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甘蔗过氧化物酶基因ScPOD02的克隆与功能鉴定
被引量:
16
1
作者
苏亚春
王竹青
+5 位作者
李竹
刘峰
许莉萍
阙友雄
戴明剑
陈允浩
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期510-521,共12页
过氧化物酶(POD)广泛存在于植物各种器官及其不同发育阶段,在植物生长发育及应对逆境胁迫中起重要作用。本研究基于前期转录组数据,从黑穗病菌侵染2 d的甘蔗抗黑穗病品种崖城05-179中分离到ScPOD02基因的cDNA(GenBank登录号为KU593507)...
过氧化物酶(POD)广泛存在于植物各种器官及其不同发育阶段,在植物生长发育及应对逆境胁迫中起重要作用。本研究基于前期转录组数据,从黑穗病菌侵染2 d的甘蔗抗黑穗病品种崖城05-179中分离到ScPOD02基因的cDNA(GenBank登录号为KU593507)及基因组DNA(GenBank登录号为KU593508)序列。其cDNA全长为1434 bp,ORF区为1047 bp,编码348个氨基酸,而基因组DNA全长为1558 bp,含2个外显子和1个内含子。系统发育树显示,ScPOD02与水稻Os Prx11(GenBank登录号为gi|55700889)属于同一个进化分支,推测ScPOD02属于酸性胞外分泌/细胞壁类型的I.1型过氧化物酶家族。将该基因克隆到原核表达载体p ET 32a上,转化大肠杆菌BL21,经异丙基-β-d-硫代半乳糖苷诱导成功获得了大小约60 k D的融合蛋白,且该重组菌在聚乙二醇胁迫下的长势较对照快,表明其耐受干旱胁迫的能力更强。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析表明,除ROC22和YZ03-103外,ScPOD02基因在甘蔗抗病品种(YZ03-258、YZ01-1413、YT96-86和LC05-136)中受黑穗病菌诱导上调表达,但在中感(GT02-467和FN39)和感病(FN40)品种中的基因表达量基本维持不变或略有降低;此外,ScPOD02积极应答水杨酸、脱落酸、聚乙二醇及氯化钠的胁迫。通过农杆菌介导法在本氏烟叶片上瞬时表达ScPOD02,结果显示出较深的DAB染色,且过表达后本氏烟中的目标基因(ScPOD02)及过敏性反应(HR)标记基因(Nt HSR201和Nt HSR203)和乙烯合成依赖基因(Nt EFE26和Nt Accdeaminase)均上调表达。以上研究结果显示,ScPOD02具有参与甘蔗免疫应答及抗旱和抗盐害的潜在功能。
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关键词
甘蔗
ScPOD02
基因克隆
生物和非生物胁迫
基因表达量
原核表达分析
瞬时表达分析
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职称材料
甘蔗ScWRKY4基因的克隆与表达特性分析
被引量:
12
2
作者
王玲
刘峰
+7 位作者
戴明剑
孙婷婷
苏炜华
王春风
张旭
毛花英
苏亚春
阙友雄
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期1367-1379,共13页
WRKY是植物中特有的转录因子家族之一,在植物对生物和非生物逆境胁迫的应答反应中起重要调控作用。本研究基于课题组前期构建的甘蔗(Saccharum spp.)转录组数据库,从新台糖22(ROC22)中成功克隆到1个WRKY基因,命名为Sc WRKY4(Gen Bank登...
WRKY是植物中特有的转录因子家族之一,在植物对生物和非生物逆境胁迫的应答反应中起重要调控作用。本研究基于课题组前期构建的甘蔗(Saccharum spp.)转录组数据库,从新台糖22(ROC22)中成功克隆到1个WRKY基因,命名为Sc WRKY4(Gen Bank登录号为MG852087)。序列分析发现,Sc WRKY4基因c DNA全长1265 bp,包含1个741 bp的完整开放读码框,编码246个氨基酸,该蛋白具有1个WRKYGQK保守结构域和C2H2锌指结构域,属于IIc类WRKY转录因子。生物信息学预测分析发现,Sc WRKY4蛋白为碱性的不稳定亲水性蛋白,不存在信号肽和跨膜结构域,蛋白二级结构元件缺少β螺旋。在本氏烟(Nicotiana benthamiana)叶片瞬时表达中,Sc WRKY4蛋白定位于细胞核。酵母杂交实验结果显示,Sc WRKY4不具有转录激活活性。实时荧光定量PCR分析表明,Sc WRKY4基因在甘蔗的根、叶、芽和皮中的表达量无明显差异,在蔗肉中的表达量最高,为对照蔗根的18.38倍;黑穗病菌侵染0~72 h,Sc WRKY4在抗病品种崖城05-179中下调表达,在感病品种ROC22中表达较稳定;受到外源激素脱落酸、水杨酸和茉莉酸甲酯以及非生物胁迫因子氯化钠和聚乙二醇胁迫后,Sc WRKY4基因均被诱导上调表达。上述研究结果表明,Sc WRKY4基因可能不参与甘蔗对黑穗病的抗性反应或在该防御方面起负调控作用,但积极响应甘蔗对盐和干旱胁迫的应答。
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关键词
甘蔗
WRKY转录因子
生物信息学
亚细胞定位
转录激活活性
实时荧光定量PCR
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职称材料
不同浓度多效唑对槟榔芋产量及母芋和土壤残留的影响
3
作者
戴明剑
《基层农技推广》
2024年第1期51-55,共5页
探讨不同浓度多效唑对槟榔芋(汀芋1号)产量及母芋和土壤残留的影响,为槟榔芋高效安全生产提供参考。以汀芋1号槟榔芋为试验材料,采用芋茎部浇施的方法,按浇施多效唑浓度设置6个处理,分别为A(80 g/亩)、B(110 g/亩)、C(140 g/亩)、D(170...
探讨不同浓度多效唑对槟榔芋(汀芋1号)产量及母芋和土壤残留的影响,为槟榔芋高效安全生产提供参考。以汀芋1号槟榔芋为试验材料,采用芋茎部浇施的方法,按浇施多效唑浓度设置6个处理,分别为A(80 g/亩)、B(110 g/亩)、C(140 g/亩)、D(170 g/亩)、E(200 g/亩)、F(CK),研究不同浓度多效唑对槟榔芋产量及母芋和土壤残留的影响。结果表明,多效唑能起到矮化植株、提高槟榔芋产量的效果,其中以浇施80 g/亩15%多效唑处理的槟榔芋产量最高;不同处理的槟榔芋母芋中多效唑的残留量均低于检测下限,多效唑处理槟榔芋相对安全。综合来看,浇施适量浓度的多效唑不仅对槟榔芋生长发育具有促进作用,更有利于槟榔芋的高效安全生产,适宜大面积推广。
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关键词
多效唑
槟榔芋
土壤残留
产量
安全
原文传递
甘蔗茉莉酸合成关键酶基因ScOPR1的克隆、亚细胞定位及表达
被引量:
4
4
作者
孙婷婷
王文举
+6 位作者
刘峰
王玲
李竹
戴明剑
阙友雄
许莉萍
苏亚春
《应用与环境生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期1365-1374,共10页
12-氧-植物二烯酸还原酶(12-Oxo-phytodienoic acid reductase,OPR)是十八碳烯酸途径的关键酶之一,控制着茉莉酸合成的最后一个步骤.目前,甘蔗(Saccharum spp.)OPR基因的研究尚未见报道.从课题组构建的甘蔗转录组unigene注释库中筛选到...
12-氧-植物二烯酸还原酶(12-Oxo-phytodienoic acid reductase,OPR)是十八碳烯酸途径的关键酶之一,控制着茉莉酸合成的最后一个步骤.目前,甘蔗(Saccharum spp.)OPR基因的研究尚未见报道.从课题组构建的甘蔗转录组unigene注释库中筛选到一个OPR基因,利用RT-PCR技术从ROC22接种黑穗病菌48 h的蔗芽中扩增获得全长cDNA序列,命名为ScOPR1(GenBank Accession Number:MG755745),并对该基因的序列特征、亚细胞定位、组织特异性表达及其在不同植物激素胁迫和不同基因型甘蔗与黑穗病菌互作过程中的表达情况进行分析.生物信息学分析发现,ScOPR1基因全长1 287 bp,包含1个1 116 bp的开放阅读框,编码371个氨基酸,理论等电点为6.01,含有底物结合活性、FMN结合活性和催化活性的氨基酸保守位点以及OYE家族的保守结构域,且与高粱(Sorghum bicolor)OPR蛋白(XP_002447901.2)的氨基酸序列一致性高达96.23%,推测其为酸性稳定亲水性非分泌OPRⅠ蛋白.本氏烟(Nicotiana benthamiana)瞬时表达显示,ScOPR1::GFP融合蛋白定位于细胞质和细胞膜.qRT-PCR分析结果显示,ScOPR1基因在甘蔗不同组织中均有表达,其在根中的表达量最高,其次为叶和蔗皮,而在蔗芽和蔗肉中的表达量最低.茉莉酸甲酯和水杨酸处理后,随着胁迫时间的延长(3-24 h),ScOPR1基因显著上调表达;该基因在脱落酸处理0.5 h时被诱导表达,为对照的1.54倍.此外,ScOPR1基因在抗黑穗病品种崖城05-179受黑穗病菌侵染初期(24 h)显著上调表达,但在感黑穗病品种ROC22中下调表达;48-72 h时ScOPR1基因的表达量在两个甘蔗基因型中较对照有所增加,但在抗病品种中高于感病品种.本研究表明,ScOPR1基因积极响应茉莉酸甲酯、水杨酸和脱落酸信号分子以及黑穗病菌的胁迫,结果可为进一步分析ScOPR1基因的功能和甘蔗抗病基因工程提供参考.
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关键词
甘蔗
12-氧-植物二烯酸还原酶
生物信息学分析
亚细胞定位
定量表达
原文传递
存入绿水青山 取出金山银山
5
作者
林大龙
刘铭永
戴明剑
《党员生活(湖北)》
2022年第21期53-53,共1页
“山上没资源,守着七分田,砍柴换油盐,养一头猪等过年。”这句在龙岩市长汀县四都镇上蕉村盛传的顺口溜,道出了2016年以前上蕉村经济发展结构单一、人均收入低下的困境。然而,不到6年的时间,上蕉村却发生了翻天覆地的变化,从人均收入不...
“山上没资源,守着七分田,砍柴换油盐,养一头猪等过年。”这句在龙岩市长汀县四都镇上蕉村盛传的顺口溜,道出了2016年以前上蕉村经济发展结构单一、人均收入低下的困境。然而,不到6年的时间,上蕉村却发生了翻天覆地的变化,从人均收入不足8000元,到如今增长到22000余元。近年来,上蕉村党支部坚持“绿水青山就是金山银山”的发展理念,大力实施“党建富民强村”工程,通过支部强引领、产业促致富、党员当先锋,以独特的生态资源优势,大力发展林下经济,努力建设民富村美“新上蕉”。
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关键词
经济发展结构
村党支部
四都镇
生态资源优势
金山银山
长汀县
绿水青山
人均收入
原文传递
题名
甘蔗过氧化物酶基因ScPOD02的克隆与功能鉴定
被引量:
16
1
作者
苏亚春
王竹青
李竹
刘峰
许莉萍
阙友雄
戴明剑
陈允浩
机构
福建农林大学/农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室/国家甘蔗产业技术研发中心
出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期510-521,共12页
基金
福建省杰出青年科学基金项目(2015J06006)
福建农林大学杰出青年基金项目(xjq201630)
国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-20)资助~~
文摘
过氧化物酶(POD)广泛存在于植物各种器官及其不同发育阶段,在植物生长发育及应对逆境胁迫中起重要作用。本研究基于前期转录组数据,从黑穗病菌侵染2 d的甘蔗抗黑穗病品种崖城05-179中分离到ScPOD02基因的cDNA(GenBank登录号为KU593507)及基因组DNA(GenBank登录号为KU593508)序列。其cDNA全长为1434 bp,ORF区为1047 bp,编码348个氨基酸,而基因组DNA全长为1558 bp,含2个外显子和1个内含子。系统发育树显示,ScPOD02与水稻Os Prx11(GenBank登录号为gi|55700889)属于同一个进化分支,推测ScPOD02属于酸性胞外分泌/细胞壁类型的I.1型过氧化物酶家族。将该基因克隆到原核表达载体p ET 32a上,转化大肠杆菌BL21,经异丙基-β-d-硫代半乳糖苷诱导成功获得了大小约60 k D的融合蛋白,且该重组菌在聚乙二醇胁迫下的长势较对照快,表明其耐受干旱胁迫的能力更强。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析表明,除ROC22和YZ03-103外,ScPOD02基因在甘蔗抗病品种(YZ03-258、YZ01-1413、YT96-86和LC05-136)中受黑穗病菌诱导上调表达,但在中感(GT02-467和FN39)和感病(FN40)品种中的基因表达量基本维持不变或略有降低;此外,ScPOD02积极应答水杨酸、脱落酸、聚乙二醇及氯化钠的胁迫。通过农杆菌介导法在本氏烟叶片上瞬时表达ScPOD02,结果显示出较深的DAB染色,且过表达后本氏烟中的目标基因(ScPOD02)及过敏性反应(HR)标记基因(Nt HSR201和Nt HSR203)和乙烯合成依赖基因(Nt EFE26和Nt Accdeaminase)均上调表达。以上研究结果显示,ScPOD02具有参与甘蔗免疫应答及抗旱和抗盐害的潜在功能。
关键词
甘蔗
ScPOD02
基因克隆
生物和非生物胁迫
基因表达量
原核表达分析
瞬时表达分析
Keywords
Sugarcane
ScPOD02
Gene cloning
Biotic and abiotic stresses
Gene expression level
Prokaryotic expression analysis
Transient expression analysis
分类号
S566.1 [农业科学—作物学]
下载PDF
职称材料
题名
甘蔗ScWRKY4基因的克隆与表达特性分析
被引量:
12
2
作者
王玲
刘峰
戴明剑
孙婷婷
苏炜华
王春风
张旭
毛花英
苏亚春
阙友雄
机构
福建农林大学/农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室
福建农林大学/教育部作物遗传育种与综合利用重点实验室
出处
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期1367-1379,共13页
基金
国家自然科学基金项目(31671752和31101196)
福建省杰出青年基金项目(2015J06006)
+1 种基金
福建省高校杰出青年科研人才计划项目(苏亚春-2017)
国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-17)资助~~
文摘
WRKY是植物中特有的转录因子家族之一,在植物对生物和非生物逆境胁迫的应答反应中起重要调控作用。本研究基于课题组前期构建的甘蔗(Saccharum spp.)转录组数据库,从新台糖22(ROC22)中成功克隆到1个WRKY基因,命名为Sc WRKY4(Gen Bank登录号为MG852087)。序列分析发现,Sc WRKY4基因c DNA全长1265 bp,包含1个741 bp的完整开放读码框,编码246个氨基酸,该蛋白具有1个WRKYGQK保守结构域和C2H2锌指结构域,属于IIc类WRKY转录因子。生物信息学预测分析发现,Sc WRKY4蛋白为碱性的不稳定亲水性蛋白,不存在信号肽和跨膜结构域,蛋白二级结构元件缺少β螺旋。在本氏烟(Nicotiana benthamiana)叶片瞬时表达中,Sc WRKY4蛋白定位于细胞核。酵母杂交实验结果显示,Sc WRKY4不具有转录激活活性。实时荧光定量PCR分析表明,Sc WRKY4基因在甘蔗的根、叶、芽和皮中的表达量无明显差异,在蔗肉中的表达量最高,为对照蔗根的18.38倍;黑穗病菌侵染0~72 h,Sc WRKY4在抗病品种崖城05-179中下调表达,在感病品种ROC22中表达较稳定;受到外源激素脱落酸、水杨酸和茉莉酸甲酯以及非生物胁迫因子氯化钠和聚乙二醇胁迫后,Sc WRKY4基因均被诱导上调表达。上述研究结果表明,Sc WRKY4基因可能不参与甘蔗对黑穗病的抗性反应或在该防御方面起负调控作用,但积极响应甘蔗对盐和干旱胁迫的应答。
关键词
甘蔗
WRKY转录因子
生物信息学
亚细胞定位
转录激活活性
实时荧光定量PCR
Keywords
sugarcane
WRKY transcription factor
bioinformatics
subcellular localization
transcriptional activity
real-time flourescent quantitative PCR
分类号
S566.1 [农业科学—作物学]
下载PDF
职称材料
题名
不同浓度多效唑对槟榔芋产量及母芋和土壤残留的影响
3
作者
戴明剑
机构
福建省龙岩市长汀县四都镇人民政府乡村振兴服务中心
出处
《基层农技推广》
2024年第1期51-55,共5页
文摘
探讨不同浓度多效唑对槟榔芋(汀芋1号)产量及母芋和土壤残留的影响,为槟榔芋高效安全生产提供参考。以汀芋1号槟榔芋为试验材料,采用芋茎部浇施的方法,按浇施多效唑浓度设置6个处理,分别为A(80 g/亩)、B(110 g/亩)、C(140 g/亩)、D(170 g/亩)、E(200 g/亩)、F(CK),研究不同浓度多效唑对槟榔芋产量及母芋和土壤残留的影响。结果表明,多效唑能起到矮化植株、提高槟榔芋产量的效果,其中以浇施80 g/亩15%多效唑处理的槟榔芋产量最高;不同处理的槟榔芋母芋中多效唑的残留量均低于检测下限,多效唑处理槟榔芋相对安全。综合来看,浇施适量浓度的多效唑不仅对槟榔芋生长发育具有促进作用,更有利于槟榔芋的高效安全生产,适宜大面积推广。
关键词
多效唑
槟榔芋
土壤残留
产量
安全
分类号
S632.3 [农业科学—蔬菜学]
原文传递
题名
甘蔗茉莉酸合成关键酶基因ScOPR1的克隆、亚细胞定位及表达
被引量:
4
4
作者
孙婷婷
王文举
刘峰
王玲
李竹
戴明剑
阙友雄
许莉萍
苏亚春
机构
福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室
福建农林大学教育部作物遗传育种与综合利用重点实验室
出处
《应用与环境生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期1365-1374,共10页
基金
福建农林大学杰出青年基金(xjq201630)
国家自然科学基金项目(31501363)
现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-17)资助~~
文摘
12-氧-植物二烯酸还原酶(12-Oxo-phytodienoic acid reductase,OPR)是十八碳烯酸途径的关键酶之一,控制着茉莉酸合成的最后一个步骤.目前,甘蔗(Saccharum spp.)OPR基因的研究尚未见报道.从课题组构建的甘蔗转录组unigene注释库中筛选到一个OPR基因,利用RT-PCR技术从ROC22接种黑穗病菌48 h的蔗芽中扩增获得全长cDNA序列,命名为ScOPR1(GenBank Accession Number:MG755745),并对该基因的序列特征、亚细胞定位、组织特异性表达及其在不同植物激素胁迫和不同基因型甘蔗与黑穗病菌互作过程中的表达情况进行分析.生物信息学分析发现,ScOPR1基因全长1 287 bp,包含1个1 116 bp的开放阅读框,编码371个氨基酸,理论等电点为6.01,含有底物结合活性、FMN结合活性和催化活性的氨基酸保守位点以及OYE家族的保守结构域,且与高粱(Sorghum bicolor)OPR蛋白(XP_002447901.2)的氨基酸序列一致性高达96.23%,推测其为酸性稳定亲水性非分泌OPRⅠ蛋白.本氏烟(Nicotiana benthamiana)瞬时表达显示,ScOPR1::GFP融合蛋白定位于细胞质和细胞膜.qRT-PCR分析结果显示,ScOPR1基因在甘蔗不同组织中均有表达,其在根中的表达量最高,其次为叶和蔗皮,而在蔗芽和蔗肉中的表达量最低.茉莉酸甲酯和水杨酸处理后,随着胁迫时间的延长(3-24 h),ScOPR1基因显著上调表达;该基因在脱落酸处理0.5 h时被诱导表达,为对照的1.54倍.此外,ScOPR1基因在抗黑穗病品种崖城05-179受黑穗病菌侵染初期(24 h)显著上调表达,但在感黑穗病品种ROC22中下调表达;48-72 h时ScOPR1基因的表达量在两个甘蔗基因型中较对照有所增加,但在抗病品种中高于感病品种.本研究表明,ScOPR1基因积极响应茉莉酸甲酯、水杨酸和脱落酸信号分子以及黑穗病菌的胁迫,结果可为进一步分析ScOPR1基因的功能和甘蔗抗病基因工程提供参考.
关键词
甘蔗
12-氧-植物二烯酸还原酶
生物信息学分析
亚细胞定位
定量表达
Keywords
sugarcane
12-oxo-phytodienoic acid
bioinformatic analysis
subcellular localization
quantitative expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
S566.1 [农业科学—作物学]
原文传递
题名
存入绿水青山 取出金山银山
5
作者
林大龙
刘铭永
戴明剑
机构
不详
出处
《党员生活(湖北)》
2022年第21期53-53,共1页
文摘
“山上没资源,守着七分田,砍柴换油盐,养一头猪等过年。”这句在龙岩市长汀县四都镇上蕉村盛传的顺口溜,道出了2016年以前上蕉村经济发展结构单一、人均收入低下的困境。然而,不到6年的时间,上蕉村却发生了翻天覆地的变化,从人均收入不足8000元,到如今增长到22000余元。近年来,上蕉村党支部坚持“绿水青山就是金山银山”的发展理念,大力实施“党建富民强村”工程,通过支部强引领、产业促致富、党员当先锋,以独特的生态资源优势,大力发展林下经济,努力建设民富村美“新上蕉”。
关键词
经济发展结构
村党支部
四都镇
生态资源优势
金山银山
长汀县
绿水青山
人均收入
分类号
F32 [经济管理—产业经济]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甘蔗过氧化物酶基因ScPOD02的克隆与功能鉴定
苏亚春
王竹青
李竹
刘峰
许莉萍
阙友雄
戴明剑
陈允浩
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
16
下载PDF
职称材料
2
甘蔗ScWRKY4基因的克隆与表达特性分析
王玲
刘峰
戴明剑
孙婷婷
苏炜华
王春风
张旭
毛花英
苏亚春
阙友雄
《作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
12
下载PDF
职称材料
3
不同浓度多效唑对槟榔芋产量及母芋和土壤残留的影响
戴明剑
《基层农技推广》
2024
0
原文传递
4
甘蔗茉莉酸合成关键酶基因ScOPR1的克隆、亚细胞定位及表达
孙婷婷
王文举
刘峰
王玲
李竹
戴明剑
阙友雄
许莉萍
苏亚春
《应用与环境生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
4
原文传递
5
存入绿水青山 取出金山银山
林大龙
刘铭永
戴明剑
《党员生活(湖北)》
2022
0
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已选择
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