Leica ASP300高级智能脱水机的应用

高级智能脱水机因其具有自动化程度高、脱水效果好、污染小、性能优良等优点而受到广大病理工作者的青睐。我科于2007年购进一台Leica ASP300高级智能脱水机,现将使用过程中积累了一些保养和维护经验介绍如下。

肺癌胸水细胞块与组织学EGFR基因扩增检测对比研究

目的:对比肺癌胸水细胞块与组织学中EGFR基因扩增情况,探讨非小细胞肺癌患者阳性胸水细胞块检测EGFR基因扩增情况及临床意义。方法:收集60例非小细胞肺癌患者阳性胸水离心获取肿瘤细胞制作成石蜡细胞块,其中有28例的组织学对照,免疫组化分型后进行FISH检测EGFR基因,荧光显微镜观察基因扩增情况。结果:28例细胞块有组织学EGFR基因检测对照,在有组织学对照细胞块EGFR基因检测相符率100%。肺腺癌31例中,EGFR基因簇状扩增4例(12.9%),点状扩增14例(45.2%),无扩增13例(41.9%),肺腺癌扩增率为58.1%;肺鳞癌25例中,EGFR基因簇状扩增2例(8.0%),点状扩增9例(36.0%),无扩增14例(56.0%),肺鳞癌扩增率为44.0%;其他类型NSCLC患者4例中2例点状扩增,扩增率为50%。结论:肺腺癌及肺鳞癌胸水细胞块EGFR检测结果与组织学一致,EGFR基因在肺腺癌的扩增率高于肺鳞癌。应用FISH技术检测胸水细胞块中的EGFR基因扩增情况具有临床应用价值。

HRM方法检测肺腺癌胸水细胞块中EGFR基因突变的临床意义

目的:探讨应用HRM方法检测肺腺癌患者胸水细胞块中癌细胞EGFR基因突变的临床价值。方法:收集43例肺癌阳性胸水标本,制作胸水细胞块,经HE及免疫组化染色确诊为肺腺癌,常规提取DNA,应用HRM方法检测EGFR基因第18-21外显子突变。所有标本均经基因测序法验证。结果:43例肺腺癌胸水细胞块中,HRM法检测出EGFR基因突变共15例,总突变率为34.88%。基因测序检测出EGFR基因突变共14例,总突变率为32.56%。两者的突变率差异有统计学意义。结论:对难以获得肺癌组织标本的肺腺癌患者可应用HRM方法检测胸水细胞块,筛查EGFR基因突变,指导EGFR酪氨酸激酶受体抑制剂应用。

快速祛除组织中黑色素的改良方法

一些黑色素细胞增生性病变与恶性黑色素瘤的鉴别极为困难,有的到目前还没有定论[1]。黑色素瘤的细胞形态组织结构极其多样,在一些标本中黑色素沉积过多,掩盖了细胞的形态和组织学结构,而且给免疫组织化学的标记造成影响,给疾病的诊断造成了一定的困难。

肺腺癌胸腔积液上清液和细胞块EGFR基因突变检测的临床意义

目的比较应用高分辨率熔解曲线(HRM)方法检测肺腺癌胸腔积液上清液和细胞块表皮生长因子受体(EGFR)基因突变状态,为寻找有效的胸腔积液成分进行EGFR基因突变检测提供依据。方法收集2010年9月—2013年5月临床送检肺腺癌胸腔积液标本43例的上清液和细胞块,分别提取DNA,应用HRM方法检测其EGFR基因第18、19、20、21外显子突变情况。结果胸腔积液上清液与细胞块EGFR基因突变率差异无统计学意义(P>0.05)。EGFR基因突变均为第19、21外显子突变,第21外显子基因突变上清液与细胞块结果完全一致。第19外显子基因突变两者略有不同。结论肺腺癌胸腔积液上清液和细胞块均可用于检测其EGFR基因突变状态,但存在假阴性的可能和肿瘤异质性,故建议EGFR检测前兼顾细胞学及HE结果。

环保试剂改善病理科工作环境

2013年医院进行三级甲等医院复评，病理科生物安全管理和职业防护，成了三甲复评的检查重点，其中病理废气、废液、医疗垃圾等的排放及其对环境造成污染的问题，包括病理废液必须交由具备相关资质的公司集中处置，均为检查重点。病理科的空气会受到相当程度的生物与化学制剂污染，其中甲醛、二甲苯等试剂是最常见、最主要和危害最大的污染源。因此，如何减轻病理科的空气污染是一个重要的研究课题。

不同固定方法对胸水细胞块组织形态及免疫细胞化学的影响

目的:探讨不同固定液对细胞块的固定效果和免疫细胞化学标记的影响,寻找一种理想的细胞块的固定液及制作方法。方法:利用4%中性甲醛、乙醇乙醚(1∶1)混合固定液、丙酮三种不同固定液对同一阳性胸水进行固定,制作出细胞块3μm切片,行HE和免疫细胞化学染色,观察染色效果和抗体标记情况。结果:4%中性甲醛固定细胞块HE染色鲜艳清晰,细胞无变性,免疫标记定位准确清晰;乙醇乙醚固定HE染色鲜艳,细胞略有变性,免疫标记欠佳;丙酮固定HE染色鲜艳,细胞略有萎缩变性。结论:在病理制片过程中,固定相当重要,在细胞块的固定液选择中,通过对比,4%中性甲醛是胸水离心细胞块最理想的固定液。

HRM方法检测肺腺癌患者癌性胸水上清液EGFR基因突变的临床意义

目的:探讨应用HRM方法检测肺腺癌患者癌性胸水上清液EGFR基因突变状况及EGFR酪氨酸激酶受体抑制剂治疗的可行性。方法:收集43例肺腺癌患者癌性胸水上清液标本,提取DNA,应用HRM方法检测EGFR基因第18、19、20、21外显子突变状况。统计分析HRM方法与基因测序法检测EGFR突变率的差异。结果:43例肺腺癌患者癌性胸水上清液中,HRM法检测EGFR基因突变共17例,总突变率为39.53%,其中第19外显子突变14例,第21外显子突变3例。基因测序结果显示:EGFR突变14例,总突变率为32.56%,均为第19外显子突变。HRM方法检测第21外显子突变阳性的患者其基因测序结果均为阴性。这可能与HRM方法检测的灵敏度优于测序方法有关。两者突变率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:对难以获取组织标本的肺腺癌患者而言,应用HRM方法检测其癌性胸水上清液,是了解其EGFR基因突变状况的可靠途径,对临床筛查靶向治疗药物具有一定的参考价值。

非酒精性脂肪性肝炎肝穿刺临床病理分析

目的观察非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝穿刺临床病理特征,并对其诊断和鉴别诊断进行分析。方法收集32例NASH的肝穿刺标本及临床资料,通过HE染色及特殊染色观察其组织学特点,并进行病理分级。结果轻度NASH患者中气球样变肝细胞及窦周纤维化少见,中-重度患者中气球样变肝细胞及窦周纤维化,随着病理分级升高而加重;脂肪性肝硬化时脂变的肝细胞数量及小叶内炎细胞均减少。结论病理组织学诊断对于鉴别轻度NASH及中重度NASH有重要价值,正确的NASH分级有助于预后判断及临床干预。

胸水细胞块在荧光原位杂交检测肺癌EGFR基因中的应用

目的将胸水制成细胞块应用于荧光原位杂交(FISH),为肺癌的EGFR基因检测建立无创标本收集平台。方法采用肺癌患者阳性胸水离心获取肿瘤细胞制作成石蜡细胞块,免疫组化分型后进行FISH检测,荧光显微镜观察EGFR基因扩增情况。结果胸水细胞块技术应用于FISH检测EGFR基因检测取得了良好的效果。结论胸水细胞块完全能够为肺癌患者提供准确的EGFR基因扩增情况的结果,指导肺癌患者的靶向治疗。

高密度脂蛋白对严重烧伤大鼠肝组织保护的组织学观察

目的:探讨高密度脂蛋白(HDL)对严重烧伤大鼠肝脏的保护作用。方法:制作大鼠30%体表Ⅲ度烫伤模型,观察正常对照组(不作任何处理),烧伤组(烫伤后30 m in补充平衡溶液)及实验组(烫伤后立即静脉注入HDL)。伤后12、24、48、72 h 4个时间点的肝组织学变化和细胞间粘附分子-1(ICAm 1)的表达。结果:(1)组织学观察:烫伤后各组大鼠肝细胞均有不同程度损伤,其中以烧伤组伤后24 h最重,肝窦扩张充血,窦内炎细胞浸润,肝细胞变性,点灶性坏死,实验组24 h肝组织学改变与烧伤组比较上述损伤明显改善。正常对照组肝组织结构基本正常。(2)ICAm-1免疫组化检测:正常对照组无表达,烧伤组与实验组ICAm-1平均表达率分别为81.6%(49/60)及36.6%(22/60),两组24 h时段的表达率分别为86.6%(13/15)及20%(3/15),烧伤组表达强度明显高于实验组(P<0.01),而两组各其他时段表达强度差异无显著性(P>0.05)。结论:严重烧伤大鼠早期应用HDL对抑制肝细胞中ICAm-1的表达,减少肝细胞免疫损伤有良好的效果。

Sakura Tissue-tek Cryo3冰冻切片机的应用与维护

冰冻切片机是制作冰冻切片的一种先进设备。随着临床外科学的发展,需要冰冻切片进行快速诊断的病例不断增加,冰冻切片机的使用频率随之增高,工作时间日益延长。如何保证冰冻切片机能够正常运转并延长其使用寿命,成为病理科工作人员必须面对的问题。

IGF-1及其受体在乙型病毒性肝炎组织中表达的临床意义

目的 探讨胰岛素样生长因子 - 1 (IGF- 1 )及其受体在乙型病毒性肝炎活检组织中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化技术 ,对 1 0 5例肝炎组织及 1 0例正常肝组织中的 IGF- 1及其受体的表达情况进行检测分析。结果 半定量分析结果显示 ,正常肝组织中 IGF- 1及其受体的表达与急性肝炎、慢性轻度至中度肝炎组织间存在显著性差异 ;急性、慢性轻度、慢性中度肝炎与慢性重度肝炎间存在显著性差异 ;而正常肝组织与慢性重度肝炎间无显著性差异。结论 IGF-

戊型肝炎的组织学观察及ICAM-1的表达

目的探讨戊型肝炎患者肝组织学特征及细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达。方法分析48例戊型肝炎患者肝穿组织学特征,并应用免疫组化S-P法对戊型肝炎组织标本进行ICAM-1标记。结果观察到9种组织学改变,急性黄疸型(32例)组织切片中见肝细胞肿胀、嗜酸性变、灶性坏死、淤胆、枯否细胞增生及汇管区炎等特征。急性无黄疸型(12例)无淤胆及枯否细胞增生,肝细胞脂肪变性显著占66.6%(8/12)。急性重型(4例)组织学改变与急性黄疸型相似,但汇管区周围炎及坏死较为明显,占100%(4/4)。48例三种不同类型戊型肝炎组织中ICAM-1表达,除14例轻度肝炎(G1)阴性外,其余34例有不同程度表达,“2+~3+”的24例中12例为中重度肝炎(G3~4)占50%,提示肝细胞中ICAM-1表达随着病变程度加重表达增强。结论戊型肝炎组织学特征以肝细胞变性、坏死、淤胆、枯否细胞增生及汇管区炎为主要特征,组织中ICAM-1过度表达,可以反应肝细胞损伤程度与肝脏炎症活动有关。

徕卡RM2145半自动切片机保养与维护

切片机是目前病理科最重要的医疗仪器，也是非常精密的医疗器械．对环境及操作要求比较严格，它是否正常工作将直接影响病理科的日常工作．所以病理工作者在工作过程中应细心维护及保养，规范操作，保证工作质量，以便保障仪器的使用价值和延长其使用寿命．以下是我们维护和保养切片机的经验与体会，供大家参考。

Leica Bond-Max全自动免疫组化仪的应用与维护

近年来，随着各种型号的自动免疫组化仪投入应用，这一更科学、更精确、更高效、更方便的免疫组化染色方式正在被越来越多的医疗机构和科研院所所接受，并为免疫组化的标准化问题提供了条件。现就本科室自2011年起使用的德国LeicaBond—Max全自动免疫组化仪的使用方法和维护保养进行归纳总结，并介绍如下。

一种回收废旧石蜡的方法介绍

随着病理标本数量的不断增长 ,石蜡的消耗量日益增大 ,大量的废旧石蜡也随之产生.病理科在每天切片前都要对包埋好的蜡块进行修整 , 去掉包埋盒和小标本四周多余的石蜡;切片时为了暴露组织块的最大切面也需要对蜡块进行修整 ,在这一过程中也会产生很多带组织的废旧石蜡.以前 ,这些废旧石蜡是当做医疗垃圾统一进行焚烧 ,这不仅会造成资源浪费 ,而且在焚烧的过程中还会对环境造成污染.我院在实际工作中找到了一种很好的回收方法 ,实现了部分废旧石蜡再次利用 ,现报告如下.

日本樱花Tissue—tek Cryo3冰冻切片机的正确使用和保养体会

目的:探讨日本樱花Tissue—tek+Cryo3+冰冻切片机的使用规范和保养方法,以保证冰冻切片的质量。方法:通过对日本樱花冰冻切片机的实践操作,在低温恒冷条件下对各种组织进行切片,总结此类冰冻切片机的使用规范和保养方法。结果:正确的使用和保养冰冻切片机,不仅可以节省切片所需时间,还可以提高切片的质量,减少仪器出现故障的机率。结论:正确使用和保养方法是保证病理冰冻切片机更好工作的基础。

用Syn标记肝星状细胞观察慢性乙型病毒性肝炎组织160例

目的探讨肝星状细胞（HSC）在慢性乙型病毒性肝炎（CHB）肝穿组织中的表达及与肝纤维化的关系。方法应用免疫组化SP法对160例慢性乙型病毒性肝炎和10例正常肝组织标本进行突触素（Syn）标记,观察肝星状细胞表达情况。结果正常人肝组织中无HSC表达;160例CHB中,轻度（G1-2,S1-2）104例,HSC表达占20.1%（21/104）;中~重度（G3-4,S3-4）56例,HSC表达占67.8%（38/56）;中、重度HSC表达较轻度显著增强（P〈0.01）。结论CHB肝组织中HSC过度表达可以反映肝组织损伤程度,这与肝脏炎症活动及纤维化有关。