新的肺癌血清标志物——甲状腺运载蛋白

背景与目的肺癌是当今世界上最常见的恶性肿瘤之一,迄今缺乏临床诊断可用的分子标志物。本实验应用SELDI技术寻找肺癌新的血清标志物。方法对227例血清样品(包括146例肺癌、13例肺炎、28例结核性胸膜炎和40例正常人血清样品)进行蛋白质谱检测。对候选蛋白进行质谱鉴定,并结合免疫共沉淀和ELISA技术筛选出肺癌新的候选标志物。结果通过Biomarker WizardTM软件分析显示13.78kDa、13.90kDa和14.07kDa的蛋白峰在肺癌病人血清样品中明显低于对照组。通过1-D胶分离,质谱鉴定和免疫沉淀分析显示这3个差异蛋白峰为野生型甲状腺运载蛋白(nativeTTR)和它的两个变体(cysTTR and glutTTR)。ELISA和SELDI技术分析上述血清样品均发现TTRs在肺癌血清中的表达下调。结论采用SELDI技术首次筛选并鉴定出TTRs,表明其可能作为肺癌诊断的候选血清标志物。

蛋白质芯片技术标准化平台的建立

近年来SELDI-TOF-MS被广泛应用于疾病标志物的筛选。并正在成为可能为进一步差异或动态蛋白质组研究提供可靠线索的重要工具。它具有快速、简单、敏感、样本用量极少等优点,尤其适合从大量样本中直接筛选差异蛋白。但由于SELDI技术本身具有较强的操作依赖性,因此建立一个标准化的检测程序是至关重要的。本文采用不同种类的蛋白芯片对血清样本存储时间、冻融次数、芯片和基质的类型,激光强度和平行性等指标进行检测和分析,建立一套能提供最多差异指标的规范化标准程序。上述结果为建立和完善SEL-DI蛋白芯片技术的检测规程奠定理论基础,并提供有重要价值的实验数据。