利用生物标记物OH^8dG研究丙烯腈对DNA的氧化损伤

目的：建立高压液相检测８－羟基－２＇－脱氧鸟苷（ＯＨ８ｄＧ）的方法；研究丙烯腈（ＡＮ）对ＤＮＡ的氧化性损伤；探讨丙烯腈的致癌机理。方法：以大鼠肝为材料，用Ａｍｅｓ酶解法制备ＯＨ８ｄＧ，用ＨＰＬＣ－ＥＣＤ检测ＤＮＡ中ＯＨ８ｄＧ含量。结果：小剂量丙烯腈对活性氧自由基及ＯＨ８ｄＧ的产生无明显影响，随着丙烯腈剂量的增加，ＯＨ８ｄＧ形成增加。８０ｍｇＡＮ／ｋｇ时，ＯＨ８ｄＧ的含量约为对照组的６倍。结论：丙烯腈经肝脏生物转化后，可产生活性氧自由基（ＲＯＳ），通过羟自由基使肝ＤＮＡ中脱氧鸟苷第６位羟化，形成ＯＨ８ｄＧ，而ＯＨ８ｄＧ可引起Ｇ∶Ｃ→Ｔ∶Ａ颠换，从而引起突变。这一途径可能是丙烯腈化学致癌的重要机制。

PCR-SSCP法检测CETP第15外显子基因突变

目的 :检测胆固醇酯转移蛋白第15外显子基因突变及其性质。方法 :利用PCR -SSCP方法检测CETP第15外显子的基因突变。根据双脱氧DNA链合成终止法对PCR产物直接测序 ,确定基因突变的性质。结果 :16例高HDL -C个体中发现了2例杂合子突变 ,经测序证实为第1506位核苷酸A→G突变。结论 :在高HDL -C个体中存在较高的CETP第15外显子基因突变 ,PCR -SSCP和DNA测序技术是确定基因突变存在和性质的简便易行的技术和方法。

天津地区国人CETP第15外显子突变(Asp^(442)→Gly)频率

目的 :检测胆固醇酯转移蛋白第15外显子突变 (Asp442→Gly) ,为探讨CETP在AS发生、发展中的作用提供基础数据和参考资料。方法 :利用特异设计的错配碱基引物 ,在PCR扩增获得的人CETP第15外显子突变片段人工导入了一MspI酶切位点 ,根据酶切片段的电泳图谱检测人CETPAsp442→Gly 突变。结果 :131例正常成年人中发现4例杂合子突变 ,突变率为3.05% ,首次证实Asp442→Gly 突变在天津的存在。结论 :天津地区存在CETPAsp442→Gly 突变 ,突变体HDLc平均水平虽高于正常对照组 ,但无统计学差异 (P>0.05)。