增强定向造血分化信号提高人胚胎干细胞向自然杀伤细胞生成的效率

目的探讨在造血分化阶段增强定向造血(DH)信号对人胚胎干细胞(hESCs)分化形成的自然杀伤(NK)细胞(也称为hESC-NK细胞)生成效率和功能的影响。方法hESC(H1)经离心法形成拟胚体,在诱导造血分化的第0至8天,对照组加入BMP4、VEGF、bFGF、SCF等细胞因子;而增强定向造血(DH)组在对照组的基础上添加WNT激动剂(CHIR99021)和Nodal-activin抑制剂(SB431542);进而采用一致的方法分化形成NK细胞。使用流式细胞术和靶细胞K562共培养等方法分析造血分化效率、NK细胞生成效率、体外效应功能及表面受体等相关分子表达。结果相较于对照组,DH组在造血分化阶段第8天动脉生血内皮细胞(CD34^(+)DLL4^(+))数量显著增加,原始造血相关细胞(CD34^(-)CD43^(+))显著降低(P<0.05)。在NK细胞分化第28天分析发现,DH组NK细胞(CD45^(+)CD56^(+))数量显著增加,效应功能相关分子IFN-γ、Granzyme B、Perforin、CD107a虽微弱上升,但无统计学差异,激活性受体CD16a和CD69明显增加,但NKP46显著降低,抑制性受体NKG2A显著增加,CD96显著降低(P<0.05)。结论在hESC向造血分化过程中增强定向造血信号,在不影响NK细胞体外功能的情况下显著提高NK细胞生成效率和CD16a表达,为提高hESC-NK细胞或iPSC-NK细胞生成效率提供了一种新的思路。

解剖学知识在《医学遗传学》案例分析教学中的运用

遗传病案例教学是医学遗传学教学中的重要部分,但大多高校医学遗传学课程设置于临床医学专业课之前,学生缺乏疾病分析的临床思维。因此,笔者在遗传病案例分析教学中,整合解剖学知识,将复杂的遗传病特征化繁为简,依据解剖学知识对疾病特征进行归类、分析及讨论,从而提高了学生学习效率及课堂教学质量。

MTF-1对食管鳞癌EC109细胞株生长和迁移的影响

目的研究外源性金属反应转录因子-1(metal-responsive transcription factor-1,MTF-1)对食管鳞癌EC109细胞的增殖、凋亡、迁移及细胞周期的影响,并探讨其作用机制。方法构建MTF-1真核表达载体pcDNA3.1-MTF-1,转染EC109细胞,采用RT-PCR和Western blot分别检测MTF-1 mRNA和蛋白水平的表达。采用CCK-8法检测细胞生长,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期,Transwell实验检测细胞迁移能力。结果与转染pcDNA3.1的对照组相比,转染pcDNA3.1-MTF-1显著上调了EC109细胞中MTF-1表达量。过表达MTF-1 48 h后,EC109细胞生长显著加快(P<0.01);细胞凋亡率降低(P<0.05);细胞周期比例发生显著改变,G1期细胞比例降低(P<0.01),S期细胞比例升高(P<0.01);细胞迁移能力无显著改变。结论 MTF-1通过抑制细胞凋亡、促进细胞周期G1到S期的转换进而促进食管鳞癌EC109细胞的生长,但对EC109的迁移能力没有显著影响。

军队院校“医学遗传学课程思政案例库”的建设与实践

医学遗传学的教学既应当强调专业能力的提升,也应该注重个人素质的培养。同时,立足军队院校实现“立德树人、为战育人”就要加快实现专业课课程思政教育的目标。本教研组结合医学遗传学教学的实际情况,挖掘本门课程的思政元素并整理汇编课程思政案例库,采用线上线下相结合的混合式教学模式,潜移默化地将思想政治教育融入医学遗传学专业课教学。在此,本文探讨医学遗传学课程思政案例库的建设与实践。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA对食管癌细胞ncRNA/mRNA表达谱的影响

目的:分析组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA处理前后,食管癌细胞株EC109中差异表达的非编码RNA(ncRNA)和mRNA表达谱,初步预测与TSA作用相关的ncRNA和mRNA。方法:采用MTT、细胞周期等方法检测TSA的效应;运用应用芯片技术分别检测TSA处理前后EC109细胞中ncRNA和mRNA表达谱变化,并对差异ncRNA和mRNA表达谱进行整合分析。结果:TSA以剂量时间依赖方式抑制细胞增殖,细胞周期阻滞和凋亡的发生。芯片检测共发现461个ncRNA和758个mRNA显著性差异表达,生物信息学分析显示差异涉及红比霉素、阿霉素代谢过程、氧化还原、核小体的装配、染色质结构组织和端粒的结构组织等。通过数据库分析预测及整合分析,得到了361个ncRNA-mRNA靶基因对。结论:差异表达的ncRNA和mRNA对TSA的生物学效应密切关联,为进一步研究基因功能及其在肿瘤中的生物学意义奠定基础。

应用多重连接依赖探针扩增和微阵列比较基因组杂交技术检测不明原因智力障碍患儿

目的应用多重连接依赖探针扩增(MLPA)技术和微阵列比较基因组杂交(aCGH)技术检测不明原因智力障碍患儿。方法针对临床上经过常规检查、遗传代谢病氨基酸和酰基肉碱谱分析、外周血染色体核型等未见明显异常的精神发育迟缓(智力评分70分)患儿,通过MLPA技术及aCGH技术对患儿进行检测。结果经过SALSA MLPA P245 Kit染色体微缺失检测试剂盒检测,提示MECP2/Xq28复制。对患儿的基因组DNA进行aCGH检测,提示CNV重复。经过两种技术,患儿诊断为智力障碍,病因为MECP2基因复制引起。结论应用MLPA技术联合aCGH技术可诊断不明原因智力障碍患儿。

研究性实验教学在医学遗传学第二课堂中的经验与分析

医学遗传学第二课堂教学作为第一课堂教学的延伸和补充,有效解决了遗传学理论教学与临床实践脱节的问题。笔者在第二课堂教学改革中,引入研究性实验教学方法,基于临床遗传病例引导学生开展遗传病学习及科学研究。教学过程基于遗传病分析流程,从家系分析、文献及数据库运用、实验方案设计实施、结果分析与总结等逐步展开。结果证实该教学法可充分调动教学积极性,培养了学生对遗传病的综合分析能力,训练了学生的科研思维及科研能力,在医学院校中具有推广价值。

案例式PBL在医学遗传学教学中的创新与实践

自2008年起,本团队针对临床医学本科生开展了案例式PBL教学的系统性探索。问卷反馈显示,学生对课程设置以及教师的授课质量有较高满意度,在培养学习兴趣和能力提升方面有较强的获得感。历年考试成绩分析也发现,开设案例式PBL研讨课的班次特优率、优秀率与优良率均显著提高。回顾分析也发现,学生的知识层次、专业背景.班级规模、课程体系设置对教学效果有显著影响。因此,针对不同学制和专业的学生,PBL教学模式应该进行差异化设计,以达到更为理想的教学效果。