4株鸡传染性贫血病毒的分离鉴定及其遗传进化分析

为了解广东地区鸡传染性贫血病毒(CAV)的流行和变异情况,本研究于2014年从广东省大型鸡场采集了12份可疑样品,经PCR鉴定、全基因组测序分析和动物回归试验,共分离得到4株CAV(GD-101、GD-102、GD-103和GD-104)。动物实验结果显示:4株CAV能够引起鸡严重的骨髓黄化和胸腺萎缩,具有典型的高致病性病毒株特征。遗传进化分析结果表明,4株分离株处于同一进化分支(II分支),GD-101和GD-102株与中国GD-B-12株进化关系最近,GD-103及GD-104株与中国SC-SM株进化关系最近,表明本研究所分离到的4株CAV均为高致病性的II分支病毒株,本研究为深入研究广东地区CAV的流行情况提供了参考依据。

鸡心包积液综合征病原的分离鉴定与进化分析

为确诊海南省某鸡场疑似心包积液综合征病例,于2016年5月从海南省某鸡场送检的病鸡中采集病料(肝脏、心脏),研磨,通过卵黄囊接种7日龄SPF鸡胚,并进行鸡胚病变特征观察、禽腺病毒PCR特异性检测、基因测序和Blast序列比对。结果表明,接种鸡胚后5d开始死胚,剖检可见胚体发育受阻,羽毛稀少,体表潮红,鸡胚皮肤表面有出血点;在病料研磨液、尿囊液及胚体肝脏中均检测到大小约为884bp目的片段,将分离病毒命名为HN1605;hexon基因Blast序列比对及遗传进化分析结果表明,分离毒株与2015年山东和湖北报道的Ⅰ亚群腺病毒血清4型(FAV-4)SDSX、SDSX-15、SDNY2-15、HB1510和HBLF-15分离株亲缘关系最近。本研究表明,此次心包积液综合征病原是Ⅰ亚群禽腺病毒血清4型病毒,该病毒依然危害着我国鸡群,疫情不断扩大,并呈现由我国北方地区向南方地区扩散的趋势。

黄羽肉鸡J亚群禽白血病病毒分离鉴定与全基因组序列分析

为了解J亚群禽白血病在黄羽肉鸡中的流行状况,采用病料研磨液接种DF-1细胞、ELISA p27抗原检测、PCR扩增等方法,从广东某鸡场送检疑似禽白血病的黄羽肉鸡病料中分离鉴定出1株J亚群禽白血病病毒,命名为GDLZ0715。为进一步了解该病毒分子学特性,对其进行全基因组测序,并与其他ALV-J毒株进行比较。结果表明,GDLZ0715分离株整个基因组中gag、pol、env基因和LTR相对保守,与各参考ALV-J毒株序列同源性分别达93.5%～95.9%、96.8%～97.3%、89.6%～94.6%和90.8%～95.1%;3′UTR变异较大,与各ALV-J参考毒株序列同源性仅为80.5%～93.4%,其中rTM和E元件大量碱基缺失;进一步分析表明3′UTR中rTM区和E元件大量碱基缺失正成为我国肉鸡ALV-J毒株的变异趋势。

2014～2015年广东省5个黄羽肉种鸡场禽白血病感染情况调查

为了解2014～2015年广东省5个黄羽肉种鸡场禽白血病病毒（Avian leukosis virus，ALV）的感染情况，本研究于2014年3月至2015年3月在广东省5个黄羽肉种鸡场共采集52367份父母代种鸡血液样品，采用DF-1细胞培养分离病毒并对分离物进行ALV—p27抗原以及ALV-A、B和J亚型PCR鉴定。结果显示：5个黄羽肉种鸡场均存在不同程度禽白血病的感染，p27抗原检出率为5．91％（3094／52367），其中ALV—J阳性率为5．12％（2683／52367），ALV-A、B阳性率为0．31％（160／52367），ALV—A、B、J混合感染阳性率为0．48％（251／52367）。调查结果表明：目前这5个鸡场黄羽肉种鸡群ALV感染以ALV—J为主，同时存在ALV—A、B以及ALV—A、B、J亚群混合感染的复杂局面。混合感染现象应引起重视，禽白血病病毒净化工作仍需持续进行。

J亚群禽白血病病毒GD14A8株分离鉴定及遗传进化分析

为了解J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的流行和变异情况,本研究利用ALV-p27群特异性抗原检测、PCR鉴定、病毒分离和全基因组测序分析等方法,从广东某鸡场分离鉴定出1株ALV-J,命名为GD14A8。全基因组序列分析表明,GD14A8分离株的gag、pol、env基因和LTR相对保守,而3′UTR变异较大,与ALV-J参考毒株序列同源性仅为82.5%~92.5%,其中rTM和E元件呈现大量碱基缺失,U3区出现与血管瘤分离株NHH和SCDY1类似的11个碱基缺失,可能与血管瘤形成相关。遗传进化分析表明,GD14A8分离株与我国鸡源ALV-J血管瘤分离株SCDY1亲缘关系最近。本研究为分析黄羽肉鸡源ALV-J毒株的分子特征提供了重要的数据资料,为深入了解广东地区ALV-J的变异趋势提供参考。

1株鸭Ⅱ型腺病毒的分离与鉴定

2015年1月在广东省某鸭场分离到1株鸭Ⅱ型腺病毒,该毒株为中国首例鸭Ⅱ型腺病毒。该分离株能在原代鸭胚成纤维细胞内增殖,引起明显的细胞病变。15日龄鸭接种该病毒后呈现出典型的腺病毒感染症状和病理变化,动物回归实验发现攻毒鸭出现明显的包涵体肝炎症状,表现为心脏和肝脏出血肿大,肝脏出现坏死灶。