姜黄素在脑血流低灌注致血管性痴呆青年鼠和老年鼠中的作用及差异比较

目的:观察姜黄素(curcumin)对脑血流低灌注所致血管性痴呆(vascular dementia,VD)青年鼠和老年鼠学习记忆能力以及海马组织形态学的影响,并进一步观察比较姜黄素对VD的疗效是否有年龄差异性。方法:分别将50只青年及50只老年Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常对照组、假手术组、单纯缺血组(2VO)组、低剂量组(curcumin,50 mg/kg)及高剂量组(100mg/kg),每组各10只,采用永久性双侧颈总动脉结扎法(2VO法)制备VD模型。药物治疗组于术后24 h开始每日腹腔注射curcumin,连续给药30 d;采用Morris水迷宫实验测试两个年龄段各组大鼠的学习和空间记忆能力变化;采用HE染色和尼氏(Nissl)染色观察两个年龄段各组大鼠海马CA1区组织形态学改变。结果:Morris水迷宫试验表明,脑血流低灌注可导致老年大鼠及青年大鼠学习记忆能力下降(P<0.05),经姜黄素处理后学习记忆能力均明显改善(P<0.05);HE染色及尼氏染色显示脑血流低灌注可导致老年及青年VD大鼠海马CA1区出现病理形态学改变,姜黄素能减轻老年及青年VD大鼠海马CA1区的病理形态学改变;但2个年龄段大鼠间的学习记忆能力及病理改变差异无统计学意义(P>0.05)。结论:姜黄素能减轻老年及青年VD大鼠的脑损伤并改善认知功能障碍,其治疗效果具有一定的量效关系,但无年龄差异性;减轻海马组织的病理性损伤可能是姜黄素改善VD大鼠认知功能障碍的机制之一。

miR-124-3p通过负调控Caveolin-1表达N2a/APPswe细胞凋亡率及细胞内钙离子浓度

目的:探讨在阿尔茨海默病(Alzheimer’s diseases,AD)细胞模型中miR-124-3p通过调控Caveolin-1的表达对细胞凋亡率及钙离子浓度的影响。方法:体外培养野生型N2a(N2a/WT)和N2a/APPswe细胞,real-time PCR及Western blot分别检测miR-124-3p与β-淀粉样蛋白前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)m RNA及蛋白的表达。双荧光素酶报告实验分析miR-124-3p与Caveolin-1之间靶向调控关系。N2a/APPswe细胞瞬时转染miR-124-3p模拟物(mimics),real-time PCR、Western blot分别检测Caveolin-1 m RNA和蛋白的表达。N2a/APPswe细胞分别瞬时转染miR-124-3p模拟物(mimics)、pc DNA-Caveolin-1、Caveolin-1-si RNA,流式细胞仪分析细胞凋亡水平,测定细胞内游离钙离子浓度。结果:与WT组相比,APPswe组APP m RNA和蛋白水平表达都明显升高(分别为P=0.000,P=0.000),miR-124-3p表达明显降低(P=0.000)。双荧光素酶报告实验表明,和与突变型载体(p GL3-Caveolin-1 3’UTR MUT)共转染组相比,与野生型载体(p GL3-Caveolin-1 3’UTR WT)共转染组的相对荧光素酶活性和明显减弱(P=0.004);转染miR-124-3p mimics后,与空载体组比较,miR-124-3p mimcs转染组的Caveolin-1 m RNA和蛋白的表达明显下调(分别为P=0.000,P=0.000);分别转染miR-124-3p mimics、Caveolin-1-si RNA后,与空载体组比较,细胞凋亡率降低(分别为P=0.000,P=0.000),游离钙离子浓度降低(分别为P=0.000,P=0.000);转染pc DNA-Caveolin-1后,得到与上述相反的结果(分别为P=0.000,P=0.000)。结论:miR-124-3p可以通过靶向下调Caveolin-1的表达,抑制AD细胞凋亡,降低细胞中游离钙离子浓度,从而发挥神经保护作用,为AD的防治提供新的思路和靶点。

姜黄素通过调节α-synuclein和MAP2的表达改善AD转基因鼠的认知功能

目的:观察姜黄素(curcumin)对APPswe/PS1d E9双转基因小鼠认知功能的影响以及对海马组织中α-突触素(α-synuclein)和微管相关蛋白2(microtubule associated protein-2,MAP2)表达的影响,并探讨其可能的机制。方法:将3月龄APPswe/PS1d E9双转基因小鼠随机分为未处理组、姜黄素低剂量组和姜黄素高剂量组,每组10只,未处理组给予正常饲料,低、高剂量姜黄素组按照160、1 000 mg/kg拌饲喂养,连续喂养6个月,采用Morris水迷宫检测姜黄素对双转基因鼠空间学习记忆能力的影响;采用免疫组化检测姜黄素对双转基因鼠海马中α-synuclein和MAP2表达的影响。结果:Morris水迷宫实验表明姜黄素可以明显改善双转基因鼠学习记忆能力(P<0.05);免疫组化结果显示与未处理组相比,低、高剂量姜黄素处理组小鼠海马内α-synuclein阳性细胞数均减少(P<0.05),呈剂量依赖性;但MAP2阳性表达随着姜黄素浓度的升高而增加(P﹤0.05)。结论:姜黄素可能通过抑制α-synuclein表达并增强MAP2的表达,从而改善AD转基因鼠的认知和记忆功能起到神经保护作用。

过表达脑红蛋白抑制双转基因AD小鼠脑中Aβ诱导的凋亡

目的:研究AD双转基因(APPswe/PS1d E9)小鼠侧脑室注射质粒p NGB后,过表达脑红蛋白(neuroglobin,NGB)对Aβ诱导的AD小鼠脑中细胞凋亡的影响及其潜在机制。方法:将24只鉴定后的13月龄AD双转基因阳性小鼠(雌雄各半)随机分为对照组、侧脑室注射生理盐水+pc DNA3.1(1 g/L)组和侧脑室注射pc DNA3.1(1 g/L)+p NGB组。采用免疫组化检测鼠脑Aβ1-42表达情况,TUNEL染色检测脑内细胞的凋亡情况;Western blot检测鼠脑内与凋亡密切相关的cleaved caspase-3、caspase-9以及PI3K、p-Akt、Akt的蛋白水平。结果:与对照组和注射生理盐水组比较,注射p NGB组小鼠脑内Aβ1-42的表达明显受到抑制(P<0.01),TUNEL染色阳性细胞数也明显减少(P<0.01);过表达NGB能够明显抑制脑组织内cleaved caspase-3和caspase-9的蛋白表达(P<0.01),促进Akt磷酸化水平的增强(P<0.01)。结论:p NGB过表达能够明显抑制Aβ的生成并抑制Aβ诱导的细胞凋亡,其机制可能与激活PI3K/Akt通路进而抑制与凋亡密切相关的cleaved caspase-3和caspase-9的表达有关。

miR-124-3p通过负调控Caveolin-1表达降低N2a/APPswe细胞内Tau蛋白磷酸化水平

目的探讨在阿尔茨海默病(AD)细胞模型中miR-124-3p通过调控Caveolin-1的表达对细胞内Tau蛋白磷酸化水平的影响。方法体外培养野生型N2a(N2a/WT)和N2a/APPswe细胞,荧光定量PCR及Western blot分别检测miR-124-3p、APP和Caveolin-1的表达;N2a/APPswe细胞分别转染miR-124-3p模拟物、Caveolin-1过表达载体及干扰RNA后,用荧光定量PCR及Western blot分别检测Caveolin-1、Tau和Tau-Ser404表达。结果与野生型N2a细胞比较,N2a/APPswe细胞中miR-124-3p表达降低(P<0.01),APP表达升高(P<0.01),Caveolin-1表达升高(P<0.01)。N2a/APPswe细胞转染miR-124-3p模拟物后,Caveolin-1表达降低(P<0.01),Tau-Ser404/Tau降低(P<0.01)。N2a/APPswe细胞转染Caveolin-1过表达载体后,Tau-Ser404/Tau升高(P<0.01)。转染干扰RNA后TauSer404/Tau降低(P<0.01)。结论 miR-124-3p可能通过调节其靶基因Caveolin-1的表达而降低Tau蛋白磷酸化水平,在AD中发挥神经保护作用。

563例宫颈意义不明的非典型鳞状上皮细胞病例HPV基因分型检测的临床回顾性分析

目的:探讨HPV基因分型检测对于细胞学诊断宫颈意义不明的非典型鳞状上皮细胞(ASC-US)病变的临床意义,为临床提供指导和管理依据。方法:选取2016年1月至2017年5月在宜昌市中心人民医院妇科门诊接受脱落细胞学检查,结果为ASC-US后行HPV基因分型检测的病例,对其结果进行回顾性分析。结果:筛选出的563例ASC-US病例中,HPV阳性病例295例,占总数的52.4%;不同年龄段的HPV阳性率差异具有统计学意义(P=0.020),其中19～29岁年龄段HPV阳性率最高;高危型HPV阳性病例264例,占总阳性病例的89.49%,不同年龄段的高危型HPV阳性率差异不具有统计学意义(P=0.963);感染率最高的HPV亚型分别是HPV16(21.36%),HPV58(19.32%)和HPV52(17.29%),均为高危型病毒。结论:HPV基因分型检测,尤其高危型HPV检测可以对ASC-US病例起到分流管理的作用。

过表达脑红蛋白通过激活PI3K/Akt信号通路防治AD的体外研究

目的:探索过表达脑红蛋白(neuroglobin,NGB)对转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞的神经保护作用及机制。方法:成功构建过表达NGB的质粒p EGFP-NGB并转染入已预先转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞,MTT法检测过表达NGB对该细胞存活率的影响;JC-1法检测其对细胞线粒体膜电位的影响;流式细胞术检测过表达NGB对细胞凋亡的影响;Western blotting法检测其对细胞中p-Akt、Akt和caspase-3/9表达的影响;ELISA法检测其对细胞内Aβ42生成的影响。结果:MTT结果显示,与对照组和空质粒组比较,转染NGB后,p APPswe-SH-SY5Y细胞的存活率明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。JC-1染色结果显示过表达NGB能够明显抑制转染p APPswe对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的降低作用(P<0.05)。流式细胞术结果显示过表达NGB能够抑制早、晚期细胞的凋亡。而Western blotting显示过表达NGB不仅能抑制细胞内caspase-3和caspase-9蛋白水平的表达,而且还能够促进细胞内p-Akt蛋白的表达,而这种促进作用能够被PI3K/Akt的抑制剂LY294002所抑制。ELISA结果显示过表达NGB能够明显抑制细胞内Aβ42的生成。结论:过表达NGB能够显著抑制p APPswe诱导的细胞损伤,而且还抑制与细胞凋亡密切相关的caspase-3和caspase-9等蛋白表达。NGB的神经保护作用可能是通过激活PI3K/Akt信号通路来实现的。

胸水细胞块诊断转移性恶性黑色素瘤1例

患者女性，66岁。因乏力、纳差3个月，发现血肌酐升高1周入院。入院后胸部CT提示右侧大量胸腔积液，纵隔疝形成。遂行胸腔积液引流并送检淡黄色胸水100ml做细胞病理学检查。病理检查细胞病理涂片，Diff-Quih染色。

针吸细胞学诊断甲状腺乳头状癌的病理特征分析

目的:探讨甲状腺乳头状癌的针吸细胞学检查特点。方法:收集我院经针吸细胞学检查诊断并由组织病理确诊的334例病例,对甲状腺乳头状癌的针吸细胞学特点进行分析。结果:甲状腺乳头状癌的针吸细胞学镜下形态特征可归纳为11项,针吸细胞学诊断甲状腺乳头状癌敏感性约为97.6%。结论:针吸细胞学检查诊断甲状腺乳头状癌具有特征性的镜下形态学特点,是临床术前诊断的重要辅助检查方式。