脑创伤后神经元细胞内游离钙的变化及其影响因素(英文)

目的:研究液压冲击伤时体外培养的单个大鼠神经细胞内游离钙(犤Ca2+犦i)的变化,探讨尼莫地平D-2氨基戊酸(D-2-amino-5-phosphono-valericacid,D-AP-5)和亚低温对创伤后细胞内犤Ca2+犦i的影响及其机制。方法:以Fluo-3/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂,用激光共聚焦显微镜测定液压冲击伤时体外培养的单个大鼠神经细胞内游离钙(犤Ca2+犦i)的变化。结果:液压冲击伤后脑皮质细胞内游离Ca2+迅速升高,24h达高峰,随后逐渐下降,48h仍维持较高水平犤(411.29±52.46),(396.53±51.32)nmol/L犦,尼莫地平,D-AP-5于各时相关均降低细胞内犤Ca2+犦i,其中Nimodipine10h内应用最佳犤6h:(98.65±15.65)nmol/L犦,D-AP-5于1～10h应用较好而亚低温30min内显著降低细胞内犤Ca2+犦i(t=13.74,P<0.001),最佳时机在伤后15min内,伤后1h以上无效。结论:创伤后神经元细胞内钙超载,尼莫地平、D-AP-5和亚低温均降低细胞内犤Ca2+犦i,但各自最佳时间窗不同,揭示对创伤后神经细胞Ca2+超载应注意综合治疗,并选定各自作用最佳时间窗。

人胚中脑神经干细胞的分离、增殖及分化的研究

目的 探讨人胚中脑腹侧神经干细胞的分离、增殖条件及分化方向。方法 应用表皮生长因子（EGF）和成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）使人胚中脑腹侧幼稚细胞维持在未分化状态并促进其增殖;通过克隆分析、细胞增殖曲线及流式细胞仪检测培养细胞的增殖能力;应用免疫组织化学方法鉴定这些细胞的分化方向。结果 该细胞群具有一定的增殖能力,在撤除生长因子后至少能分化为神经元和星形胶质细胞,但未检测到多巴胺能神经元。结论 从人胚中脑腹侧分离出的幼稚细胞具有一定的增殖和自我更新能力,有多向分化潜能,具备中枢神经系统干细胞的一般特征。

高血压脑出血及脑梗塞危险因素Logistic回归分析

本文对１８２例脑出血和脑梗塞病人的４４种危险因素进行非配对的病例－对照研究。经Ｌｏｇｒｅｓｓ模型和卡方分析进行多因素及单因素分析，发现脑出血与脑梗塞的危险因素不同，且它们的危险因素作用大小、主次与文献也不同，肯定起作用的因素不同。在脑梗塞组为高血压史和一过性缺血性发作（ＴＩＡ）史，在脑出血组则为高血压病史，情绪的改变、饮酒史和食用蔬菜减少。可能起作用的因素也不同，梗塞组为民族、糖尿病史、情绪改变、饮食结构。怀疑因素在梗塞组则为心脏病史、吸烟种类、饮酒史及酒量、ＣＶＡ家族史、平均收缩压。在脑出血组则为工作年限、家庭收入、高血压年限。饮酒及年限、食品结构、ＣＶＡ家族史、平均收缩压。本文对上述因素的作用大小进行了定量分析。

亚低温对体外液压冲击伤后神经细胞内游离钙及微管相关蛋白-2的影响

目的 研究体外液压冲击伤后大鼠神经细胞内游离钙([Ca^(2+)]i)及微管相关蛋白-2(micro-tubule-associated protein-2,MAP-2)水平的变化,并探讨亚低温对颅脑创伤后神经细胞内[Ca^(2+)]i与MAP-2的影响及机制。方法 经体外原代培养的神经细胞制备液压冲击伤模型,随机分为正常对照组、创伤组(7个亚组)和亚低温治疗组(4个亚组)。亚低温治疗组于伤后30min、1h、10h和22h进行亚低温(32±0.5)℃治疗2h,随后利用激光共聚焦显微镜测定体外液压冲击伤后神经细胞内[Ca^(2+)]i及MAP-2水平的变化。结果 于伤后3Omin内应用亚低温治疗可降低神经细胞内[Ca^(2+)]i水平(P<0.01),而于伤后1h以上应用则无效;于伤后1h内进行用亚低温治疗可明显减少MAP-2的丢失(P<0.01),而伤后10h以上应用则无效。结论 亚低温可降低颅脑创伤后神经细胞内[Ca^(2+)]i水平及减少MAP-2丢失,但应用的有效时间窗不同,提示颅脑创伤后神经细胞内[Ca^(2+)]i升高并不是MAP-2丢失的唯一原因。

大鼠脑缺血再灌注后缺血侧半球皮质与缺血核心区皮质TNF-α含量的对比研究

目的 观察大鼠脑缺血再灌注后缺血侧半球皮质和缺血核心区皮质内肿瘤坏死因子 (TNF -α)含量的变化。方法 将大鼠随机分为缺血侧半球组和缺血核心区组 ,右侧大脑中动脉闭塞 2h ,于再灌注后 0、6、16、2 4和 4 8h处死大鼠 ,用ELISA法分别测定缺血侧半球皮质和缺血核心区皮质内TNF -α含量。结果 缺血侧半球皮质内TNF -α含量于脑缺血再灌注后 6h明显升高 ,16h达高峰 ,2 4h恢复到正常水平 ,4 8h再次明显升高。缺血核心区皮质内TNF -α含量于脑缺血再灌注后无明显变化。结论 TNF -α参与了脑缺血再灌注后缺血核心区以外皮质内的损伤反应过程 ,而与缺血核心区皮质内的损伤反应可能无关。

亚低温对脑缺血再灌注后MCP-1 mRNA表达的影响

目的 观察亚低温对大鼠脑缺血再灌注后缺血核心区皮质内单核细胞趋化蛋白 (MCP) - 1mRNA表达的影响。方法 6 0只雄性Wistar大鼠随机分为常温组 ( 37℃ )和亚低温组 ( 32～ 33℃ ) ,半定量的逆转录PCR(RT -PCR)法测定MCP- 1mRNA的表达 ,2 ,3,5三苯基四氮唑 (TTC)染色法观察脑皮质梗死灶的变化并对大鼠进行神经病学评分。结果 缺血核心区皮质内MCP - 1mRNA表达于缺血 2h明显升高 ,再灌注后 16h达高峰 (均值是缺血 2h组的 2 .2倍 ,与缺血 2h组相比差异显著 ,P <0 .0 1) ,此后仍维持较高水平的表达直至再灌注后 4 8h(与假手术组相比 ,P <0 .0 5 )。亚低温能明显抑制再灌注后6h和 16hMCP - 1mRNA表达 ( P<0 .0 5 ) ,但对再灌注后 2 4h和 4 8hMCP - 1mRNA表达无影响 ( P >0 .0 5 )。亚低温组的脑梗死灶面积和神经病学评分较相应时间点的常温组明显减小。结论 抑制MCP - 1mRNA的表达可能是亚低温减轻脑缺血再灌注损伤 。

大鼠垂体的形态学研究及其细胞分布特点

目的 研究大鼠垂体大体、光镜、超微结构下的特点 ,为神经内分泌学研究奠定基础。方法 使用灌注固定、光镜切片计数分析、选择性取材切片的透射电子显微镜技术。结果 大鼠垂体的位置及大体形态与人类迥异 ;光镜计数嗜酸、嗜碱、嫌色细胞各部位的比例不同 ;超微结构表明腺垂体靠近硬膜侧以促甲状腺激素细胞、促肾上腺素细胞多见 ,围绕神经垂体两侧以生长激素细胞为主 ,中间主要是促泌乳素细胞、促生长激素细胞 ,腺垂体的血液供应外侧明显少于内侧。结论 大鼠垂体具有鲜明的自身特点 ,对其形态学的细致研究将与之相关的科研工作打下坚实的基础。

三维重建单(双)靶点定向置管引流术治疗高血压壳核出血

目的回顾性分析三维重建单(双)靶点定向置管引流术治疗高血压壳核出血的疗效,验证该方法的有效性和可行性.方法将133例壳核脑出血病人的CT定位扫描资料输入计算机工作站,对血肿进行三维重建,根据血肿量的大小和形状设计1～2个靶点和引流管路径.应用立体定向技术将引流管(外径5mm,内径3mm)送至颅内预定靶点,术中应用10ml注射器轻柔抽吸血肿液化部分,术后将尿激酶(1～2万IU)注入血肿腔内,夹闭引流管2 h后自然引流,每12 h重复1次.复查CT证实剩余血肿量为最初的10%～15%时拔除引流管.结果平均置管1.5 d(1～3 d),平均血肿排空率92.8%.术后1个月病死率6.0%,远期随访(平均22个月)病死率11.3%,优良率74.4%.结论该方法治疗高血压壳核脑出血,血肿排空较彻底,疗效可靠,尤其适用于血肿量较大(＞25ml)且形态不规则的颅内血肿.

TNFα的中枢神经系统来源

ＴＮＦα是一个重要的细胞因子，有着广泛的生物学作用，主要来源于单核／巨噬细胞和Ｔ 细胞。ＣＮＳ一直被认为是免疫豁免部位，这是部分因为血脑屏障的存在限制了免疫能细胞、细胞因子和免疫球蛋白的通过，部分因为ＣＮＳ的细胞缺乏免疫活性。目前后者受到越来越多的研究结果的冲击。ＴＮＦα不但可以在周围循环中产生，而且可以在ＣＮＳ内由小胶质细胞、星形细胞、神经细胞和血管内皮细胞产生。

大鼠神经元液压伤后依钙蛋白酶的时程变化及亚低温的影响

目的研究常温时液压冲击伤后神经元内依钙蛋白酶(Calpain)活性变化及亚低温的干预机制。方法培养大鼠神经元并制作液压冲击伤模型,在不同时间点进行亚低温干预,以紫外分光光度法检测液压冲击伤后的神经元内Calpain活性变化及在不同时段亚低温对Calpain活性的干预效应。结果常温时,在细胞损伤后Calpain的活性发生显著变化。亚低温组与常温组Calpain的活性不同,且亚低温对伤后Calpain活性的干预效应与作用起始时间密切相关。结论液压冲击伤后神经元内Calpain活性发生的改变参与细胞创伤的病理过程,亚低温可能通过这一机制具有一定保护创伤性脑损伤的作用。亚低温干预的效果与开始干预时间相关。

脑缺血/再灌注后缺血核心区皮质内MCP-1 mRNA和蛋白质表达

目的 观察大鼠脑缺血 /再灌注后缺血核心区皮质内单核细胞趋化蛋白 (MCP) - 1mRNA和蛋白质表达情况。方法 用半定量的逆转录PCR(RT -PCR)法测定缺血 2h再灌注不同时间缺血核心区脑皮质内MCP - 1mRNA的表达 ,ELISA法测定MCP - 1含量的变化。结果 缺血核心区脑皮质内MCP - 1的mRNA表达于缺血 2h明显升高 ,再灌注后 16h达高峰(均值是缺血 2h组的 2 2倍 ,与缺血 2h组相比差异显著 ,P <0 0 1) ,此后仍维持较高水平的表达直至再灌注后 4 8h(与假手术组相比 ,P <0 0 5 ) ;MCP - 1含量于再灌注后 6h开始升高 (均值 2 2 5ng/g组织 ,是假手术组的 17 0倍 ,P <0 0 5 ) ,此后逐渐升高 ,4 8h达到高峰 (均值 110 9ng/g组织 ,是假手术组的 83 7倍 ,P <0 0 1)。结论 脑缺血 /再灌注后缺血核心区皮质内MCP - 1的mRNA和蛋白质表达均明显增加 ,提示MCP - 1在脑缺血

D-2-氨基戊酸对创伤性神经元细胞内游离钙及游离氢的影响

研究液压冲击伤时体外培养的大鼠神经元细胞内游离钙 ( [Ca2 +] i)及游离氢 ( [H+] i)的变化 ,探讨D -2 -氨基戊酸 (D -AP -5)对创伤后神经元细胞内 [Ca2 +] i 及 [H+] i 的影响及其机制。方法 以Fluo -3/AM和BCECF/AM分别为细胞内钙离子和氢离子的荧光指示剂 ,用激光共聚焦显微镜测定液压冲击伤时体外培养的神经元细胞内 [Ca2 +] i 及 [H+] i的变化。结果 液压冲击伤后神经细胞内游离钙和游离氢迅速升高 ,伤后仅 15分钟 ,[Ca2 +] i 即达 32 4 197± 38 60 6nmol(P <0 0 1) ,[H+] i pH值达 7 0 4± 0 0 33(P <0 0 1) ,[Ca2 +] i 于伤后 2 4小时达高峰 ( 2 664 17± 155 0 9nmol) ,[H+] i 于伤后 12h达高峰 (pH值 6 0 16± 0 196) ,随后逐渐下降 ,4 8h仍维持较高水平 (P <0 0 1)。D -AP -5可明显降低创伤后神经元细胞内[Ca2 +] i 及 [H+] i 升高。伤后 2 2h以内给药明显降低创伤后细胞内游离钙的升高 (P <0 0 1) ,而伤后 10h之内应用可明显降低创伤后细胞内游离氢的升高 (P <0 0 1) ,伤后 2 2小时以上应用则无效 (P >0 0 5)。结论 创伤后神经元细胞出现钙超载和酸中毒。D -AP -5可降低创伤后神经元细胞内 [Ca2 +] i 及 [H+] i 升高 ,但D -AP -5应用的有效时间窗不同。

术前诊断垂体腺瘤经蝶手术的几点教训(附7例报告)

目的吸取经蝶窦手术切除垂体腺瘤并发症的经验教训。方法报告7例术前诊断垂体腺瘤经蝶手术的严重并发症。结果3例术后并发严重蛛网膜下腔出血,第三脑室、侧脑室出血;3例并发术后癫痫持续状态;1例并发化脓性脑膜炎。死亡4例。结论颅内出血是极高的并发症。应从解剖定位、手术操作等诸多问题引起重视、吸取教训。

亚低温对大鼠脑缺血再灌注后缺血核心区皮质内MCP-1和TNF-α含量的影响

目的 观察缺血过程中亚低温对大鼠脑缺血再灌注后缺血核心区皮质内单核细胞趋化蛋白 (MCP) - 1和肿瘤坏死因子 (TNF) -α含量的影响。方法 80只雄性Wistar大鼠随机分为常温组 (37～ 37 5℃ )和亚低温组 (32～ 33℃ ) ,用ELISA法测定缺血 2h再灌注不同时间缺血核心区脑皮质内MCP - 1和TNF -α含量的变化 ,用 2、3、5三苯基四氮唑 (TTC)染色观察脑皮质梗死灶的变化。结果 缺血核心区脑皮质内MCP - 1含量于再灌注后 6h开始升高 ,至 4 8h逐渐达到高峰 ;再灌注后各时间点缺血核心区脑皮质内TNF -α含量无明显变化。亚低温能明显降低再灌注后 6及 4 8h缺血核心区脑皮质内MCP - 1的含量 ,并能减小脑皮质梗死灶的面积 ,但对缺血核心区脑皮质内TNF -α的含量没有影响。结论 降低缺血再灌注后脑皮质内MCP - 1的含量 。

血管内治疗复杂性、难治性颈内动脉海绵窦瘘（附16例报告）

１６例外伤性颈内动脉海绵窦瘘（ＣＣＦ）中有１４例属于难治性复杂性ＣＣＦ，其中１０例采用可脱性球囊栓塞治疗，５例用自制钨丝微弹簧圈栓塞治疗，１例采用上述两法治疗，１４例保留病侧颈内动脉。所有病例均完全被栓塞而治愈。自制钨丝微弹簧圈是一种新型的血管内栓塞材料，有明显促进血栓形成作用，其效果明显优于可脱性球囊。

创伤后神经元细胞内游离钙的变化及其影响因素的研究

目的 研究液压冲击伤时体外培养的单个大鼠神经细胞内游离钙 ([Ca2 + ]i)的变化 ,探讨尼莫地平 (Nimo dipine)、D 2氨基戊酸 (D AP 5 )和亚低温对创伤后细胞内 [Ca2 + ]i 的影响及其机制。方法 以Fluo 3 AM为细胞内钙离子的荧光指示剂 ,用激光共聚焦显微镜测定液压冲击伤时体外培养的单个大鼠神经细胞内 [Ca2 + ]i 的变化。结果 液压冲击伤后脑皮质细胞内 [Ca2 + ]i 迅速升高 ,2 4h达高峰 ,随后逐渐下降 ,4 8h仍维持较高水平。Nimodip ine、D AP 5于各时相均降低细胞内 [Ca2 + ]i,其中Nimodipine 10h内应用最佳 ,D AP 5于 1～ 10h之间应用较好 ,而亚低温 30min内显著降低细胞内 [Ca2 + ]i(P <0 .0 0 1) ,最佳时机在伤后 15min内 ,伤后 1h以上无效。创伤后神经元细胞内钙超载 ,Nimodipine、D AP 5和亚低温均降低细胞内 [Ca2 + ]i,但各自应用的最佳时间窗不同。结论 对创伤后神经细胞Ca2 + 超载应注意综合治疗 ,并选定各自作用最佳时间窗。

基因治疗的安全性评价

基因治疗的安全性日益引起重视。基因作为一种全新的药物 ,其安全性的评价具有特异性。

局部脑动脉内灌注罂粟碱治疗症状性脑血管痉挛

症状性脑血管痉挛(symptornic cerebral vascular spasm，SCVS)是蛛网膜下腔出血(SAH)后常见的并发症，是本病致死、致残的主要原因之一。其治疗是临床的一大难题。传统方法包括升压、扩容、稀释及应用钙离子拮抗剂等疗法，虽取得一定疗效。