多环芳烃和金属混合暴露对DNA甲基化和DNA甲基转移酶的影响

目的探讨多环芳烃(PAHs)和金属混合暴露与基因组DNA甲基化标志物改变的关系。方法采用横断面研究,在768名研究对象中开展标志物研究。采用超高效液相色谱串联质谱法检测尿1-羟基芘(1-OHP)水平,评估PAHs的内暴露水平;采用电感耦合等离子体质谱法检测尿金属浓度。应用酶联免疫吸附(ELISA)法定量白细胞DNA总甲基化(%5 mC)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法分析DNA甲基化转移酶(DNMTs)的表达改变。使用多重线性回归分析模型、中介分析模型探讨金属与%5 mC和DNMTs的关系,并进一步使用分位数g计算回归模型和贝叶斯核机器回归(BKMR)模型探讨混合暴露与%5 mC的关系。结果线性回归分析显示尿1-OHP、尿镍每增加1个IQR(1.06μmol/mol肌酐、27.75μmol/mol肌酐),%5 mC水平分别降低6.79%和2.95%;尿镍每增加1个IQR(27.75μmol/mol肌酐),DNMT 1表达水平升高11.04%;尿1-OHP、尿锰、尿铁每增加1个IQR(1.06μmol/mol肌酐、32.04μmol/mol肌酐、2402.76μmol/mol肌酐),DNMT 3 B表达水平分别降低22.48%、19.64%、24.59%。混合暴露模型显示PAHs和金属混合暴露会导致DNA总甲基化(%5 mC)和DNMT 3 B表达水平降低,其中与DNA总甲基化(%5 mC)改变相关的组分是PAHs。中介效应提示DNMT 1表达在镍暴露与DNA总甲基化(%5 mC)水平改变中存在介导作用。结论PAHs和金属混合暴露会导致基因组低甲基化改变。镍可能通过影响DNMT 1的表达而影响DNA总甲基化(%5 mC)水平。

三氯乙烯诱发豚鼠过敏性皮炎的免疫学效应

目的研究三氯乙烯(TCE)诱发豚鼠过敏性皮炎的免疫学效应。方法采用豚鼠最大值法建立TCE致敏动物模型,应用ELISA双抗体夹心法定量检测血清中IgG含量;用MTT法测定刀豆蛋白A刺激下T淋巴细胞的增殖转化功能,用乳酸脱氢酶释放法测定NK细胞功能。结果TCE的致敏率为667%,属强致敏物。TCE致敏豚鼠血清总IgG含量明显高于阴性对照组(P<005)。TCE致敏豚鼠脾T淋巴细胞增殖转化功能及NK细胞对瘤细胞的杀伤活性与对照组相比无显著性差异(P>005)。结论体液免疫在TCE诱发过敏性皮炎过程中发挥一定的作用。在本染毒方式和染毒剂量下,未见TCE对豚鼠T淋巴细胞和NK细胞活性的影响。

代谢活化在三氯乙烯对小鼠致敏及肝毒性中的作用

目的研究三氯乙烯(TCE)通过什么代谢通路活化后才具有致敏活性。方法以TCE和细胞色素P450(CYP450)诱导剂(乙醇和苯巴比妥)分别及联合给小鼠染毒,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(GPT)和天冬氨酸氨基转移酶(GOT)活性;分离脾细胞体外培养,采用噻唑兰(MTT)法测定TCE所致小鼠脾淋巴细胞特异性增殖反应和细胞毒性,并观察体外培养过程中加入代谢酶抑制剂SKF525A和氨氧乙酸(AOAA)后对上述效应的影响。结果TCE致敏组小鼠脾淋巴细胞与TCE共孵育后,细胞相对数(79±10)%明显高于溶剂对照组(63±11)%,差异有统计学显著性(P<0.05),在培养液中加入β裂合酶抑制剂AOAA后,这种抗原特异性淋巴细胞增殖反应消失;而乙醇诱导+TCE组和苯巴比妥诱导+TCE组小鼠脾淋巴细胞未出现TCE特异性增殖反应。溶剂对照组、TCE致敏组、乙醇诱导+TCE组和苯巴比妥诱导+TCE组小鼠脾淋巴细胞与TCE+SKF共培养后,细胞相对数均明显高于TCE单独培养的淋巴细胞,差异有统计学显著性(P<0.05)。乙醇诱导+TCE组血清GPT活性(49.5±8.4)μmol·min-1·L-1和苯巴比妥诱导+TCE组血清GPT,GOT活性(47.3±9.9)和(170±36)μmol·min-1·L-1均明显高于溶剂对照组(34.7±2.1)和(117±34)μmol·min-1·L-1,差异有统计学显著性(P<0.05),而TCE致敏组小鼠血清GPT和GOT活性与溶剂对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。结论TCE谷胱甘肽结合通路的代谢产物巯基烯酮类物质具有致敏活性,可能是TCE致敏小鼠的特异性半抗原,而TCE氧化通路的代谢产物是产生细胞毒性和肝损伤的主要物质,乙醇和苯巴比妥能够增加TCE的肝脏毒性。

T、B淋巴细胞及细胞因子在三氯乙烯诱发过敏反应中的作用

目的利用三氯乙烯(TCE)染毒的小鼠模型,研究T、B淋巴细胞及细胞因子在TCE诱发过敏反应中的作用。方法以皮肤接触同时结合吸入对12只小鼠进行致敏处理,6周后耳部涂抹TCE进行激发。以耳肿胀系数作为评价小鼠过敏反应的指标;分离脾细胞体外培养,采用噻唑蓝(MTT)法测定脾淋巴细胞抗原特异性增殖反应;酶联免疫吸附测定(ELISA)方法测定细胞培养上清液中IgG和白介素-4(IL-4)、γ型干扰素(IFN-γ)水平;应用流式细胞技术进行淋巴细胞亚群分析。结果TCE致敏组小鼠脾淋巴细胞加入TCE体外培养后,细胞存活率明显高于溶剂对照组[(79±10)%vs(63±11)%,P<0·05];细胞培养上清液中IgG水平(与二甲基亚砜对照孔比较的相对值)在两组间比较差异有显著性[(70±5%)vs(53±6)%,P<0·01]。流式细胞分析结果显示,TCE致敏组脾淋巴细胞与TCE共培养后,CD3+T细胞占总淋巴细胞的比例[(41·6±4·4)%]及CD4+/CD8+(2·1±0·6)与对照组比较[分别为(39·4±4·0)%和(2·3±0·9)],差异无显著性(P>0·05)。TCE致敏组小鼠激发时未见耳肿胀,然而TCE致敏组小鼠IFN-γ/IL-4比值(0·54±0·12)明显低于溶剂对照组(0·90±0·22,P<0·01)。结论TCE能够诱导T淋巴细胞的增殖活化,分泌Th2型细胞因子,并刺激B淋巴细胞分泌抗原特异性的IgG抗体。

硒对砷毒性的拮抗作用研究

目的 研究硒对砷毒性的拮抗作用。方法 建立大鼠砷中毒模型及硒砷联合染毒模型 ,测定大鼠血砷含量、血细胞计数及血液生化指标 ,对主要脏器进行病理组织学检查。结果 硒砷联合染毒组的大鼠血砷含量明显低于砷中毒组 ;当硒剂量达 10 0 μg/kg·bw时 ,对砷中毒导致的红细胞数下降、血红蛋白含量降低、血液巯基总量下降、脾肿大、肺、肝、肾等组织的病理学改变具有一定的保护作用。结论 硒可以促使砷从血液中排出 。

活性氧对血红蛋白损伤机理的研究

研究了超氧负离子（Ｏ－２）和过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）对血红蛋白（Ｈｂ）的损伤作用。结果表明二者对Ｈｂ的损伤主要集中在血红素辅基部分，但二者损伤途径不同，Ｏ－２是通过电荷中和破坏了辅基与其周围氨基酸残基之间的静电相互作用，从而使辅基完整地脱落；而Ｈ２Ｏ２则是通过Ｆｅｎｔｏｎ反应与血红素辅基中心的Ｆｅ２＋反应产生羟自由基（ＯＨ），ＯＨ在短距离内定点损伤卟啉环结构。

苯-DNA加合物类型与化学特性

本文就苯及其代谢产物与ＤＮＡ形成的加合物类型的判定方法以及不同类型苯－ＤＮＡ加合物的化学特性做一述评

毒理基因组学——在基因表达水平上的环境与健康研究

毒理基因组学是在生物高通量技术手段的应用基础上发展起来的一个新的研究领域 ,主要在基因组水平上研究机体对环境因子的应答反应 ,了解基因 环境交互作用在疾病发生中的作用。本文对毒理基因组学的研究目标。

毒理学中心法则的重新审视——毒物兴奋性剂量-反应关系及其对毒理学发展的影响

剂量 反应关系是毒理学的重要概念 ,一直用于对化学品、药物、物理等有害因素进行毒性预测和外推 ,公共卫生管理部门以此为基础进行有害因素的危险度评价 ,并制定相应的管理法规和控制措施。最近毒理学界提出了一种新的剂量 反应关系模型 ,即毒物兴奋效应模型 ,对过去公认的阈值模型和线性非阈值模型提出了挑战。本文对毒物兴奋效应模型的概念及其在环境、医学。

活性氧对人体中与衰老相关物质的影响

研究了过硫酸按-TEMED体系产生的超氧负离子对健康人血液中几种生物活性物质的作用，结果表明，可以使细胞膜发生脂质过氧化作用，产生丙二醒（MDA），使生物膜造成损伤．同时使血液中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－PX）活性均有所降低．通过对CAT纯品的研究揭示出在血液中经SOD，的作用产生毒性更强的·OH，它是使生物膜破坏及各种酶活性降低的主要原因．

尿中萘及其代谢产物作为焦炉工生物监测指标的研究

目的 探讨尿中萘及其代谢产物作为焦炉工生物监测指标的可行性。方法 在某焦化厂随机选取 2 8名焦炉工人和 2 2名对照个体 ,统一收集工作周末班后 2h尿 ,并使用调查表收集一般情况。采用顶空固相微提取结合气相色谱 -质谱联机方法 ,同时测定尿中萘和芘的水平 ,采用酶水解结合气相色谱 -质谱联机方法 ,同时测定样品中 1-萘酚、 2 -萘酚和 1-羟基芘的水平。使用多元线性回归分析不同工种和吸烟量对尿中这 5种多环芳烃生物标志物浓度的影响。结果 尿中萘、 1-萘酚、 2 -萘酚和 1-羟基芘的浓度呈炉顶工 >炉侧和炉底工 >对照个体的趋势 ,其中尿中 1-萘酚和 1-羟基芘的水平受工种的影响大于2 -萘酚 ;不同暴露水平组中 ,吸烟个体尿中 1-萘酚、 2 -萘酚和 1-羟基芘的浓度均大于不吸烟者 ,但吸烟对 2 -萘酚的影响最大。结论 尿中 1-萘酚和 2 -萘酚浓度均能够有效地反映个体短期多环芳烃暴露的内剂量水平 ,可用于焦炉工的生物监测。

焦炉工外暴露等级与尿中1-羟基芘水平的关系

目的 探讨焦炉工外暴露等级与尿中 1-羟基芘浓度之间的关系。方法 以某焦化厂 30 5名生产工人和 30名非接触者为调查对象 ,统一收集工作周末班后 6h尿 ,并收集个人信息。根据工人的工作岗位将调查对象分为炉顶、炉侧、炉底和对照 4个外暴露等级。采用碱水解 -高效液相色谱法测定尿中1-羟基芘浓度。使用协方差分析和多元线性回归分析暴露等级、吸烟和饮酒等情况对尿中 1-羟基芘浓度的影响。结果 尿中 1-羟基芘的浓度呈炉顶 >炉侧 >炉底 >对照的趋势 ,与外暴露等级之间呈显著相关(Spearman相关系数为 0 5 35 ,P <0 0 1) ;在同样外暴露条件下 ,吸烟量显著影响尿中 1-羟基芘的水平(P <0 0 5 ) ;未发现饮酒对尿中 1-羟基芘水平的显著影响。结论 焦炉工尿中 1-羟基芘水平与外暴露等级之间存在良好的剂量 -效应关系 。

醛、醇脱氢酶基因多态性与三氯乙烯药疹样皮炎易感性的关系

目的研究醛脱氢酶、醇脱氢酶基因多态性与三氯乙烯药疹样皮炎易感性的关系.方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法,比较108例三氯乙烯药疹样皮炎病人和145例健康三氯乙烯接触工人醛脱氢酶2（ALDH2）、醇脱氢酶2（ADH2）和醇脱氢酶3（ADH3）的基因多态性分布,并计算相对危险度（OR）.结果ADH2和ADH3基因型分布在病人与接触对照工人中无显著性差异;ALDH2变异型基因（ALDH2＊1/＊2＋ALDH2＊2/＊2）频率在病人中显著低于接触对照工人（分别为27.8%和43.4%,P=0.011）,使三氯乙烯药疹样皮炎的危险性显著降低（OR=0.50,95% CI=0.29～0.85）.结论高活性ALDH2可能是导致三氯乙烯药疹样皮炎个体易感性差异的原因之一.

接苯工人外周血染色体损伤研究

为探讨苯的遗传损伤 ,用G分带技术 (5 0中期分裂相 人 )和常规染色体分析 (10 0中期分裂相 人 )研究了职业接触苯工人 (4 2 )和正常对照组工人 (4 2 )外周血淋巴细胞染色体数目和结构畸变。苯组畸变细胞数明显增加 (P <0 0 5 ) ,42和 43条染色体分别呈明显差异 (P <0 0 5 )和非常明显差异 (P <0 0 0 1) ;四倍体占接苯组超二倍体总数的 82 43% ,亚二倍体频数≤ 10 2 3mg m3 (2 0人 )和 >10 2 3mg m3 (2 2人 )组分别呈明显和非常明显升高 ,苯组男性四倍体呈非常明显升高 (P <0 0 1) ,而女性 42和 43条染色体依次显示明显 (P <0 0 5 )和非常明显差异 (P <0 0 1)。苯组和对照组结构畸变细胞数有显著差异 (P <0 0 5 )。接苯组男性结构畸变细胞数明显升高 (P <0 0 5 )。结构畸变类型主要是单体裂隙、单体断裂和缺失。与对照组相比苯组主要集中在 2号染色体长臂 (5例细胞畸变 )和 10号长臂 (3例缺失 ) ,表明该部位可能存在脆弱位点。结果提示 ,长期接苯工人染色体数目和结构有明显损伤 ,男性比女性敏感 ;数目畸变以亚二倍体和四倍体为主 ,并呈剂量 -效应关系 ,结构畸变以缺失。

甲醛暴露工人XRCC1基因多态性与DNA损伤的关系研究

目的探讨甲醛暴露工人DNA修复基因XRCC1多态性与外周血淋巴细胞DNA损伤的关系。方法选择某密度板厂的151名甲醛暴露工人(暴露组)和某推土机厂的112名非甲醛暴露工人(对照组)为研究对象。用气相色谱法检测作业环境的甲醛浓度,应用彗星实验测定研究对象外周血淋巴细胞DNA损伤,以Olive尾距和彗星尾长反映DNA损伤水平,用PCR-RFLP方法分析XRCC1基因的多态性;用多元协方差分析调整工人的年龄、工龄、职业甲醛暴露及吸烟与饮烟情况,比较XRCC1基因不同基因型个体的Olive尾距和彗星尾长。结果使用多元协方差分析校正甲醛暴露工人的年龄、工龄、甲醛暴露水平和吸烟与饮酒情况后,携带Arg280His位点变异基因型个体的Olive尾距和彗星尾长(几何均值分别为4.30和13.42)均显著高于野生型基因型的个体(几何均值分别为3.38和11.71),差异均有显著性(Olive尾距:P<0.05,彗星尾长:P<0.01);未发现XRCC1基因其他3个位点的多态性与甲醛暴露工人Olive尾距和彗星尾长有显著关联。结论XRCC1基因Arg280His位点的多态性影响甲醛暴露工人的DNA损伤水平。

基质γ-羧基谷氨酸蛋白和氨基乙酰丙酸脱水酶基因多态性与儿童血铅的关系

[目的]探讨基质γ-羧基谷氨酸蛋白(MGP)和氨基乙酰丙酸脱水酶(ALAD)基因多态性在儿童铅中毒发生过程中的作用。[方法]测定了345名6-12岁的中国汉族儿童的血铅水平;采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)分析MGP和ALAD基因的多态性。[结果]在ALAD基因未发生变异的情况下,MGP基因变异导致血铅水平降低;携带ALAD1-2、ALAD2-2或MGP TT基因型儿童的血铅水平(2．32μmol/L)高于携带ALAD1-1和MGP CT、MGP CC基因型儿童(2．18μmol/L),差异有统计学意义(P=0．0091)。[结论]MGP和ALAD基因多态性可影响儿童铅中毒的易感性,ALAD1-2、ALAD2-2或MGP TT基因型可能是儿童铅中毒的易感基因型。

甲氨基阿维菌素的致突变性、致畸性及亚慢性毒性的研究

目的与方法 :本文报道了甲氨基阿维菌素小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验 ,小鼠精子畸形试验 ,Ames试验 ,对大鼠的亚慢性毒性试验及致畸试验的研究结果。结果与结论 :其剂量在 6.3～ 2 5.2mg/kg的微核试验结果表明 ,各剂量组与阴性对照组的微核率比较 ,结果无显著意义 (P >0 0 5)。 1 0～ 50 0 μg/皿剂量组Ames试验及 1 5.8～ 63mg/kg .bw剂量组小鼠精子畸形试验结果均为阴性。致畸研究结果表明 ,该药对大鼠无明显母体毒作用和胚胎毒作用。亚慢性毒性试验中 ,高剂量组雌性大鼠 (9.2 6mg/kg .bw)尿素氮、雄性大鼠 (1 2 .6mg/kg .bw)尿素氮及白蛋白水平有一定程度的改变 ,雄、雌性大鼠肾脏脏器系数有显著的改变 (P <0 0 5)。雄性大鼠 (1 2 .6mg/kg .bw)体重明显降低 (P <0 0 5) ,比雌性大鼠影响略大。亚慢性毒性最大耐受剂量雌性大鼠为 1 .1 6mg/kg .bw ,雄性大鼠为 1 .57mg/kg .bw。

人类白细胞抗原DRB1基因多态性与三氯乙烯药疹样皮炎易感性的关系

目的研究人类白细胞抗原DRB1(HLA-DRB1)基因多态性与三氯乙烯药疹样皮炎易感性的关系。方法应用聚合酶链反应产物直接测序方法,比较112例三氯乙烯药疹样皮炎病例和142例健康三氯乙烯接触工人HLA-DRB1基因第2外显子氨基酸密码子多态性及等位基因频率分布,并计算相对危险度(OR)及其95%可信区间(95%CI)。结果病例组与接触对照组HLA-DRB1等位基因频率差异有显著性,病例组DRB1*1501、*1202和*04等位基因频率显著高于对照组(分别为18.8%vs7.7%,OR=2.748,95%CI=1.587～4.761;12.5%vs6.0%,OR=2.244,95%CI=1.195～4.214;17.4%vs11.3%,OR=1.660,95%CI=1.002～2.750),而DRB1*0301、*0901、*13和*1502等位基因频率显著低于对照组(分别为0.4%vs4.6%,OR=0.093,95%CI0.012～0.720;7.6%vs13.7%,OR=0.516,95%CI=0.283～0.939;1.3%vs6.7%,OR=0.189,95%CI=0.055～0.648;2.7%vs8.5%,OR=0.298,95%CI=0.120～0.743);病例组与接触对照组间12个位点(密码子9、11、12、13、26、28、30、33、37、70、71、74)氨基酸密码子多态性分布频率差异有显著性。结论HLA-DRB1基因多态性可能是导致三氯乙烯药疹样皮炎个体易感性差异的原因之一。

MGP(T-138C)基因多态性与儿童血铅水平关系的研究

为探讨基质γ 羧基谷氨酸蛋白 (MGP)基因多态性和血铅水平的关系 ,寻找与儿童铅中毒易感性有关的基因 ,测定了 3 55名 6～ 12岁的中国汉族儿童的血铅水平。采用多聚酶链反应 -限制性片段长度多态性法 (PCR RFLP)分析MGP基因T 13 8C位点的多态性。结果表明 ,在铅污染地区TT基因型儿童的血铅水平显著高于CC基因型儿童 (468 2 4μg L .vs .43 0 3 1μg L ,P <0 0 5)。结果显示MGP基因启动子区T 13