入口电离-高分辨质谱法分析人参皂苷同分异构体

本文建立了入口电离-高分辨质谱法快速区分人参皂苷同分异构体,通过正、负离子模式及最佳入口温度,对人参皂苷同分异构体进行敞开式质谱分析。结果表明,在正、负离子全扫描模式及最佳实验温度下,根据人参皂苷同分异构体所形成的聚体数目不同,形成的离子峰类型不同,可实现人参皂苷同分异构体的区分。该方法简单、快速,仅需简单的样品前处理,即可区分人参皂苷同分异构体。

液质联用结合网络药理学探究少腹逐瘀汤抗宫颈癌活性机理

采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)技术,结合网络药理学和分子对接,对少腹逐瘀汤发挥抗宫颈癌作用的重要成分、靶点和通路进行预测分析,并通过细胞实验初步探究其作用机制。经鉴定发现苯丙素类、黄酮类、萜类、生物碱类、有机酸类、挥发油类、苯酞类、香豆素类、苯醛类、氨基酸类、酚类和其他类等共89种化合物,网络药理学和分子对接深入挖掘得到少腹逐瘀汤抗宫颈癌的7个重要成分、8个核心靶点和10条宫颈癌相关信号通路。细胞实验表明,给药组HeLa细胞与空白对照组相比,生存率逐渐降低,细胞凋亡率逐步提高,呈浓度依赖性(P<0.05)。少腹逐瘀汤可以提高Bax、Cyto c、Caspase 9和Caspase 3表达水平,降低PI3K、AKT和Bcl-2表达水平。少腹逐瘀汤可能通过槲皮素、芍药苷、黄芩素、山奈酚、沙立朴吩、丁香酚和鞣花酸等成分作用于TP53、AKT1和EGFR等靶点发挥抗宫颈癌作用,其机制与PI3K/AKT和Bcl-2家族蛋白信号通路的调控密切相关,充分体现了多成分、多靶点和多通路的特点。

基于UPLC-Q TOF-MSE技术的藤黄健骨丸指纹图谱建立及共有峰鉴定

建立藤黄健骨丸高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,完善产品质量标准。采用Waters Symmetry C18(150 mm×2.1 mm,3.5μm)色谱柱;流速为0.4 mL/min;进样量为2μL;紫外检测波长为260 nm;在柱温30℃下以0.1%甲酸水(A)和0.1%甲酸乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱。利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版本)”建立藤黄健骨丸指纹图谱,并分析相似度。采用液质联用技术(UPLC-Q TOF-MSE),根据化合物串联质谱信息结合对照品进行了共有峰结构鉴定。共确定了10批藤黄健骨丸指纹图谱中20个共有峰,相似度均在0.95以上。基于对照品和串联质谱信息指认了共有峰中13种成分的结构,并进行了峰归属。对10批藤黄健骨丸指纹图谱共有峰的相对保留时间和相对峰面积进行了计算,结果显示各批次样品共有峰的相对保留时间和相对峰面积均比较稳定,表明它们所对应的各成分含量较为均一。采用该指纹图谱对中间体进行了相似度评价,发现中间体与成品相关性良好。该方法精密度、重复性和稳定性好,不仅可用于藤黄健骨丸成品的质量控制,还可对中间体进行检测,用于生产过程的控制。

肠道菌群及其代谢产物与神经退行性疾病关系研究进展

神经退行性疾病是一种发生于中枢神经系统,具有高度致残、致死性的疾病,主要发病人群为中老年群体,目前该类疾病的发病机制尚不清楚,没有有效的治疗策略。随着我国老龄化程度的加深,神经退行性疾病对居民身体健康造成严重威胁。肠道菌群作为寄生在胃肠道中的微生物,与人体呈互利共生的关系,对生命健康起到至关重要的作用,神经退行性疾病的发展伴随着肠道菌群及其相关代谢产物的改变。文章综述了肠道菌群及其代谢产物与神经退行性疾病相互影响的机制,并探讨通过肠道菌群治疗神经退行性疾病的潜在价值,以期为神经退行性疾病的治疗提供新的研究方向。

马齿苋在化妆品中的应用及功效研究进展

马齿苋属药食同源中药材,有着极高的药用价值和食用价值。近年来,马齿苋在日用化工领域,尤其是在化妆品领域应用甚广。许多化妆品公司开发的面膜、精华、护肤水和洁面乳等美容产品均添加了其活性成分,但相关的化妆品主要添加了马齿苋醇提物,而添加其水提物成分如多糖、多酚的美容产品较少。新剂型的出现丰富了马齿苋在化妆品经皮递送系统方面的研究,未来可以开发如脂质体、传递体和β-环糊精等新型载体。此文简要地对马齿苋的活性成分、在化妆品中的功效例如美白、抗氧化和抗光老化等以及其在化妆品领域的应用情况进行总结,并对马齿苋在化妆品原料的开发应用上提出建议并进行展望。

液质联用技术分析西洋参花化学成分及H9c2心肌细胞损伤保护作用

高温高压转化前后西洋参花醇提液经正己烷、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇分级萃取后共得10种不同极性组分,通过H9c2心肌细胞损伤模型筛选最佳活性组分,并对其进行抗氧化活性的测定以及化学组成分析,利用液质联用技术检测其处理前后的化学成分。结果表明,提取的10种活性组分中,高温高压转化后西洋参花乙酸乙酯萃取层(PEE)能够有效保护H9c2心肌细胞损伤,显著提高细胞存活率并降低细胞ROS水平,与高温高压转化处理前西洋参花乙酸乙酯层(OEE)相较,二者总体皂苷含量相近且均具有较强的抗氧化活性。通过液质分析,初步确定了PEE中所含高温高压转化裂解生成的Rk1与Rg5更具良好的心肌细胞损伤保护作用。

高分离度快速液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法分析酒制和醋制人参的皂苷类成分

利用高分离度快速液相色谱与四极杆-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)联用技术,对酒制人参和醋制人参的人参皂苷类成分进行比较研究。样品经不同方法炮制,离心过滤后,采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱,以0.1%甲酸和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,采用高分辨质谱进行检测,利用Masshunter Qualitative Analysis软件与人工相结合进行分析。鉴定了46种人参皂苷,比较了酒制人参和醋制人参中人参皂苷含量差异,并检测到稀有人参皂苷。同时总结了炮制品中人参皂苷的转化途径。对人参置于酒或醋中有效成分的浸出量进行比较。本方法对于人参炮制品的成分研究具有借鉴意义,并且对民间使用的人参泡酒进行了科学解释,为人参炮制品在临床合理使用提供指导。

RRLC-Q-TOF MS/MS法分析生晒参和大力参中的皂苷类成分

利用高分离度快速液相色谱与四极杆-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS/MS)联用,对生晒参和大力参中的人参皂苷类成分进行比较研究。基于人参皂苷Rd和Re、Rf和Rg1两组同分异构体在串联质谱中的裂解规律,以及mRd的串联质谱特征,通过标准品保留时间和精确分子质量鉴定了人参中的35种人参皂苷,进而比较了生晒参和大力参中人参皂苷的相对百分含量差异,并于大力参中检测到稀有人参皂苷,如人参皂苷Rg5、Rk1、F4、Rg6等。该方法对于大力参类传统中药炮制品的成分研究具有借鉴意义,研究结果能说明大力参区别于生晒参的物质基础,可以为大力参在临床上合理、有效地使用提供指导。

葛花中异黄酮类化学成分的RRLC-Q-TOF MS/MS研究

采用快速分离液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用(RRLC-Q-TOF MS/MS)技术对葛花中的异黄酮类成分进行了研究,得到了相应化合物的保留时间、分子量及结构信息.研究结果表明,葛花水提取液的主要成分为异黄酮类及其苷类化合物,并含有皂苷类和酚类化合物.在葛花中首次发现同属植物狐尾葛特有化合物Alopecuroides A和葛根中的化合物3'-甲氧基大豆苷元-7-O-甲醚.讨论了异黄酮类化合物的质谱碎裂途径及规律.

动脉粥样硬化患者尿液的代谢组学研究

利用基于液相色谱-质谱联用的方法对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)患者和正常对照(Control)人群的尿液进行分析,寻找动脉粥样硬化患者尿液中的差异代谢物,为其发病机制及早期筛查提供科学依据。使用Va Sera VS-1000无创动脉血管弹性测定仪筛选15名动脉粥样硬化患者(46.84±2.41)及15名健康者(45.72±1.93),采用高分离度快速液相色谱与四极杆-飞行时间串联质谱(RRLC-QTOF/MS)技术对其尿液代谢物进行分析,采用主成分分析(Principal component analysis,PCA)对两组代谢物进行分类,并寻找潜在生物标记物。RRLC-QTOF/MS检测结果表明,动脉粥样硬化组和对照组尿液代谢物谱能得到很好的区分,发现并鉴定了2种生物标记物尿酸及胍基乙酸,从而提示嘌呤代谢、氨基酸代谢及氧化应激可能在动脉粥样硬化发生发展中有重要作用。

小儿肺炎患者尿液的代谢组学初步研究

利用液相色谱-质谱联用法对小儿肺炎(Childhood pneumonia,CP)患者和健康儿童(Healthy control)的尿液进行分析,发现小儿肺炎患者尿液中的潜在标记物,为其发病机制及早期筛查提供科学依据。筛选10例小儿肺炎患者(age 47.72±2.35 months)及10例健康儿童(age 46.65±1.97 months)尿液样本,采用快速高分辨液相色谱四极杆-飞行时间质谱联用(RRLC-Q TOF/MS)技术对其尿液代谢物进行分析,通过主成分分析方法(PCA)对两组代谢物进行分类,并发现潜在生物标记物。RRLC-Q TOF/MS检测表明,CP组和Healthy Control组尿液代谢物图谱能得到很好的区分,并鉴定了5种生物标记物,提示嘌呤代谢、氨基酸代谢可能在小儿肺炎发生发展中有重要作用。

人参三七配伍对脑缺血再灌注损伤小鼠血脑屏障通透性及脑组织炎症反应的影响

目的观察人参和三七配伍提取物对脑缺血再灌注损伤(CIRI)小鼠血脑屏障(BBB)通透性及脑组织炎症反应的影响。方法通过结扎小鼠双侧颈总动脉制备CIRI模型。用红四氮唑(TTC)染色测定CIRI小鼠脑梗死比和脑组织含水量,通过测定渗出脑血管外的伊文思蓝含量,分析人参三七配伍对CIRI小鼠BBB通透性的影响;光学显微镜下观察CIRI小鼠脑组织病理形态,采用酶联免疫法(ELISA)检测小鼠脑组织中白细胞介素(IL)-1β、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平。结果人参和三七配伍的提取物可明显减少CIRI小鼠脑梗死比及脑组织含水量、降低小鼠脑组织中伊文思蓝含量、改善BBB通透性和脑组织病理状态、降低脑组织IL-1β和TNF-α的表达水平、增加脑组织IL-10的表达水平。结论人参和三七配伍提取物对CIRI小鼠具有显著保护作用,其机制与降低CIRI小鼠BBB通透性及脑组织炎症反应有关。

超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱法分析不同炮制红参的化学成分差异

采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱法(UPLC-Q-Orbitrap MS)对蒸制红参、醋制红参和烘干红参中的人参皂苷类成分进行分析研究。基于三醇型皂苷Re、Rg1、Rg2、Rh1标准品和二醇型皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Rg3、Rh2标准品的加热降解规律和质谱特征,鉴定出不同人参炮制品中的32个人参皂苷。其中,人参皂苷mRb1、Rh1、F1、20(R)-Rh1、Rg5和Rs5仅在醋制红参中检出,notoR1仅在蒸制红参中检出。该方法明确了3种人参炮制品的化学成分差异,可为指导人参不同炮制品的分类应用提供技术支撑。

液相色谱-质谱联用技术结合多探针底物法研究人参皂苷Rb1的体外代谢

以奥美拉唑、苯妥英、卡马西平和非那西丁为检测肝药酶细胞色素P450酶(CYP450)亚型的专属探针药物,通过原型药物减少量测定法考察药物体外代谢的变化,评价人参皂苷Rb1对CYP450不同亚型酶的作用.结果表明,P2C9,P2C19和P3A4实验组与对照组差异不显著,P1A2实验组与对照组差异显著,表明人参皂苷Rb1能诱导P1A2亚型酶的活性,促进底物与酶反应,加快底物的代谢,而对P2C9,P2C19和P3A4三个亚型酶有弱的诱导或无诱导作用.根据快速分离液相色谱-质谱联用(RRLC-MS/MS)检测结果推断,人参皂苷Rb1在CYP450酶中的代谢产物可转化为人参皂苷Rb1氧化产物(Rb1+O)及人参皂苷Rd和F2.

醒酒益肝颗粒处方工艺及质量标准

目的优选醒酒益肝颗粒（人参与葛花）的处方与制备工艺并建立质量标准。方法采用湿法制粒技术,通过单因素试验优选处方工艺;采用薄层色谱法对葛花及人参进行薄层鉴别,采用高效液相色谱法测定鸢尾苷的含有量。结果最佳处方工艺为药材提取物-可溶性淀粉-乳糖（2∶2∶1）,润湿剂为70%乙醇;薄层鉴别斑点清晰,阴性无干扰;鸢尾苷在0.140 0-0.420 1 mg/m L范围内呈良好线性关系,平均回收率为100.19%。结论颗粒剂的处方工艺合理可行,所建立的质量控制方法专属性强,重复性好,可用于醒酒益肝颗粒的质量控制。

黄泥煨制人参中皂苷成分的RRLC-Q-TOF MS分析

人参作为新资源食品,有多种炮制方法的应用。本研究对于黄泥煨制的人参化学成分是否安全、可靠提供了借鉴。利用高分离度快速液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)法研究黄泥煨炮制方法的人参化学成分。鲜人参黄泥煨制的样品溶解离心过滤后,采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱,以0.1%甲酸水-乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱,高分辨质谱进行检测,Masshunter Qualitative Analysis软件与人工相结合进行数据分析。结果表明,本研究鉴定了31种人参皂苷,比较了黄泥煨制人参与其他炮制方法人参中人参皂苷的相对百分含量差异,同时检测到F_2、Rg_3等稀有人参皂苷。该研究可为人参的使用提供更多的途径,能够为开发人参的多种保健功能提供依据。

高效液相色谱-飞行时间质谱联用法分析人参及人参皂苷与山楂配伍过程中的水解行为

利用高效液相色谱-飞行时间质谱联用的方法,分别对人参配伍山楂前后人参皂苷的变化进行分析,同时对人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rd与山楂配伍的水解规律进行系统研究,并与单独煎煮液、仿山楂配伍pH值煎煮液的水解产物进行比较,结果发现人参与山楂配伍后人参皂苷Rg1、Rb1含量明显减少,而人参皂苷Re、Rd、Rg2、Rg3、F2、Rh1含量明显增加,其中人参皂苷Re与山楂配伍后水解产物为人参皂苷20(R)-Rg2、20(S)-Rg2,仿山楂配伍pH值水解产物为人参皂苷20(R)-Rg2、20(S)-Rg2、Rg4、Rg6;人参皂苷Rg1与山楂配伍后水解产物为20(S)-Rh1、20(R)-Rh1,仿山楂pH值水解产物为20(S)-Rh1、20(R)-Rh1、Rh4、Rk3;人参皂苷Rb1与山楂配伍后水解产物为Rd、20(S)-Rg3,仿山楂pH值水解产物为F2、20(S)-Rg3;人参皂苷Rd与山楂配伍后水解产物为F2、20(S)-Rg3、20(R)-Rg3,仿山楂pH值水解产物为20(S)-Rg3、20(R)-Rg3。研究表明,不同人参皂苷和山楂配伍后与仿山楂pH值的水解产物并不相同,人参与山楂配伍改变了人参皂苷成分的种类及含量。本研究为临床方剂中人参与山楂配伍后成分的变化提供物质基础数据。

盐酸多奈哌齐联合银杏叶提取物治疗老年性痴呆疗效的Meta分析

目的系统性评价盐酸多奈哌齐(DPZ)联合银杏叶提取物(EGB)对老年性痴呆(SD)的临床疗效。方法检索Pub Med、VIP、中国知网和万方数据库关于DPZ与EGB联用治疗SD的资料。检索时限为2000—2015年。根据Jadad评分对纳入文献的质量进行严格评价和资料提取,对符合质量标准的文献进行Meta分析。统计学分析采用Rev Man 5.3软件。结果共纳入13篇文献。Meta分析结果:DPZ/EGB联用的MMSE评分优于单用DPZ(P<0.05);DPZ/EGB联用的MMSE、ADL评分优于单用EGB(P<0.05);与单用DPZ或EGB比较,DPZ/EGB联用改善认知能力的临床疗效较好(P<0.05)。结论 DPZ/EGB联用与单用DPZ或EGB对SD认知能力的临床疗效相比有优越性,不良反应发生率方面无差异。

红参中原人参三醇型皂苷组在肠道菌群中体外转化及对肠道菌群的作用

采用高分离度快速液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)和超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用技术(UPLC-QQQ MS)对红参中原人参三醇型皂苷组在人肠道菌群中体外代谢转化产物进行定性定量分析,并应用16S rDNA高通量测序技术分析原人参三醇型皂苷组对人肠道菌群多样性的影响。RRLC-Q-TOF MS采用Supelco Ascentis Express C18色谱柱(50 mm×3.0 mm×2.7μm),UPLC-QQQ-MS/MS采用Thermo Syncronis-C18色谱柱(100 mm×2.1 mm×1.7μm),均以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,质谱分析均采用电喷雾负离子模式采集。原人参三醇型皂苷组中的人参皂苷Re、Rg1在人肠道菌群孵育后,RRLC-Q-TOF MS通过对照品比对及高分辨质谱数据解析分析转化产物为Rg2、Rh1、F1和PPT。UPLC-QQQ MS定量分析代谢产物的转化率,在代谢转化第60 h时,产物Rg2、Rh1、F1、PPT的生成率为6%、12%、11%和56%。应用Illumina Hiseq 2500平台对粪便样本肠道菌群进行基因测序,与空白组粪便比较,原人参三醇型皂苷组在门水平上显著增加Firmicutes相对丰度,显著降低Bacteroidetes、Proteobacteria相对丰度;在属水平上Prevotella9、Faecalibacterium、Dialister相对丰度显著增加,显著降低Escherichia-Shigella、Dorea、Lachnoclostridium相对丰度。该研究为基于肠道菌群对原人参三醇型皂苷药效物质基础的确定和药效作用靶点提供依据。

解酒护肝颗粒脂溶性成分提取工艺的优化

目的优选解酒护肝颗粒中脂溶性成分的提取工艺。方法采用正交设计法,以总皂苷含量为指标,选取乙醇体积分数、加醇量、提取时间及提取次数为考察因素,优选解酒护肝颗粒中脂溶性成分的提取工艺。结果脂溶性成分最佳提取工艺为加8倍量70%乙醇,提取2次,每次1 h。结论确定了解酒护肝颗粒脂溶性成分的最佳提取工艺,简便易行,适合工业化生产。