钩端螺旋体OmpR家族相关TCS 鉴定及功能初探

目的建立钩端螺旋体(钩体)OmpR家族双组分系统(TCS)的鉴定方法,初步探讨OmpR家族TCS在钩体感染人巨噬细胞过程中对钩体主要外膜蛋白(OMPs)表达水平的调控作用。方法采用生物信息学技术预测致病性钩体赖株TCS的组氨酸激酶(HK)和应答调节蛋白(RR)OmpR功能结构域。采用激酶活性检测试剂盒和细菌双杂交技术进一步验证各HK激酶活性以及各HK与RR的相互作用。采用qRT-PCR法检测HK抗血清封闭前后钩体主要OMPs基因mRNA水平的变化。结果钩体56601株中LA2828、LA1710含有HATPase_c激酶催化结构域,LA2827、LA1709含有Response_reg与OmpR功能结构域,提示其分别可构成HK/OmpR-TCS。体外重组HK-2828和HK-1710蛋白均具有激酶活性,且分别与OmpR-2827和OmpR-1709存在直接的相互作用。HK-2828抗体封闭处理可使感染过程中显著下降的外膜蛋白编码基因lipL32、lipL41和ompL1的mRNA水平明显回升。结论成功构建钩体OmpR家族-TCS鉴定及功能探究体系,为阐明感染过程中问号钩体OMPs表达改变调控机制,以及制定基因工程疫苗OMPs抗原筛选新策略提供依据。

苓术散联合二甲双胍治疗脾虚湿阻证代谢综合征临床观察

目的 探讨苓术散联合二甲双胍对脾虚湿阻证代谢综合征(MS)患者体格指标、生化指标及炎性因子水平的影响。方法 选取江苏省宜兴市中医医院2020年10月至2023年3月收治的脾虚湿阻证MS患者88例,按随机数字表法分为对照组和研究组,各44例。两组患者均予二甲双胍联合常规综合治疗,研究组患者加用苓术散,均治疗12周。结果 治疗后,两组患者的体格指标(体质量、体质量指数、腰围、臀围)、生化指标(收缩压、舒张压、空腹血糖、餐后2 h血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇)均显著降低(P <0.05),且研究组均显著低于对照组(P <0.05);两组患者的炎性因子(C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素6)水平均显著降低(P <0.05),且研究组均显著低于对照组(P <0.05);两组患者的高密度脂蛋白胆固醇水平均显著升高(P <0.05),且研究组显著高于对照组(P <0.05)。治疗期间,两组患者均未出现恶心呕吐、腹痛等不良反应。结论 苓术散联合二甲双胍治疗脾虚湿阻证MS,可降低患者的体质量、体质量指数,减少腰围、臀围,调节血压、糖代谢、脂代谢指标,减轻炎性反应,且安全性较好。

解郁通络消瘿汤联合常规西医治疗桥本甲状腺炎的临床研究

目的分析解郁通络消瘿汤联合常规西医治疗桥本甲状腺炎的临床效果。方法2020年1月—2022年2月宜兴市中医医院收治的102例桥本甲状腺炎患者,分为对照组与研究组,各51例,方法为随机数字表法。对照组接受左甲状腺素钠片治疗,研究组在此基础上接受解郁通络消瘿汤治疗,两组均治疗3个月。分析两组治疗3个月后疗效,治疗前、治疗3个月后甲状腺功能、中医证候评分、血清微小核糖核酸(micro ribonucleic acid,miRNAs)表达水平。结果治疗3个月后,研究组总有效率为92.16%(47/51),高于对照组的80.39%(41/51)(P<0.05)。与治疗前比较,治疗3个月后两组血清甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody,TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody,TPOAb)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)水平,颈部梗塞、颈部肿大、食少纳呆、情绪抑郁的得分,血清微小核糖核酸-146a(micro ribonucleic acid-146a,miR-146a)、微小核糖核酸-454(micro ribonucleic acid-454,miR-454)、微小核糖核酸-155(micro ribonucleic acid-155,miR-155)表达水平降低,且研究组更低(P<0.05);两组血清游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)、游离三碘甲腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)水平升高,且研究组更高(P<0.05)。结论解郁通络消瘿汤联合常规西医治疗桥本甲状腺炎的临床效果确切,可降低中医证候评分,改善甲状腺功能,调节miRNAs表达水平。

枳实大黄汤联合丁苯酞对急性脑梗死神经功能和氧化应激的影响

目的观察枳实大黄汤联合丁苯酞对急性脑梗死(ACI)患者的神经功能及血清氧化应激水平的影响。方法将92例ACI患者按照随机数字表法分为两组各46例,观察组采用枳实大黄汤联合丁苯酞治疗,对照组采用丁苯酞治疗,治疗周期14 d。观察治疗后两组临床疗效、中医证候评分、神经功能、血清氧化应激水平以及不良反应。结果治疗14 d后,观察组血清丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平低于对照组(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)水平高于对照组(P<0.05)。治疗后两组神经功能评分均明显下降(P<0.05),观察组治疗后评分均显著低于对照组(P<0.05)。观察组总有效率为95.65%,高于对照组78.26%(P<0.05)。治疗后观察组半身不遂、偏身麻木、头晕目眩等症状积分均低于对照组(P<0.05);观察组胃肠道障碍、肢体乏力、言语不清、反应迟钝等不良反应发生率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论枳实大黄汤联合丁苯酞治疗ACI患者能够改善血清氧化应激水平,提升神经功能,提高其临床疗效,改善临床症状,无明显不良反应。

加味大柴胡汤对肥胖伴胰岛素抵抗患者临床症状、体征、糖脂代谢和不良反应的影响

目的:探讨加味大柴胡汤对肥胖伴胰岛素抵抗(IR)患者临床症状、体征、糖脂代谢和不良反应的影响。方法:选取2020年5月~2022年12月期间于我院诊疗的肥胖伴IR患者86例,纳入患者应用随机数字表法分为观察组与对照组,每组43例。对照组接受常规对症治疗,观察组在对照组基础上予以加味大柴胡汤治疗。评估两组疗效,比较两组中医证候积分、糖脂代谢水平、免疫指标水平以及身体质量指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、腰臀比(WHR)水平,并统计两组不良反应发生情况。结果:治疗后,观察组治疗总有效率为95.35%,高于对照组的81.40%(P<0.05);两组形体肥胖、面色萎黄、口苦粘腻、大便溏薄评分均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05);两组BMI、HOMA-IR、WHR水平均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05);两组三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)及空腹胰岛素(FINS)水平均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05);两组白介素-2(IL-2)、IL-6及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05);两组不良反应总发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:加味大柴胡汤治疗肥胖伴IR可提高对患者临床症状、体征、糖脂代谢水平、免疫功能的改善效果,且药物不良反应发生风险较低。

柴归汤辅助优甲乐治疗桥本甲状腺炎甲状腺功能减退的效果分析

目的 分析甲状腺炎甲状腺功能减退患者采用柴归汤辅助优甲乐治疗的干预效果。方法 选择近1年(2021年1月至2022年2月)本院收治的甲状腺炎甲状腺功能减退患者50例。将采用柴归汤+优甲乐治疗的25例作为观察组,单独采用优甲乐治疗的25例患者作为对照组,对比两组临床疗效。结果 治疗后,观察组甲状腺功能中TSH、FT3、FT4水平分别为(4.56±0.74)mIU/L、(6.22±1.45)poml/L、(17.52±5.26)poml/L,对照组甲状腺功能中TSH、FT3、FT4水平分别为(5.28±0.98)m IU/L、(3.51±0.62)poml/L、(12.98±1.92)poml/L,各指标组间对比差异明显(P <0.05);观察组血清甲状腺自身抗体中TG-Ab、TPO-Ab水平分别为(346.37±147.52)IU/mL、(377.82±173.65)IU/mL,对照组血清甲状腺自身抗体中TG-Ab、TPO-Ab水平分别为(673.59±189.23)IU/mL、(674.85±178.01)IU/mL,各指标组间对比差异明显(P <0.05)。观察组中医症候评分中甲状腺肿、神疲乏力、畏寒肢冷、颜面肢体浮肿水平分别为(0.70±0.62)、(0.66±0.61)、(0.53±0.64)、(0.22±0.52)分,对照组中医症候评分中甲状腺肿、神疲乏力、畏寒肢冷、颜面肢体浮肿水平分别为(1.25±0.78)、(0.88±0.74)、(0.71±0.82)、(0.57±0.41)分,中医症候评分组间对比差异明显(P <0.05);随访中,观察组患者满意度96.00%,对照组患者满意度88.00%,组间对比差异明显(P <0.05)。结论 柴归汤辅助优甲乐治疗效果良好,联合用药下能进一步改善患者甲状腺激素水平,恢复甲减状态,同时还能有效降低甲状腺抗体自身免疫水平,改善机体脂类代谢功能恢复,易被患者接受,临床应用价值确切。

中医辨证方剂序贯非布司他治疗症状性高尿酸血症患者的疗效及安全性

目的分析症状性高尿酸血症病患开展中医辨证方剂以及非布司他治疗的作用。方法选择宜兴市中医医院2021年1月至2021年12月收治的80例症状性高尿酸血症病患。分组方式选择随机摸红蓝球方式,其中常规组(40例)摸蓝球,试验组(40例)摸红球,将非布司他及双氯芬酸钠应用于常规组病患中,将非布司他及中医辨证方剂应用于试验组病患中。针对每组病患各时期中医证候积分、治疗效果、炎症因子水平、血生化指标水平及不良反应进行比较。结果同组组内治疗3个月后头重身困、关节红肿热痛、口干多汗及倦怠乏力得分相较治疗前低,治疗3个月后试验组病患头重身困、关节红肿热痛、口干多汗及倦怠乏力得分相较常规组低,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组与常规组病患有效率依次是95.00%、75.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。同组组内治疗3个月后C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-6水平相较治疗前低,治疗3个月后试验组病患C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-6水平相较常规组低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组病患治疗前后丙氨酸氨基转移酶、肌钙蛋白-T及血肌酐水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。同组组内治疗3个月后血尿酸水平相较治疗前低,治疗3个月后试验组病患血尿酸水平相较常规组低,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组与常规组病患不良反应出现率依次是10.00%、7.50%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论症状性高尿酸血症病患开展中医辨证方剂及非布司他治疗,能够缓解临床症状,提高治疗效果,改善机体炎症状态,降低血尿酸水平,并且联合用药并不会显著增加不良反应,能够满足临床对用药安全性及有效性的需求。

钩端螺旋体c-di-AMP结合蛋白调控钾离子转运

目的寻找和鉴定钩端螺旋体中编码第二信使c-di-AMP结合蛋白KtrA,并探究c-di-AMP-KtrA/B系统的功能及调控机制。方法采用PCR扩增ktrA基因并克隆入pET42a质粒获得pET42aktrA原核表达载体,将其转入表达宿主菌中获得表达rKtrA的工程菌E.coli BL21DE3pET42a-ktrA。通过亲和层析法提纯上述工程菌表达的重组蛋白rKtrA后,运用BIAcore技术检测rKtrA与c-di-AMP的结合能力。采用细菌双杂交法检测钩端螺旋体Ktr系统中KtrA与KtrB的结合能力以及外源c-di-AMP对其结合的调控机制。通过在钾离子转运功能缺失大肠埃希菌LB2003株中回补相关基因,分析c-di-AMP-KtrA/B通路功能。结果成功构建钩端螺旋体ktrA基因原核表达工程菌,纯化的rKtrA可与c-di-AMP特异性结合;KtrA可与KtrB发生相互作用,该结合作用可被c-di-AMP解离;KtrA/B系统参与调控钾离子的摄取,该系统功能受c-di-AMP负调控。结论钩端螺旋体KtrA为c-di-AMP结合蛋白,c-di-AMP-KtrA/B系统参与调控钾离子的转运。

立卧位试验及卡托普利试验在原发性醛固酮增多症诊断中的应用及评估

回顾性分析128例原发性高血压患者及71例原发性醛固酮增多症患者的临床资料，通过构建受试者特征工作（ROC）曲线评估不同结果判定标准在原发性醛固酮增多症中的诊断效率。并进一步检验两种试验的相关性及诊断结果的一致性。与各自试验的其他结果判定指标相比，立位后血浆肾素活性（plasmareninactivity，PRA）及卡托普利试验后醛固酮肾素活性比值（aldosteronetoreninratio，ARR）的ROC曲线下面积均为0．983（P〈0．01）。以立位后PRA1ng·ml-1·h-1作为诊断切点的敏感性、特异性分别为0．910、0．984。选择卡托普利试验后ARR30为切点的敏感性为0．783，特异性为0．990。两种诊断指标显著相关（r=-0．847，P〈0．01），结果具有较好的一致性（Kappa值0．771，P〈0．01）。立卧位试验立位后PRA、卡托普利试验后ARR可有效用于原发性醛固酮增多症的诊断。

Dab2在不同肾上腺皮质腺瘤中的表达

目的：明确 Dab2在人正常肾上腺组织中的表达及分布,进一步探讨 Dab2在不同类型肾上腺皮质腺瘤组织中的表达情况,以及 Dab2是否可作为原发性醛固酮增多症病理诊断特异分子标记。方法采用免疫组化和实时定量 PCR 的方法检测了10例醛固酮瘤组织、8例皮质醇瘤组织、8例无功能皮质腺瘤组织和6名正常肾上腺组织中 Dab2的表达情况。结果免疫组化结果显示,Dab2在人正常肾上腺皮质球状带中显著高表达；在醛固酮瘤组织中可见散在的成簇状 Dab2中等强度表达区域,在所有的皮质醇瘤和无功能皮质腺瘤组织标本中,均显示较弱的 Dab2染色。 RT-PCR 的结果表明,与正常肾上腺组织相比, Dab2 mRNA 在醛固酮瘤中表达增高（P＜0.05）。皮质醇瘤及无功能皮质腺瘤中 Dab2 mRNA 的表达水平较正常肾上腺组织无显著性变化；与各自的瘤周肾上腺组织相比,Dab2 mRNA 在醛固酮瘤的肿瘤组织中表达也增高。结论 Dab2特异高表达于正常人肾上腺组织球状带,Dab2 mRNA 在醛固酮瘤组织中表达明显升高,Dab2蛋白在醛固酮瘤中呈现中等强度表达,Dab2能否作为原发性醛固酮增多症病理诊断的特异分子标记还有待于进一步研究明确。