基于CRISPR/Cas9系统构建青鳉突变体

青鳉是研究基因功能、器官发生和发育机制的模式生物之一,基因编辑技术已在青鳉中得到广泛应用,但利用CRISPR/Cas9技术构建青鳉突变体的详细过程还未见报道。为了完整详细地阐明青鳉突变体的构建过程,实验以青鳉Olpax6.1基因的敲除为例,首先利用ChopChop网站设计获得Olpax6.1基因gRNA的靶点;其次通过PCR扩增和质粒酶切分别获得gRNA和Cas9 mRNA体外转录的模板,并通过体外转录合成gRNA和Cas9 mRNA;再将Cas9 mRNA和gRNA混合进行青鳉胚胎显微注射获得突变F_(0);最后利用PCR、T7EndonucleaseⅠ酶切和Sanger测序筛选F_(0)与野生型杂交的子代获得相同突变类型的F_(1),进而将相同突变的F_(1)进行杂交并筛选其子代,获得青鳉Olpax6.1敲除的纯合突变体,纯合突变体表现出眼部发育畸形的经典表型。本研究为青鳉突变体的构建提供详细完整的实验方案,同时也为其他鱼类突变体的构建提供技术参考。

多层螺旋CT在壶腹部周围癌的诊断与临床价值

壶腹部周围癌系指位于胆管口壶腹、胆总管下端、胰管开口处、十二指肠乳头及其附件十二指肠黏膜腺体等处的癌肿。因其处于各结构密切相邻的部位，各种肿瘤的临床表现有许多共同特征，治疗原则相似，故统称为壶腹部周围癌。临床上包括胰头癌、壶腹癌、胆总管下端癌。壶腹癌病理上又分为十二指肠乳头型和壶腹内型。本研究采用16排螺旋CT对35例临床怀疑壶腹周围占位患者行三期动态增强扫描，并对病例源图像进行后处理，常用多平面重建（MPR）、曲面重建（CPR）及最小密度投影（minMIP）。

MSCT扫描对肺孤立性结节的诊断价值

肺孤立性结节（SPN）是指肺内单个、圆形或卵圆形、直径〈3cm的实质性病灶。产生肺孤立性结节的原因很多,最常见的是小肺癌,其次是结核瘤,还有炎性假瘤、错构瘤等。肺孤立性病灶的早期定性诊断对患者意义重大,多层螺旋CT（MSCT）扫描在孤立性结节定性方面具有重要价值。

股骨头缺血性坏死的影像学诊断比较

目的:比较X线、CT及MRI对股骨头缺血性坏死(ANFH)的诊断价值。方法:对28例怀疑为ANFH患者进行了X线检查,并对其中13例进行了CT检查,8例进行了MRI检查,并且作了X线、CT、MRI表现的对比分析。结果:23例中经X线平片诊断为ANFH的18例;其余5例,有3例经CT诊断提示为ANFH经MRI证实;2例经MRI诊断为ANFH。结论:MRI是诊断ANFH最敏感的方法。不仅能够发现早期病变,而且能够观察病变确切范围和程度,CT可以早期发现病变,能反映病变的范围和程度,X线是诊断和分期的常规手段。

眼眶内侧壁—筛骨纸板骨折的CT诊断

目的探讨眼眶内侧壁—筛骨纸板骨折的CT诊断价值。方法回顾分析32例眼眶内侧壁骨折患者CT资料,所有病例均行常规眼眶轴位,12例行冠状位扫描。结果CT显示骨折线12例,筛骨纸板断裂、内陷20例,同时合并有内直肌肿胀,眶内积气,筛窦积液、积血等间接征象。结论CT,特别是高分辨率CT(HRCT)是诊断眼眶内侧壁—筛骨纸板骨折的较好方法。

迟发性维生素K缺乏症致颅内并发症的CT表现

迟发性维生素K缺乏所致颅内出血,发病率较低,但其危害性严重.近年来,随着CT的普及,诊断经验的积累,为本病的正确诊断提供了依据.笔者收集了1994～2003年我院收治的36例临床确诊病例,对其CT表现并结合临床分析报告如下:

新型复方磺胺氯达嗪钠奥美普林可溶性粉对仔猪白痢的治疗试验

为评价新型复方磺胺氯达嗪钠奥美普林可溶性粉对仔猪白痢的治疗效果,本试验将64头患白痢的仔猪分成2组,每组32头,对照组采用复方磺胺氯达嗪钠甲氧苄啶可溶性粉治疗,试验组采用复方磺胺氯达嗪钠奥美普林可溶性粉治疗,两组均饮水给药,剂量为1 g/L,连续使用5 d。结果显示,对照组的治愈率为84.4%,试验组的治愈率为93.8%。

空气灌肠诊治小儿肠套迭的体会

肠套迭是小儿常见的急腹症,在适应症内利用空气灌肠整复率较高,从而避免开刀之苦,我院从1983年—1998年间利用简易的普通医用血压计对小儿肠套迭整复,取得了成功,积累了经验,本文选择资料比较完整及诊断明确的126例病例进行分析研究,以提高整治过程中的认识。1.资料和方法1.1 一般资料 本组126例中,男性79例,女性47例,年龄2月—10月72例(男44例、女38例)10月—25月26例(男16例、女10例)2岁以上28例。1·2 整复前准备:

生产高效优质回火轮胎钢丝的设备及工艺技术研究

介绍了天津市第一金属制品厂新增的7000t回火轮胎钢丝生产线。该生产线采用国内一流的设备和最佳的工艺参数,其产品的实物指标全部达到了国家标准,接近国际先进国家标准要求。

猪肉中氟苯尼考残留量高效液相色谱-串联质谱检测方法的建立

本研究通过高效液相色谱-串联质谱法(High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry,HPLC-MS/MS)建立了猪肉中氟苯尼考残留物残留量的检测方法,检测限和定量限分别为5μg/kg和10μg/kg。在10μg/kg~4000μg/kg浓度范围内,空白猪肉样品的标准曲线线性关系良好,相关系数均在0.99以上。氟苯尼考和氟苯尼考胺的添加浓度在10μg/kg、500μg/kg和2000μg/kg时,回收率均大于85%,批间和批内变异系数均小于5%。该方法适用于猪可食性组织中氟苯尼考残留量的测定。

低温下不同种类消毒剂消毒效力研究

为研究低温对过硫酸氢钾复合物粉、二氯异氰脲酸钠粉、聚维酮碘溶液消毒效力的影响,本研究在25℃与-20℃环境温度下进行了定量杀菌试验。试验结果显示,相较于25℃环境温度,过硫酸氢钾复合物粉、二氯异氰脲酸钠粉、聚维酮碘溶液在-20℃环境温度下的消毒效力分别下降8%、15%、20%,表明过硫酸氢钾复合物粉在低温下消毒效力维持好。

纵隔型肺癌的X线诊断

纵隔型肺癌一般认为是中央型肺癌的一种特殊表现,好发于右肺上叶,癌肿阻塞较大支气管使上肺叶完全不张而紧贴于纵隔上,并包裹住肺门肿块或纵隔的肿大淋巴结,形成类似纵隔肿块,为提高对本症的认识,防止误诊,笔者总结了20例病例,并参考有关文献分析如下1.临床资料 男15例,女5例,年龄30—75岁,平均年龄58岁,病灶均为单侧性上叶,其中右上16例,左上4例,患者多有咳嗽,咳痰伴胸痛,其中痰中带血者4例,3例误诊为纵隔肿瘤。

小儿肠套叠的诊治

目的探讨小儿肠套叠的诊治方法及要点。方法回顾性分析20例小儿肠套叠,利用灌肠整复仪注入气、钡,对其进行脱套诊治的过程。结果20例患儿,成功复位17例,2例梗阻时间长,有肠梗阻表现,1例复杂型肠套叠,均未能复位成功。结论气钡灌肠诊治小儿肠套叠是一种简便、无创伤、效果明显的诊治方法。

不同生产工艺生产的复方磺胺间甲氧嘧啶钠粉在猪上的药代动力学研究

为研究不同生产工艺对复方磺胺间甲氧嘧啶钠粉药代动力学的改善作用,本试验对利用超微粉碎技术和固体分散技术两种生产工艺生产的复方磺胺间甲氧嘧啶钠粉在猪上的药代动力学进行了比较研究。将12头体重较一致的健康猪随机分成2组,其中一组试验猪口服50 mg/kg用超微粉碎技术生产的复方磺胺间甲氧嘧啶钠粉,另一组试验猪口服50 mg/kg用固体分散技术生产的复方磺胺间甲氧嘧啶钠粉。给药后按预定时间采集血样,分析血浆中磺胺间甲氧嘧啶钠和甲氧苄啶的含量。实测血药浓度-时间数据采用Das 3.0药代动力学分析软件计算药代动力学参数。研究表明,与用超微粉碎技术生产的复方磺胺间甲氧嘧啶钠粉相比,用固体分散技术生产的复方磺胺间甲氧嘧啶钠粉中磺胺间甲氧嘧啶钠相对生物利用率达450%。

新型复方磺胺氯达嗪钠奥美普林可溶性粉对猪的安全性试验

为评价新型复方磺胺氯达嗪钠奥美普林可溶性粉临床使用的安全性,特以商品仔猪为试验对象进行了安全性试验。试验时将32头35日龄仔猪随机分成4组,每组8头,1组为对照组,使用不含任何药物添加剂的基础日粮,其余3组为推荐剂量组,分别供给添加1.0 g/kg、3.0 g/kg、5.0g/kg新型复方磺胺氯达嗪钠奥美普林可溶性粉的基础日粮,连续使用5d,检测或观察各组试验猪的平均增重、血常规指数、血液生化指标及组织病理学变化。结果表明,新型复方磺胺氯达嗪钠奥美普林可溶性粉以5倍推荐剂量给药,连用5 d,对猪是安全的。

IVP时泛影葡胺副作用的预防

IVP时碘过敏现象时有发生,由于多使用离子造影剂,且给药速度快,剂量大,浓度高等特点,其过敏反应及毒副症状也随之增加。我们于1992年7月至1995年7月使用皮质激素——地塞米松或联合使用H_1、H_2受体阻滞剂——扑尔敏和雷尼替丁,对副作用的预防取得了明显的疗效。1.临床资料 本组308例中,我们将其分为三组,Ⅰ组单纯使用60％复方泛影葡胺143例,男性82例,女性61例,年龄9—72岁,平均46.3岁。