用FS对90名慢性乙型肝炎肝纤维化患者进行肝穿前肝脏弹性测量值(LSM)的测定,同时进行血清ALT、AST的检测。以肝脏活检病理结果为金标准,对肝纤维化进行分期。结果 LSM在肝纤维化病理S1～4之间逐渐增高,组间差异有统计学意义(P<0.01);相邻两分期间LSM组间差异均有统计学意义(P<0.01)。肝脏LSM与病理分期呈正相关(r=0774,P<0.01)。S1～4各期的LSM与相应分期的ALT呈正相关,相关系数分别为0.672(P=0.000)、0.790(P=0.000)、0.845(P=0.001)和0.797(P=0.003),S1～4各期LSM与相应分期的AST呈正相关,相关系数分别为0.593(P=0.000)、0.762(P=0.001)、0.743(P=0.009)和0.872(P=0.000)。结论 FS在慢性乙型肝炎肝纤维化程度评估中有较好的应用价值,但是血清ALT和AST水平对其有一定影响。

肝组织炎症对FibroScan诊断慢性乙型肝炎患者肝纤维化的影响

目的探讨肝组织学炎症对瞬时弹性扫描仪(FS)诊断慢性乙型肝炎患者肝纤维化的影响。方法应用FS对124名慢性乙型肝炎患者进行肝穿刺前肝脏弹性测量值(LSM)的测定,采用肝穿刺活组织病理诊断技术进行肝纤维化分期(S)和炎症分级(G)。对同一肝纤维化分期不同肝组织炎症分级组间LSM进行比较,并对各肝纤维化分期中LSM与肝组织炎症分级进行相关性分析。结果肝组织纤维化逐渐发展伴随肝炎症程度加重,如肝纤维化S1期患者中以G1为主(81.8%),S2期以G2为主(54.2%),S3期以G3为主(47.4%),S4期以G3、G4为主(40%,33.4%),S1～S4每一纤维化分期水平上,不同炎症分级LSM差异均具有统计学意义(P<0.05),且LSM与不同炎症分级之间均呈显著正相关(P<0.01)。结论肝组织炎症程度是影响FS诊断的一个重要因素,炎症活动程度加重可使LSM增加。

拉米夫定治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化的临床观察

目的 研究拉米夫定对失代偿期乙型肝炎肝硬化的临床疗效和安全性。方法 2 8例乙型肝炎肝硬化患者给予拉米夫定 10 0mg/d口服 ,连用 2 4个月 ,设立对照组。在治疗开始前、治疗开始后 6个月、12个月和 2 4个月分别记录Child Pugh得分 ,并进行肝功能、肝纤维化标志物、HBV血清标志物以及血清HBVDNA定量检测。结果 2 8例肝硬化患者拉米夫定治疗后 ,血浆白蛋白显著升高 ,血清丙氨酸转氨酶和胆红素明显降低 ,血清Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶厚、层粘连蛋白和透明质酸水平较治疗前显著降低 ,血清HBVDNA阴转率明显高于对照组 (P <0 .0 0 5 ) ,HBVDNA水平较治疗前显著降低。治疗组Child Pugh计分平均降低 2 .5 ,5 4.2 %患者提高了分级 (12例从B到A ,1例从C到B) ,而对照组仅有10 .5 %的患者Child Pugh分级得到了改善 ,治疗组显著高于对照组 (P <0 .0 1)。不良反应的发生率为 3 2 .1% (9/2 8)。结论 拉米夫定能使HBV复制指标阳性的活动性肝硬化患者的病毒复制受到抑制 ,肝功能改善 ,肝纤维化程度降低 ,病情缓解。应用拉米夫定治疗肝硬化患者安全可靠。