利用响应面法优化鼠李糖乳杆菌TUST006冷冻干燥保护剂

本文用2水平7因子和响应面分析法筛选优化了鼠李糖乳杆菌TUST006冷冻干燥的保护剂配方。结果表明,脱脂乳、海藻糖、谷氨酸钠能显著提高细胞对冷冻和干燥的环境耐受能力。以冻干后的细胞存活率为响应值,混合保护剂的最佳配方为脱脂乳8.62%,海藻糖2.78%,谷氨酸钠6.74%,细胞存活率为96.44%,贮存两个月后细胞存活率可保持在90.30%。

古代人体生殖性器官形体研究及对中医临床的影响

通过古代文献记载,结合临床实践对中医人体生殖性器官形体进行了研究,发现古代对男子的阴茎、阴囊、睾丸、精索、与精液形成有关的前列腺、精囊腺等均做过形体及其医理的观察研究,对女性的外生殖器、阴道、子宫、输卵管等器官的形体亦做过深入系统的研究,古人这些研究重在指导临床实践,用于提高临床生殖性疾病的诊治水平与疗效。有必要尽快建立中医形体医理学,对中医关于人体形体及其医理进行深入研究,填补中医领域形体知识的空白。并为中医合理应用现代实验诊断技术提供理论基础。

MHSP65-TCL抗黑色素瘤疫苗对免疫细胞活性的影响

目的研究B16黑色素瘤来源的MHSP65-TCL疫苗对黑色素瘤的治疗作用,以及该疫苗在疾病治疗过程中对免疫细胞活性的影响。方法利用反复冻融的方法裂解B16黑色素瘤细胞制备肿瘤细胞裂解物(TCL),将TCL同结核分支杆菌热休克蛋白65(MHSP65)联用制备MHSP65-TCL。于不同时间点,给B16黑色素瘤荷瘤小鼠免疫MHSP65-TCL疫苗,观察该疫苗抑制黑色素细细胞瘤的情况。与此同时,为了验证MHSP65-TCL中的TCL对免疫细胞活性的影响,我们将TCL于体外作用于小鼠脾细胞,然后流式检测脾细胞CD69表达、脾细胞凋亡以及细胞培养上清液中IL-10和IFN-γ的表达情况。结果通过小鼠体内抑瘤实验发现,B16黑色素瘤来源的MHSP65-TCL疫苗在小鼠体内产生了抑制黑色素细胞瘤的作用。通过体外细胞实验发现,MHSP65-TCL中的TCL可以显著刺激体外培养的小鼠脾细胞的活化。除此之外,与这种细胞活化作用相反的,发现TCL还可以诱导一部分体外培养的小鼠脾细胞发生凋亡,并促进脾细胞分泌IL-10,同时抑制IFN-γ的分泌。结论 B16黑色素瘤来源的MHSP65-TCL疫苗对黑色素瘤具有抑制作用。这种抑制作用主要是通过活化免疫细胞产生的。MHSP65-TCL的主要成分TCL对免疫细胞还有抑制作用。这可能同TCL中存在的一些免疫细胞抑制物质有关。这些物质的明确以及去除将有助于提高MHSP65-TCL疫苗的抗肿瘤效力。

肺癌细胞裂解物对树突状细胞的免疫抑制作用

目的:研究Lewis肺癌细胞裂解物对小鼠树突状细胞(DC)的免疫抑制作用。方法:反复冻融法制备Lewis肺癌细胞裂解物,骨髓冲洗提取C57/BL6小鼠DC,GM-CSF、IL-4体外诱导培养DC,ELISA检测肿瘤细胞裂解物(TCL)中透明质酸(HA)含量,ELISA检测DC培养上清液中IL-12和IL-10水平。结果:经检测,Lewis肺癌细胞TCL中含有HA,其含量为42 mg/ml。将这种TCL作用于C57/BL6小鼠DC,同对照组相比,DC的IL-12分泌水平显著下降(P<0.01),而IL-10的分泌水平显著提高(P<0.01),这符合免疫耐受DC细胞因子分泌特点。在用Pep-1抗体封闭DC表面的HA受体CD44后,DC的IL-12、IL-10分泌水平则恢复至同对照组相同的水平(P>0.05)。结论:Lewis肺癌细胞裂解物中含有HA。通过这种物质,肺癌细胞裂解物可以诱生鼠源免疫耐受性DC,从而抑制DC的免疫活性。

科研实例在生物化学与分子生物学教学中的应用

生物化学与分子生物学是生命科学中的研究热点。近些年来生命科学领域的实验技术手段日新月异、各类研究成果层出不穷,但都要遵循生物化学与分子生物学的理论知识基础。以各类生物化学与分子生物学科研成果作为科研实例,应用于生物化学与分子生物学理论课教学,激发学生学习兴趣,从而提高教学质量。

双丹养血胶囊治疗血虚血瘀型月经不调的疗效及对排卵率、妊娠率、性激素的影响

目的分析双丹养血胶囊治疗血虚血瘀型月经不调的疗效及对排卵率、妊娠率、性激素的影响。方法选择70例血虚血瘀型月经不调患者,随机分为观察组35例和对照组35例,对照组患者给予常规激素替代治疗,观察组患者采用双丹养血胶囊治疗。2组均连续治疗6个月,治疗结束后电话随访6个月。观察2组患者的月经改善情况,采用B超检查随访患者的排卵情况,采用中医证候评分评价2组患者治疗前后主要临床症状检测,2组患者治疗前后卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕激素(P)水平,并随访患者的妊娠情况。结果观察组患者的月经恢复正常时间明显短于对照组(P <0. 05),排卵率明显高于对照组(P <0. 05)。2组治疗后中医证候各项积分均显著降低(P均<0. 05),且观察组治疗后各项评分均显著低于对照组(P均<0. 05)。2组治疗后E2及P水平均明显升高而LH和FSH水平均明显下降(P均<0. 05),且观察组各项激素水平改善情况均显著优于对照组(P均<0. 05)。2组患者均得到有效随访,其中观察组患者治疗后6个月内妊娠率为42. 86%,对照组为20. 00%,2组妊娠率比较差异有统计学意义(P <0. 05)。结论双丹养血胶囊治疗血虚血瘀型月经不调的临床效果显著,可以快速恢复月经正常,提高排卵率,有效改善患者的临床症状及调节性激素水平,提高妊娠率。

三阴性乳腺癌TCL诱导THP-1细胞活化及分化的研究

目的:研究三阴性乳腺癌细胞裂解物(TCL)对单核细胞活化和分化所产生的影响,以及裂解物诱导单核细胞分化的机制。方法:选取三阴性乳腺癌细胞系HCC1937制备细胞裂解物,以人单核细胞系THP-1作为研究对象。将HCC1937细胞裂解物作用于THP-1细胞,检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-12的分泌情况,并确定促进细胞因子分泌的最佳裂解物剂量和时间点。流式检测HCC1937细胞裂解物作用的THP-1细胞形态及细胞表面CD68表达的改变,并利用Q-PCR的方法检测裂解物作用后THP-1细胞中促分化关键因子转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)和PU.1蛋白的表达情况。结果:HCC1937细胞裂解物活化的THP-1细胞,大量合成分泌TNF-α、IL-12(P<0.05)。THP-1细胞在裂解物作用后细胞体积、颗粒度等会发生增大,细胞表面CD68表达上调(P<0.05),上述表现符合巨噬细胞的特征。与此同时,作用后THP-1细胞中C/EBPα表达出现上调(P<0.05),而PU.1表达出现下调(P<0.05)。结论:三阴性乳腺癌HCC1937细胞裂解物活化人单核细胞THP-1,并通过促进分化因子C/EBPα的表达和抑制PU.

香棱胶囊治疗子宫肌瘤临床观察

目的:观察中药香棱胶囊治疗子宫肌瘤的临床效果。方法:本院妇产科收治的80例子宫肌瘤病例,依据治疗措施不同随机分两组,对照组(桂枝茯苓丸治疗组)40例和治疗组(香棱胶囊治疗组)40例,比较两组的临床疗效及治疗前后瘤体体积的变化。结果:治疗组用药后瘤体体积明显缩小,且变化程度明显优于对照组,其临床治疗总有效率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:中药香棱胶囊治疗子宫肌瘤患者疗效显著,可明显缩小瘤体体积,并改善临床症状。

山菊稳压胶囊治疗高血压病(肝阳上亢证)65例

目的观察和分析山菊稳压胶囊治疗高血压病肝阳上亢证的临床疗效及安全性。方法采用随机、单盲、阳性药平行对照方法,将符合纳入标准的受试者分为观察组和对照组。其中观察组口服山菊稳压胶囊,对照组口服尼群地平片及山菊稳压胶囊模拟剂,8周后分析两组的用药安全性、降压及中医证候疗效。结果观察组降压显效率为56.25%,总有效率为93.75%;对照组分别为50.00%、90.32%;观察组中医证候显效率20.31%,总有效率95.31%;对照组为分别17.74%、91.94%。两组降压及中医证候疗效比较,差别均无统计学意义(P>0.05)。结论用山菊稳压胶囊治疗高血压病肝阳上亢证患者具有较好的疗效和安全性。

发现教学法在《生物化学与分子生物学》整合式教学中的应用

《生物化学与分子生物学》是医学院校中一门重要的基础课。该课程同临床医学关系密切,但其学习难度较大。为了启发学生的学习兴趣,提高课堂教学质量,我们尝试在该门课程的教学中采用以发现教学法为主的整合式教学。发现教学法是通过设置情景及举例,引导学生自己进行总结,进而领悟到教师所要讲授的知识点。整合式教学采用的教学手段和涉及的教学内容灵活多样,很适合设置情景或提供实例。因此,可以将发现教学法和整合式教学在《生物化学与分子生物学》教学中结合使用,从而活跃课堂气氛,加深学生记忆,并更好地培养学生的实践能力。