小鼠胚胎大脑皮质与中脑神经干细胞培养与分化比较的研究

目的比较小鼠胚胎脑皮质与中脑来源的神经干细胞在培养与分化方面的差异,为更好的研究和利用神经干细胞提供实验依据。方法无菌条件下分别分离鼠胚大脑皮质与腹侧中脑,经胰酶消化及机械吹打成单细胞后接种于含有B27、bFGF的DMEM/F12培养基,培养扩增;倒置显微镜观察比较生长状况;机械方法传代;10%血清接种分化;免疫荧光细胞化学方法染色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向,并作比较。结果小鼠胚胎脑皮质与中脑均存在神经干细胞,其免疫细胞化学鉴定均呈Nestin阳性,并都能分化为神经元和胶质细胞;但皮质部位所含神经干细胞明显多于中脑,也更宜成球;有血清条件下分化,皮质神经干细胞未见分化为酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元;中脑神经干细胞则可少量分化为TH阳性神经元结论同样条件下皮质神经干细胞比中脑神经干细胞更易增殖与培养,两者在有血清条件下分化为TH阳性神经元能力方面有差异。

局部解剖学双语教学质量和学生对该模式认可程度的分析

当前,特别是加入WTO以后,我国高等教育改革面临着极大的机遇和挑战.双语教学作为重点高校非英语专业课程教学改革的重点之一,无疑将对全面提高学生素质,推动我国教育事业的发展并与世界接轨起到不可估量的作用[1].但非英语专业课程双语教学在我国尚处于尝试阶段[2],且与国外相比,我国高校,特别是医学院校本科生的学时负担相对较重.在这种情况下,专业课的非母语教学无疑会进一步加重学生的学习负担.双语教学是否会影响专业课的教学质量?是否能真正有效地使学生在学习专业知识的同时,提高专业外语的水平?为此,我们进行了调查研究.

神经干细胞移植对帕金森病鼠纹状体多巴胺含量的影响

目的观察神经干细胞定向移植后对帕金森鼠纹状体多巴胺含量的影响,证实神经干细胞移植治疗的可行性。方法建立帕金森病模型大鼠以及体外培养神经干细胞,然后将神经干细胞悬液立体定向移植到帕金森病模型鼠黑质纹状体区,测定纹状体的多巴胺含量,并与生理盐水组和非移植组相比。结果神经干细胞移植后帕金森病模型鼠纹状体多巴胺含量(346±26)μg/g与生理盐水组(58±56)μg/g和非移植组(72±60)μg/g比较明显增多,经t检验差异有显著性意义(t=13.99,12.57,P<0.05)。结论神经干细胞移植能减轻6-羟基多巴胺对黑质纹状体多巴胺能神经元的损伤。

精索静脉曲张持续时间对精索内静脉结扎术效果的影响

目的:利用大鼠制作相关的动物模型来研究精索静脉曲张(VC)持续时间对精索内静脉结扎术(VT)效果的影响。方法:将制作成左侧VC模型的SD大鼠分别于6,12,18周,行VT。于VT 8周后摘取各组大鼠左侧睾丸,检测其Johnsen’s评分、生精小管的超微结构、睾丸组织的睾酮浓度(ITC)和生精细胞的凋亡指数(AI)。结果:VC持续6周和12周后治疗组各项指标与其对照组比较无显著性差异(P>0.05)。VC持续18周后治疗组Johns-en’s评分显著低于其对照组(P<0.05),AI显著高于对照组(P<0.05),ITC无显著性差异(P>0.05),生精小管的超微结构明显异常。结论:长期VC将导致同侧睾丸生精功能不可逆性损害。

GDNF与IL-1β体外诱导小鼠中脑神经干细胞分化作用的实验研究

目的研究神经干细胞在体外向多巴胺能神经元分化的条件,为帕金森病的细胞移植治疗提供基础实验资料。方法体外培养扩增中脑神经干细胞,在有血清条件下分别予以GDNF,IL-1β及GDNF+IL-1β诱导分化,TH免疫细胞化学鉴定分化结果,流式细胞术检测TH阳性神经元比例。结果有血清条件下GDNF,IL-1β及两者联合促进中脑神经干细胞分化为TH阳性神经元的比例分别为13.41%,9.23%,15.59%,明显高于对照组(约3.49%,P≤0.01),GD-NF及联合诱导组多巴胺能神经元形态更成熟。结论GDNF,IL-1β及两者联合可明显促进中脑神经干细胞分化为多巴胺能神经元。GDNF较IL-1β更能促进诱导的多巴胺能神经元的表型成熟。

参麦注射液对缺氧复氧致鼠大脑皮层神经细胞损伤的影响

目的 :研究缺氧 /复氧对小鼠大脑皮层神经细胞的损伤及参麦注射液对其保护作用。方法 :取体外原代培养 6d的小鼠大脑皮层神经细胞 ,置于 95 %N2 和 5 %CO2 的缺氧罐中造成神经细胞不同时间的缺氧复氧。用神经细胞存活率及神经细胞线粒体活性来评价神经细胞活力 ,用乳酸脱氢酶 (LDH)释放率作为评价损伤的指标 ,并进行了形态学观察。结果 :原代培养小鼠大脑皮层神经细胞缺氧 6h ,再给氧 18h后 ,神经细胞存活率及线粒体活性明显降低 ,LDH释放量显著增加。参麦注射液可显著对抗缺氧复氧致小鼠大脑皮层神经细胞的损伤 ,剂量依赖性地抑制LDH释放量的增加 ,并能减轻细胞的形态学损伤。结论

小鼠胚胎神经干细胞的分离培养及其鉴定

目的 探索小鼠胚胎神经干细胞的体外培养方法 ,并获取高纯度的神经干细胞 ,为神经干细胞的深入研究提供实验材料。方法 无菌条件下分离E15天小鼠胚脑皮质 ,制成单细胞悬液 ,在bFGF和B2 7存在的培养基中培养扩增 ,通过免疫细胞化学染色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向。结果 培养的部分细胞在B2 7和bFGF存在的无血清培养基中可以在体外分裂增殖 ,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin ,并在撤出B2 7和bFGF的有血清培养基中向神经细胞和胶质细胞分化。结论 小鼠胚脑皮质存在具有多向分化潜能的神经干细胞 ,这些细胞可以在体外稳定培养、传代并自然分化 ,为细胞替代治疗提供了理想的细胞来源。

谷氨酰胺对DSS诱导的小鼠结肠炎的治疗作用及机制

目的:探讨谷氨酰胺(Gln)对DSS诱导的小鼠结肠炎的治疗作用及机制。方法:8周龄BALB/c小鼠随机分为3组:Control组:对照;Gln组:DSS诱导结肠炎(4%DSS,7 d)+Gln治疗(1.5 g/kg,4周);DSS组:DSS诱导结肠炎。4周后处死小鼠评估结肠炎症、疾病活动度、上皮细胞凋亡、肠黏膜炎症因子及NF-κb(p65)信号通路。结果:Gln显著降低了DSS模型小鼠的结肠炎症、疾病活动度及上皮细胞凋亡。Gln抑制了肠黏膜NF-κb(p65)信号通路。结论:Gln治疗可减轻肠道炎症,降低肠上皮细胞凋亡,这可能是通过抑制肠黏膜NF-κB(p65)信号通路。

抗坏血酸对IL-1β体外诱导中脑神经干细胞分化为酪氨酸羟化酶阳性神经元作用的实验研究

目的体外观察抗坏血酸(ascroidacid,AA)对IL-1β诱导神经干细胞向酪氨酸羟化酶(tyrosinehydroxy-lase,TH)阳性神经元分化的作用,为帕金森病的细胞移植治疗提供实验资料。方法体外培养中脑神经干细胞并传代分组,在有血清条件下分别予以IL-1β及AA+IL-1β诱导分化,TH免疫细胞化学鉴定分化结果并细胞计数阳性比例。结果有血清条件下IL-1β、AA+IL-1β诱导中脑神经干细胞分化为TH阳性神经元比例约为12·6%和14·3%,明显高于对照组(约2·6%,P<0·01);两实验组间相对无统计学差异(P>0·05);联合诱导组TH阳性神经元细胞形态更成熟。结论IL-1β可以明显促进中脑神经干细胞分化为TH阳性神经元,AA能够加强IL-1β诱导的TH阳性细胞的表型成熟,但在我们的实验条件下二者联合未能增加TH阳性细胞诱导率。

多层螺旋CT与核磁共振成像在细微及隐匿性骨折中的诊断价值

目的探讨多层螺旋CT(MSCT)与核磁共振成像(MRI)检查在诊断细微及隐匿性骨折中的阳性率和特异性,对比分析两种检查方法诊断细微及隐匿性骨折的价值。方法回顾性分析湖北医药学院附属东方医院诊断的细微及隐匿性骨折150例,分析MSCT、MRI、X线检测骨折部位,计算总检出数及阳性检出率,对比分析MSCT、MRI诊断细微及隐匿性骨折的优势和特异性。结果 MSCT诊断骨折125例,阳性检出率83.33%。同时经MRI检查,T1WI检出骨折141例,阳性检出率94.00%,T2WI骨折检出率100.00%。MSCT与MRI对细微及隐匿性骨折阳性检出率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MRI在骨挫伤中显影率高,不同扫描参数可对比得出骨折数据,尤其适用于隐匿性骨折及合并血肿、脂肪覆盖等骨折情况复杂的患者。

椎动脉、颈交感干和颈长肌的解剖关系及其在颈椎手术中的意义

目的研究椎动脉、颈交感干和颈长肌的相互关系,为颈椎前入路手术提供参考资料。方法采用12具正常尸体标本,测量椎动脉起始部至第6颈椎(C6)横突孔间距及其与前斜角肌内侧缘的夹角,并测量C6水平椎动脉至颈长肌内侧缘的距离、两颈长肌内侧缘的距离、颈交感干至颈长肌内侧缘的距离、颈交感干至颈正中线的距离。结果椎动脉起始部至第6颈椎横突孔的间距为(47.76±17.28)mm。在C6水平椎动脉至颈长肌内侧缘的距离为(8.25±2.03)mm,与前斜角肌内侧缘的夹角为24.28°±2.13,°两颈长肌内侧缘的距离为(13.78±1.49)mm,颈交感干至颈长肌内侧缘的距离为(14.57±1.62)mm,至颈正中线的距离为(20.64±2.42)mm。结论颈椎前入路手术中对椎动脉及颈交感干的定位应参照颈长肌、前斜角肌等重要标志,并应注意椎动脉可能的变异。在C6水平,颈交感干与颈长肌的距离最近,为手术中容易误伤的结构。

母语在局部解剖学双语教学中的地位

随着中国加入世界贸易组织,培养具备高水平专业知识和外语交流能力的复合型人才成为教育界面临的挑战.而双语教学则是当前我国高校特别是重点高校非英语专业课程教学改革的重点之一.医学名词约有1/3以上来源于解剖学[1],且与解剖学名词相关或由其派生的术语几乎占医学专业词汇的七成[2].因此,在人体解剖学教学中开展双语教学,对于促进医学生专业英语学习具有重要意义.学生的英语水平是搞好双语教学的关键,但母语水平对其影响如何?为此,本文展开了相关调查分析.

混合培养对骨髓基质细胞转分化为神经元的影响

目的 研究神经干细胞(NSCs)与骨髓基质细胞(BMSCs)混合培养对骨髓基质细胞转分化为神经元的 影响。 方法 将BMSCs传代培养2d,10μg LbFGF预诱导过夜,DAPI标记后加入到已贴壁分化2d的NSCs中,神 经元培养基混合培养7d后进行神经元特异性烯醇化酶(Nse)染色。对照组于BMSCs传代2d后,一组加bFGF处理 过夜,另一组不加,神经元培养基培养7d后NSE染色。 结果 实验组中部分BMSCs呈NSE染色强阳性,比例为 (13.38±5.79)%,对照组呈NSE阴性 结论 NSCs与BMSCs混合培养可诱导BMSCs转分化为神经元。

低氧浓度改变对神经干细胞增殖分化及HIF-1α表达的影响

目的:探讨不同的低氧浓度下离体培养胎鼠脑皮质神经干细胞(NSCs)的增殖分化及HIF-1α的表达情况,以此分析HIF-1α对神经干细胞的增殖分化作用。方法:体外低氧条件下(3%O2和10%O2)培养扩增胚鼠皮质来源的神经干细胞,实验组分为3%O2低氧1、3、5d组;10%O2低氧1、3、5d组,常氧为对照组。免疫细胞化学染色法鉴定神经干细胞及其子代细胞。RT-PCR检测实验组细胞HIF-1αmRNA的表达。结果:各低氧组NSCs内HIF-1αmRNA的表达量均明显高于对照组,且10%O2组与3%O2组相比,低氧5dHIF-1αmRNA的表达量显著增加;实验组NSE阳性神经元的比率均明显高于对照组,10%O2组与3%O2组相比,低氧5d10%O2组中NSE阳性神经元的比率明显增高。结论:低氧可促进NSCs增殖分化及HIF-1αmRNA的表达,且HIF-1αmRNA的表达量与低氧浓度及时间有关。

低氧条件下中脑神经干细胞向多巴胺能神经元的分化

传统的帕金森氏病（Parkinson’s disease，PD）以药物治疗为主，随着病程进展治疗效果逐渐下降并出现精神和行为等方面的副作用。由于PD的病理变化是中脑黑质多巴胺能神经元特异性的坏死，导致多巴胺（dopamine，DA）及其代谢物释放的减少。故补充足够量的DA能神经元就成为治疗的一个关键。神经干细胞（neural stemcells，NSCs）的发现及相应培养、分离技术的进展为治疗带来了希望。近年来低氧对中脑神经干细胞作用的研究引起了广泛关注。本实验分离小鼠胚胎中脑组织NSCs，在低氧状态下观察其生长和分化的特点，并检测TH及NSE阳性神经元的比例。

缺氧对小鼠心肌琥珀酸脱氢酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-腺苷三磷酸酶活性及超微结构的影响

采用雌雄兼有的成年小鼠40只,分4组分别置入合常氧、12%、8%、4%氧的密闭容器内1O～15min.经心脏取血测动脉血氧分压,血氧饱和度.取心室肌按Nitro-BT法测琥珀酸脱氢酶,以硝酸铅法Ca^(2+)-Mg^(2+)-腺苷三磷酸酶,并通过电镜观察心肌超微结构变化.结果表明,当吸入氧浓度等于或小于8%时,琥珀酸脱氢酶损伤反应明显;等于或小于12%时.Ca^(2+)-Mg^(2+)-腺苷三磷酸酶活性明显降低;当吸入氧浓度为4%时,心肌超微结构出现明显地不可逆性改变.结果提示,当小鼠吸入等于或小于12%的氧15min时,心肌出现明显的代谢障碍.

眼轮匝肌悬吊法眶颊区年轻化术

目的:探讨一种眶颊区年轻化的微创新办法。方法:采用皮肤入路眼袋整形术切口,在行眼袋整形术的同时,在眼轮匝肌与其下脂肪垫间游离外侧半眼轮匝肌眶部,形成眼轮匝肌肌皮瓣,向外上方提紧,分两点固定于眶骨骨膜上,可使鼻唇沟以上的皮肤绷紧,恢复青春光泽,鼻唇沟纹减轻,使眶颊区年轻化。结果:该术式治疗125例中年患者,术后随访3-16个月,95%的患者对手术效果满意。并发球结膜水肿17例,经热敷治疗,1月内均消退,无悬吊点局部凹陷及眼部勒紧感,无其它并发症发生。结论:该术式在同一切口内同时完成眼袋整形术及鼻唇沟除皱术,使眶颊区年轻化,切口隐蔽,创伤小,恢复迅速,是一种较好的手术方法。

大豆磷脂脂质体对培养的缺血心肌细胞膜损伤保护作用的电镜观察

用培养乳鼠心肌细胞的缺血模型，观察了大豆磷脂脂质体抗心肌缺血膜损伤的效应。结果显示，大豆磷脂脂质体具有明显减轻心肌缺血所致的心肌细胞质膜缺损、线粒体肿胀、线粒体无定形颗粒沉积及心肌细胞膜酶（Ｃａ^（＋＋）、Ｍｇ^（＋＋）－ＡＴＰ_（ａｓｅ））活性降低的作用。本研究提示，大豆磷脂脂质体具有保护心肌膜完整性及维护其功能的作用。

武汉市民对遗体捐献知识、态度和行为调查

目的 :了解武汉市民对遗体捐献知识、态度和行为的情况。方法 :采用随机抽样方法进行问卷调查。结果 :①共调查 92 3人 ,其中男性 4 92人、女性 4 31人 ,年龄为 34± 17 2岁 ;听说过遗体捐献的为 90 0 % ,不了解遗体捐献正规程序的为 90 2 % ,想了解遗体捐献方面的知识的占 92 8% ,83 7%市民认为全社会都应该关注遗体捐献 ,33 2 %表示愿意捐献遗体 ,4 8 5 %的市民考虑过遗体捐献 ,97 5 %认为遗体捐献有意义 ,6 6 6 %市民认为遗体处理方式会对捐献者家属产生影响 ;②年龄、文化程度与捐献意愿的相关性不大 ;③愿意捐献、正在考虑和不愿意捐献的市民受到的影响因素不同 ,分别认为捐献与程序烦琐、社会舆论和个人信仰有关 ;在认为家属是否会受舆论压力影响的选项上 ,三者比较无统计学差异 (p =0 81)。结论 :武汉市民对遗体捐献的认知程度总体不高 ,应加大宣传力度 ,提倡无私奉献的捐献精神 ,让广大市民了解相关的法规和捐献程序 ;政府在开展遗体捐献工作时应注重人性化。